MV4-11人急性单核复苏细胞
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- CAS号:
- 英文名:
- MV-4-11
- 英文别名:
- MV-4-11
- 中文名:
- MV4-11人急性单核复苏细胞
- 中文别名:
- 人髓性单核细胞白血病细胞;慢性骨髓单核细胞性白血病;人慢性骨髓单核细胞性白血病;MV4-11 人急性单核细胞系;MV4-11人急性单核贴壁细胞系;MV-4-11慢性骨髓单核白血病细胞;MV-4-11外周血B细胞白血病细胞;人慢性骨髓单核细胞性白血病MV411;MV-4-11人急性单核细胞白血病细胞;MV-4-11慢性骨髓单核细胞性白血病
- CBNumber:
- CB35744504
- 分子式:
- 分子量:
- 0
- MOL File:
- Mol file
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MV4-11人急性单核复苏细胞性质、用途与生产工艺
人慢性骨髓单核细胞性白血病细胞由Rovera课题组建立,来源于一名患有人双表型髓性单核细胞白血病(biphenotypic B myelomonocytic leukemia)的10岁男孩的外周血。Interleukin(IL)-3可以独立地支持该细胞长期生长。
1)配制完全培养基:基础培养基+胎牛血清+双抗(特殊培养基特殊配置);
2)人慢性骨髓单核细胞性白血病细胞复苏:取5ml完全培养基于15ml离心管中,37℃水浴锅预热,从液氮管(或者-80度冰箱)中快速取出冻存的细胞,放入37℃水浴锅中,摇晃使快速化冻(1min左右),然后将化冻的细胞和预热的培养基,移入超净工作台中,化冻的细胞加入到含预热培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3)吸弃上清,得到细胞沉淀,用2ml完全培养基轻轻重悬细胞,加入到T25培养瓶中,做好标记,放入37℃,5%CO2饱和适度培养箱中培养(培养皿复苏效果更好);
4)24h后,观察细胞贴壁情况(未贴壁的即为死细胞--针对贴壁细胞),吸弃旧培养基,加入新鲜的预热(室温或37℃)的完全培养基,继续培养。
1)待人慢性骨髓单核细胞性白血病细胞生长到80%-90%汇合度时,吸弃旧的培养基,加入1ml无菌PBS润洗一次,以去除残余的培养基及血清(血清含有胰酶的抑制因子),然后加入1ml 0.25%胰酶,37℃培养箱中消化(1~2min左右,不同细胞消化时间不同),取出细胞,镜下观察细胞至细胞皱缩变圆;
2)加入1ml完全培养基(含FBS)终止消化,轻轻拍打,使细胞脱落下来成单个细胞悬液,收集细胞于15ml无菌离心管中,1000rpm,离心5min;
3)收集细胞沉淀,完全培养基重悬,一分为二(可根据细胞生长速度调整比例),分别加入到2个新的培养瓶中,做好标记,放入培养箱中培养。
MV4-11人急性单核复苏细胞可用于细胞生物学研究。
MV4-11人急性单核复苏细胞
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