人2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)ELISA KIT性质、用途与生产工艺
人2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)ELISA KIT用于测定人血清,血浆及相关液体样本中2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)的含量。
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)水平。用纯化的人2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG),再与HRP标记的2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)浓度。
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
人2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)ELISA KIT
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