苏木精性质、用途与生产工艺
天然染料苏木精是从南美的苏木(Haematoxylon campechianum)干枝中用乙醚浸制出来的一种色素,是最常用的染料之一。含有3分子结晶水
,在100~120℃溶于本身的结晶水中。在水溶液中,特别是在碱溶液中易被空气氧化成红棕色的氧化苏木精。苏木精不能直接染色,必须暴露
在通气的地方,使他变成氧化苏木精(又叫苏木素)后才能使用,这叫做“成熟”。苏木精的“成熟”过程需时较长,配置后时间愈久,染色
力愈强。被染材料必须经金属盐作媒剂作用后才有着色力。所以在配制苏木精染剂时都要用媒染剂。常用的媒染剂有硫酸铝按、钾明矾和铁明
矾等。苏木精是淡黄色到锈紫色的结晶体,难溶于冷水和乙醚和甘油,易溶于热水和热酒精,溶于碱、氨和硼砂的溶液,是染细胞核的优良材
料,他能把细胞中不同的结构分化出各种不同的颜色。分化时组织所染的颜色因处理的情况而异,用酸性溶液(如盐酸—酒精)分化后呈红色
,水洗后仍恢复青蓝色,用碱性溶液(如氨水)分化后呈蓝色,水洗后呈蓝黑色。
苏木精-伊红染色又称“苏木素-伊红染色“、“HE染色”,是组织学最常用的染色方法之一。
HE染色是一种以形态为基础,结合应用化学技术对组织、各种细胞进行染色的实验技术,用于研究组织细胞的生理、病理和化学结构。
基本原理:去氧核糖核酸(DNA)两条链上的磷酸基向外,带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键结合而被染色。苏
木精在碱性溶液中称蓝色,所以细胞核被染成蓝色。伊红Y是一种化学合成的酸性染料,在水中离解成带负电荷的阴离子,与蛋白质的氨基正电
荷的阳离子结合使胞浆染色,细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织、嗜伊红颗粒等被染成不同程度的红色或粉红色,与蓝色的细胞核形成鲜明对
比。伊红是细胞浆的良好染料。
一般染色组织切片厚度为3µm左右,中枢神经系统6~8µm,肾小球基底膜染色观察时要求1.5~2µm标准厚度。
染色结果:细胞核被苏木素染成蓝色。细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织、嗜伊红颗粒等被伊红Y染成不同程度的红色或粉红色,与蓝色的细胞
核形成鲜明对比。
这种染色方法的基础是组织结构对不同染料的结合程度不同。染料苏木精可以将嗜碱性结构染成蓝紫色,而伊红可以将嗜酸性结构染成粉红色
。嗜碱性结构通常包括含有核酸的部分,如核糖体、细胞核及细胞质中富含核糖核酸(RNA)的区域等。嗜酸性结构则通常由细胞内及细胞间的
蛋白质,如路易体(Lewy body)、酒精小体(Mallory body)、细胞质的大部分等。
有时,黄褐色也会出现在染色样本中,这是由于组织内原有的色素,例如黑色素等造成的。
配方
苏木精 1 g 无水乙醇 10 ml
蒸馏水 200 ml 钾明矾 20g
HgO 0.5 g
先将苏木精溶于无水乙醇中,备用。把明矾放入蒸馏水,加热溶解,再加入备用的苏木精,煮沸 2 分钟,先加入极少量的氧化汞(红色、黄色
均可),防止氧化过程中液体剧烈沸腾外溢(最好选用比配制容积大一倍烧杯,烧杯比三角烧瓶更不容易外溢),玻棒搅拌,然后,边搅拌边
加入氧化汞。一定要注意开始时只能一点点加,直到液体不再剧烈沸腾了,才能增加加入的量,直至加完。加入氧化汞所用的时间和氧化汞溶
解的程度、电炉的功率是此配方的关键,也是各人配出来染色效果各不相同的原因,具体要根据每人的习惯进行调整,同时也要根据气温而适
当改变加热的时间,加热时间越长,氧化越快。加完后,立即移至冰水中,加速其冷却,静置一夜后,过滤。用前以 5% 的比例加入冰乙酸。
如配好后时间较长,冰乙酸的量可适当多加一点。冰乙酸的量,可直接影响苏木素的着色能力和清晰度。加少了,会造成核浆共染,背景不干
净;加多了,核着色能力下降。此液可放置3月至半年左右。
配方
苏木精 2 g 无水乙醇 250 ml
硫酸铝 17.6 g 蒸馏水 750 ml
碘酸钠 0.2 g 冰乙酸 20 ml
先将苏木精溶于无水乙醇,硫酸铝溶于蒸馏水,然后两液混合后加入碘酸钠,最后加入冰乙酸
。此液为半氧化进行性苏木素液,不会产生沉淀,氧化膜少,从理论上说染色不需要分化,但如果适当深染分化,染色效果更好。配制此染液
的关键在于碘酸钠的量。一、要根据季节气温的改变,适当调整碘酸钠的量,配方里碘酸钠的量一般只适用于夏天,随着气温降低,氧化速度
降低,可适当增加碘酸钠的量,要注意应该从0.05 g开始一点点增加,过量的碘酸钠可使苏木素过氧化,不仅容易坏,而且核浆共染。二、称
量一定要准确,很多单位配此染液总是染不上或染的很慢,主要是天平的精确度差,最好选择最小称量度在10mg以下的天平。三、应该观察碘
酸钠是否在有效期内,是否潮解。
配方
苏木精 2 g 无水乙醇 100 ml
甘油 100 ml 冰乙酸 10 ml
钾明矾 2-3 g 蒸馏水 100 ml
先将苏木精溶于无水乙醇,加甘油和冰乙酸待用。然后把钾明矾溶于蒸馏水,再注入待用的苏木精液,用玻棒搅匀,轻盖瓶口(可用棉花
),置于日光下,经常开启瓶口并摇匀,约二个月后,颜色变褐色即可使用。
配方
苏木精 2 g 无水乙醇 40 ml
硫酸铝钾 100 g 蒸馏水 600 ml
碘酸钠 0.4 g
稍加热将硫酸铝钾溶于蒸馏水中,同时将苏木精溶无水乙醇, 再将二液混合,加入碘酸钠,充分溶解。此液也是进行性苏木素液,从理论
上说染色不需要分化,但如果适当深染分化,染色效果更好。注意事项与Gill改良苏木素液相同。
用途
是染细胞核的优良材料,他能把细胞中不同的结构分化出各种不同的颜色。分化时组织所染的颜 色因处理的情况而异,用酸性溶液(如盐酸—酒精)分化后呈红色,水洗后仍恢复青蓝色,用碱性溶液(如氨水)分化后呈蓝色,水洗后呈蓝黑色。
用途
用作核和染色质的染色剂;用于定性检定铜(II)、铁(III)、钼酸盐、铋(III)和锡(IV)等;用于光度法测定钒、铝、锡(IV)、氟、铌、钽等。墨水制造;用作酸碱指示剂,pH 5.0(黄)~6.0(紫)、0.0(粉红)~1.0(绿)
用途
核和染色质的染色剂。定性检定铜(II)、铁(III)、钼酸盐、铋(III)和锡(IV)等。光度测定钒、铝、锡(IV)、氟、铌、钽等。墨水制造。酸碱指示剂,pH 5.0(黄)~6.0(紫)、0.0(粉红)~1.0(绿)。
苏木精
上下游产品信息
上游原料
下游产品