小鼠骨骼肌卫星细胞

小鼠骨骼肌卫星细胞性质、用途与生产工艺

概述

卫星细胞是一种神经胶质细胞。分布于周围神经系统的神经胶质有两种，一称Schwann细胞，亦名神经膜细胞，另一种即为卫星细胞。后者位于神经细胞胞体的周围，为扁平或立方形，可能有保护和营养神经元的作用。小鼠骨骼肌卫星细胞（skeletalmusclesatellitecell）是位于肌细胞膜和基膜之间的具有增殖和分化潜力的生肌干细胞，这些细胞对于出生后骨骼肌的生长和再生具有重要的意义。骨骼肌卫星细胞（通常以静息状态存在于肌纤维肌膜与基底膜之间，在一定条件下可以被激活，发生增殖和分化，形成骨骼肌细胞。1961年首次在蛙的肌肉中发现了肌卫星细胞，其后，有多种动物的肌卫星细胞被成功分离，并进行了体外培养。肌卫星细胞在肌肉的发育和再生中发挥了重要作用，而肌卫星细胞的增殖和分化受众多因素的影响，目前，其分离效率仍然很低，建立高效的体外培养、鉴定与诱导分化方法仍然是卫星细胞研究和利用的关键。

原代培养

取小鼠后肢肌肉组织，取出脂肪，采用胰酶消化法获得细胞悬液，经差速贴壁法纯化骨骼肌卫星细胞，通过免疫细胞化学方法鉴定骨骼肌卫星细胞，用此法分离到了小鼠骨骼肌卫星细胞。取第3代生长旺盛的骨骼肌卫星细胞用慢病毒进行转染。结果分离到的细胞呈小圆形，培养2天后可见纺锤形细胞。培养3天后卫星细胞开始增殖。用携带绿色荧光蛋白（GFP）报告基因的慢病毒转染 细胞，第4天可见绿色荧光蛋白表达。本研究分离培养出了小鼠骨骼肌卫星细胞，并用携带绿色荧光蛋白（GFP）报告基因的慢病毒成功转染小鼠骨骼肌卫星细胞，该试验为进一步开展哺乳动物骨骼肌生长和发育机理的研究奠定了前期基础。

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