3-硝基邻苯二甲酰肼可用于制备鲁米诺类试剂。3-硝基邻苯二甲酰肼因具有较高的发光量子产率和较好的水溶性，可与多种氧化剂发生化学反应，已成为应用最广泛的化学发光试剂。 其发光机理为氧化反应发光，它们在碱性条件下通过辣根过氧化物酶催化，被双氧水氧化生产其回到氨基临苯二酸的激发态中间体，当其回到基态时即会发出光子。因此，鲁米诺类试剂有良好的应用价值以及广阔的市场需求前景。
向干燥的1000ml三口烧瓶里，加入100g 3-硝基邻苯二甲酸二甲酯，乙醇140g，水合肼(50％)83.6g，搅拌加热至回流，维持回流反应3h，搅拌下降温，冷却到室温后抽滤。结晶再加水溶解、过滤，溶液再加浓盐酸酸化至PH1.5-2，过滤，水洗、干燥得60g，外观为淡黄色结晶粉末3-硝基邻苯二甲酰肼，产率69％，纯度98.2％，熔点＞300℃。