9001-54-1
中文名称
玻璃酸酶
英文名称
Hyaluronidase
CAS
9001-54-1
分子式
n.a.
分子量
342.3
MOL 文件
9001-54-1.mol
更新日期
2024/05/24 14:36:19
9001-54-1 结构式
基本信息
中文别名
粘朊酶玻璃酸酯
玻璃酸酶
粘蛋白酶
木瓜凝乳酶
透明质酸酶
玻璃样酸酶
木瓜溶菌酶
玻璃糖醛酸酶
动物糖醛酸酶
英文别名
AidaseHyalas
Atidase
Mucinase
Diffusin
Enzodase
Hyaluron
Hyalidase
EC 4.2.2.1
Hyaluronipase
所属类别
生物化学品: 酶类: 治疗用酶物理化学性质
外观性状玻璃酸酶系从哺乳动物睾丸中提取的一种能水解玻璃黏多糖的酶，是一种白色或微黄色粉末，在水中易溶，在乙醇、丙酮或乙醚中不溶。无臭。稳定性较好，420C持续加热60min活力不损失，1000C 持续加热5 min活力可保留80%。在低浓度的水溶液中较易失活，一般可用明胶或阿拉伯胶保护防止失活。Fe2+、Cu2+离子对酶有可逆抑制作用。Pb2+、Hg2+、Ni 2+、等离子对酶活性没有明显影响。在氯化钠（0.15mol/L）或硫酸鱼精蛋白的存在下，硫酸软骨素B（皮肤素）、硫酸类肝素、硫酸角质素、肝素钠及高浓度玻璃酸对玻璃酸酶的抑制作用可被逆转。
玻璃酸酶注射液为玻璃酸酶加适宜的赋形剂，经冷冻干燥的无菌制品，为白色或类白色的冻干块状物或粉末。水溶液不稳定，需临用前配制。
玻璃酸酶注射液为玻璃酸酶加适宜的赋形剂，经冷冻干燥的无菌制品，为白色或类白色的冻干块状物或粉末。水溶液不稳定，需临用前配制。
储存条件−20°C
形态lyophilized powder
颜色white to slightly brown
Merck13,4777
EPA化学物质信息Hyaluronidase(9001-54-1)
制备方法
方法1
由1-氯代酞嗪（见9720）经肼化而将1-氯代酞嗪加到水合肼中，在87-89℃搅拌回流12h，趁热过滤。滤液冷却结晶，过滤，得肼酞嗪。肼酞嗪用15%相加酸溶解成盐，再加乙醇使结晶析出，可得肼酞嗪盐酸盐。方法2
方法一、牛羊睾丸提取法切碎、提取将冻冻或新鲜羊睾丸洗净，剥除内外层及副睾丸，切碎，用绞肉机绞成糜浆，称取100kg，倒入预先配好的乙酸溶液（水90L、冰醋酸0.6L、1mol/L盐酸10L 混合而成）中，在-50以下的冻库中，每隔15min用力搅拌3～5min，使之充分提取4h，然后进行扯浆，得浆液约125～140L。浆渣备第2次提取玻璃酸酶用。
羊睾丸Hac;HCl;-50→提取提取液
盐析、吊滤取第一次浆液，在不断搅拌下每升浆液中加入硫酸铵（工业用）210g。使之安全溶解，静止1h后，转入双层用涤纶袋吊滤，反复两次。次日得澄清滤液，在不断搅拌下每升加入硫酸铵290g。使之完全溶解，静止1h 后，用涤纶袋吊滤，过夜，次日拆袋，得粗制品。
提取液（NH42SO4→盐析；吊滤粗品
盐析、透析取精品溶于5L的冰冷蒸馏水中，缓缓加入硫酸铵固体125g，并不断搅拌，使之完全溶解，于冷库中静置过夜，次日除去液面油脂，用胶管虹吸中层清液，用布氏漏斗过滤，上层和底层沉淀最后用布氏漏斗过滤，合并滤液。在滤液中缓缓加入750g硫酸铵，充分搅拌，待完全溶解后，于冷库中放置过夜。次日，弃去上层清液（如上层溶液浑浊不清，可在冷库中放置3～5d ，待上层溶液变清）得盐析沉淀物，再溶于0.5L冰蒸馏水中，进行透析，每袋约100ml，放在pH6.5的磷酸盐-枸橼酸缓冲液[枸橼酸7.5g、磷酸氢二钠（12个结晶水）62g、氯化钠70g加水配制成2500ml，用枸橼调整pH6.5]2500ml中，于冷库透析24h，得透析液。酶活力约250000U/ml。
粗品（NH4）2so4;磷酸盐-枸橼酸→pH6.5；盐析；透析透析液
去热原、干燥将透析液离心分离，离心液置于冰冷的水溶中，加入Na3PO4·12H2O(150g/L即15%)溶液50ml, 缓缓加入乙酸钙（200g/L即20%）30ml,并不断搅拌。随后用氢氧化钠（0.5mol/L）调节pH至8.5，继续搅拌10min，4号垂熔玻璃漏斗过滤（滤并瓶放在冰水浴中），滤液用盐酸（ 0.5mol/L）中和pH为7，冷冻干燥，得酶精制品。
透析液Na3PO4；Ca(Ac)2; pH8.5→去热原精制品HCl;pH7→干燥干精制品
冻干制剂取一定量精制品溶于5%的明胶注射用水溶液中，用氢氧化钠调节pH5～7，除菌，过滤，分装，每瓶0.5ml, 冷冻干燥，即得注射用玻璃酸酶制剂，每瓶含玻璃酸酶100或150U，按睾丸质量计算收率约为20000U/kg。
干精制品5%水解明胶；pH6→制剂冻干制剂成品
方法二微生物发酵法
培养、发酵培养基；
淀粉1份；棉子饼1份；谷胱粉1份；
干酵母1份；磷酸氢二钾0.1份链霉菌；300C;3d→发酵发酵液
消泡剂0.4%
沉淀、分离
发酵液→浓缩液丙酮→沉淀粗品色谱柱→分离精制品
冷冻、干燥
精制品5%水解明胶→冷冻干燥冻干制剂成品
应用领域
参考质量标准
▼
▲
原料中国药典2000版443页
指标名称
指标
指标名称
指标
效价/（单位/mg）
≥300/吸收度（300单位/ml）
酸碱度（pH值）
4.5～ 7.5
280nm
≤0.6
溶液的澄清度与颜色
澄清无色，若
260nm≤0.42
有色，比4号
异常毒性（小鼠皮下注射，48h）
标准比色液浅
无组织坏死及死亡
酪氨酸/（pg/单位）
≤0.1/热原/符合规定
注射液中国药典2000年版444页
指标名称
指标
指标指标名称
指标
效价/应为标示量的/干燥失重/g
≤5.0
90.0%～120.0%
热原、无菌
符合规定
酸碱度（pH值）6.0～7.5
其他
符合注射有关规定
常见问题列表
玻璃酸钠注射液
玻璃酸钠又名透明质酸钠，是广泛存在于动物和人体内的生理活性物质，在人皮肤、关节滑膜液、脐带、房水、眼玻璃体中均有分布，由N-乙
酰葡萄糖醛酸反复交替而形成的一种高分子多糖体生物材料。本品具有高度的粘弹性、可塑性、以及良好的生物相容性，在预防粘连和修复软组织方面有明显作用。可用于变形膝关节病和肩关节周围炎的 辅助治疗，临床上用于多种皮肤损伤，促进伤口愈合，对于擦伤及撕裂伤，腿部的溃疡，糖尿病性溃疡，压迫性溃疡，以及清创术、静脉淤滞 性溃疡等均有效。
玻璃酸钠为关节滑液的主要成分，是软骨基质的成分之一。在关节腔内起润滑作用，可覆盖和保护关节软骨，改善关节挛缩，抑制软骨变性变 化表面，改善病理性关节液，增加滴滑功能。