网状纤维染色液(改良GOMORI银氨法)

网状纤维染色液(改良GOMORI银氨法)性质、用途与生产工艺

概述

网状纤维(Reticularfiber)是网状结缔组织内的一种纤维，由网状细胞所产生，直径多在0.2～1.0μm，有韧性而没有弹性。网状纤维的染色方法很多，但染色原理基本一致，大都采用氨银浸法。改良Gomori网状纤维染色原理是利用氨银液易被组织吸附与组织的蛋白质结合，经甲醛还原成黑色或棕黑色的金属银，沉积于组织内及其表面。传统方法中还原后先采用氯化金调色，再用硫代硫酸钠溶液洗去组织上未还原的银盐，本改良法省略该步骤，使网状纤维对比得更清晰。
网状纤维染色液(改良Gomori银氨法)主要经过氧化、漂白、媒染、浸银、还原步骤，与改良Gordon-Sweets法不同之处在于后者采用酸性氧化剂和核固红复染液。冰冻切片、低温切片和火棉胶切片均可用于网状纤维染色，各种固定液均可采用，重金属汞盐或锇盐固定液偶尔会产生一些非特异性银背景。网状纤维染色液(改良Gomori银氨法)常用于鉴别肿瘤的性质和来源、癌与肉瘤、淋巴肉瘤与网状细胞肉瘤、血管内皮瘤与血管外皮瘤、骨尤文瘤与骨网状细胞肉瘤、脑膜瘤与星形细胞瘤、恶性神经鞘瘤及早期浸润癌等。

操作步骤

1、组织固定于10%福尔马林固定液，常规脱水包埋。
2、切片厚4μm，常规脱蜡至水。
3、把切片平置在染色架上，滴加Gomori氧化剂，氧化5min。
4、稍水洗
5、入草酸溶液漂白1～2min。
6、流水冲洗2min，蒸馏水稍洗。
7、硫酸铁铵溶液媒染5min。
8、稍水洗，蒸馏水稍洗。
9、滴加网状纤维染色液(改良Gomori银氨法)染色3min。
10、蒸馏水稍洗。
11、Gomori还原剂还原1min。
12、流水冲洗10min。
13、常规脱水透明，中性树胶封固。

操作注意事项

网状纤维染色中使用的氨银液是一种络合物, 对组织有较强的亲和力, 与组织中的蛋白质结合, 再经甲醛还原成为银后沉积于网状纤维内及其表面, 得以显色。配制氨银液时, 所用的10%硝酸银水溶液不宜太多, 氨水必须新鲜, 逐滴加入浓氨水, 一边滴加一边摇匀震荡, 以严格控制所滴加的浓氨水剂量。氨水若滴加过量, 会不同程度地降低氨银液染色敏感性, 使网状纤维染色过浅, 氨过量也易导致脱片, 以边滴加边摇动, 直至溶液只有少量微颗粒为佳。

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