小鼠乳酸ELISA试剂盒

小鼠乳酸ELISA试剂盒性质、用途与生产工艺

用途

小鼠乳酸ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠乳酸（Lactate）水平。

实验原理

用纯化的小鼠乳酸（Lactate）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入乳酸（Lactate），再与HRP标记的乳酸（Lactate）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的乳酸（Lactate）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠乳酸（Lactate）浓度。

应用举例

脂多糖诱导小鼠肺成纤维细胞有氧酵解的生物信息学研究目的:明确脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）对小鼠肺成纤维细胞有氧酵解的诱导作用并使用生物信息学探讨其相关机制。

方法:将培养至4～7代的小鼠肺成纤维细胞接种于六孔培养板,密度1×104/ml。待细胞贴壁后,更换无血清培养基饥饿过夜,采用随机数字表法将其分为4组（n=3）:空白对照组（Con组）,0.5μg/ml LPS组（LPS0.5组）,2μg/ml LPS组（LPS2组）,4μg/ml LPS组（LPS4组）。除Con组外,分别加入以上终浓度的LPS继续培养24小时,收集细胞培养上清液,ELISA法检测不同浓度LPS刺激小鼠肺成纤维细胞24小时后细胞培养上清液中有氧酵解代谢产物乳酸的表达水平;

采用基因芯片技术比较LPS诱导组与空白对照组小鼠肺成纤维细胞基因表达水平,筛选获得两组间差异表达基因,并通过生物信息学分析方法将差异基因在KEGG（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes）数据库中统计分析,寻找与糖代谢相关显著富集的信号通路以明确LPS诱导小鼠肺成纤维细胞有氧酵解的相关机制。

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