地高辛(DIG)原位杂交试剂盒

地高辛(DIG)原位杂交试剂盒性质、用途与生产工艺

背景

地高辛(DIG)原位杂交试剂盒是一款利用非放射标记物地高辛(DIG)的原位杂交试剂盒。地高辛标记技术源于一种从洋地黄类植物（毛地黄和毛花毛地黄）中提取的类固醇物质——Digoxigenin（DIG）。由于洋地黄植物的花和叶片Digoxigenin在自然界中的唯一来源，因此抗DIG的抗体不会与其他的生物物质结合，从而可以满足特异性标记的需要。

原理

DIG通过一个含有11个碳原子的空间臂与尿嘧啶核苷酸上的C5位置相连，一定浓度的DIG标记的核苷酸可以通过DNA polymerase(如E.coli DNA Polymerase,T4 DNA Polymerase,T7 DNA Polymerase,Reverse Transcriptase,Taq DNA Polymerase）、RNA polymerase(如SP6,T3或T7 RNA Polymerase)或是末端转移酶（Terminal Transferase）的作用掺入到核苷酸探针中；也可通过随即引物标记（random primed labeling）,缺口平移（nick translation），PCR，3’端标记/加尾或是体外转录制备带有DIG标记的探针。当然也可以通过化学合成的方法进行核苷酸的标记。

应用

该试剂盒主要用于检测样本中目的基因的表达量及表达位置，可用于组织切片（石蜡切片/冰冻切片）、细胞爬片及染色体片等的检测。

用途

地高辛(DIG)原位杂交试剂盒可用于DNA 探针的随机引物标记及各种膜上杂交和原位杂交。

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