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156289-80-4

中文名称 波形蛋白
CAS 156289-80-4
156289-80-4 结构式 156289-80-4 结构式

物理化学性质

储存条件−20°C
形态lyophilized powder

安全数据

危险性符号(GHS)
GHS07, GHS08
警示词危险
危险性描述H315-H319-H360D
危险品标志T
危险类别码61
安全说明53-45
WGK Germany3

常见问题列表

概述

Vimentin(波形蛋白,Vim)为极度保守的细胞骨架Ⅲ型中间丝蛋白,主要表达于中胚层起源的间充质细胞中,以多聚体纤维稳定存在。Vim单体仅溶于高离子序列溶液如尿素、阴离子表面活性剂、盐酸胍溶液等,分子量为53kDa,等电点5.05,在pH值7.2-7.4最稳定。Vim具有调节细胞分化、迁移、信号传导、凋亡以及自身抗原和细胞因子特性,在感染、肿瘤、自身免疫、固有免疫等方面显现复杂的功能,具有生物药品开发的广阔前景。
156289-80-4

纯化方法

(1)粗提:解剖猪眼取晶状体,浸入粗提液后匀浆制得混悬液;将混悬液离心后弃上清液,取沉淀物重悬数次并离心;取沉淀物冻干制得粗提粉;
(2)精提:以精提液溶解步骤(1)中的粗提粉,离心后去沉淀,取上清液浓缩后得到精提物溶液;
(3)分离:取精提物溶液加载到预平衡的DEAESepharoseFF柱(二乙胺基乙基键合快流速琼脂糖凝胶弱阴离子交换柱),先使用第一缓冲液洗脱大部分的42kDa杂蛋白,再使用第二缓冲液进行线性洗脱,收集馏分;
(4)纯化:对各馏分用10%SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶)电泳,做Western-Blot(免疫印迹法)实验进行蛋白成分检测;合并53kDa目标波形蛋白含量达80%以上的馏分,经透析、冻干即得纯化Vimentin粉。

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