人胚肺成纤维细胞
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- CAS号:
- 英文名:
- MRC-5
- 英文别名:
- MRC-5
- 中文名:
- 人胚肺成纤维细胞
- 中文别名:
- MRC-5 人胚肺成纤维细胞系;MRC-5人胚肺成纤维贴壁细胞系;MRC-5 细胞| MRC-5 人胚肺细胞;MRC-5人胚肺成纤维复苏细胞(附STR鉴定报告)
- CBNumber:
- CB25743863
- 分子式:
- 分子量:
- 0
- MOL File:
- Mol file
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人胚肺成纤维细胞性质、用途与生产工艺
人胚肺成纤维细胞来自14周龄男性胎儿的正常肺组织,为有限细胞系该细胞,老化前能传代42到46次群体倍增。它是正常二倍体细胞系,46,XY核型。模式染色体数为46,概率为70%。
1)准备MEM培养基;北美胎牛血清,10%;PS 1%。
2)人胚肺成纤维细胞培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3)人胚肺成纤维细胞冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
将含有1mL人胚肺成纤维细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查人胚肺成纤维细胞密度。
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗人胚肺成纤维细胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2ml完全培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。
4.将人胚肺成纤维细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
人胚肺成纤维细胞可以用于P物质对人胚肺成纤维细胞作用及其机制的研究。
人胚肺成纤维细胞
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