人宫颈癌组织源细胞
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- CAS号:
- 英文名:
- Human cervical cancer tissue-derived cells
- 英文别名:
- Human cervical cancer tissue derived cells
- 中文名:
- 人宫颈癌组织源细胞
- 中文别名:
- 人宫颈癌组织源细胞
- CBNumber:
- CB44818625
- 分子式:
- 分子量:
- 0
- MOL File:
- Mol file
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人宫颈癌组织源细胞性质、用途与生产工艺
人宫颈癌组织源细胞分离自人宫颈癌组织纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
1.将宫颈癌组织至于无菌的培养皿中用含双抗的1×PBS(pH=7.4)清洗若干次至无明显血细胞;
2.剪取宫颈癌组织边缘微血管丰富的组织,用含双抗的1×PBS(pH=7.4)清洗两次;
3.将剪取的宫颈癌边缘*成2-3mm3大小,加入含双抗的1×PBS(pH=7.4)清洗;
4.用进行过灭菌处理的玻璃滴管将剪碎的组织块和清洗用的1×PBS(pH=7.4)一起转入15ml离心管中;
5.250rpm/min离心2 min,小心倾去液体,再加入适量的含双抗的1×PBS(pH=7.4),用玻璃滴管吹吸液体以清洗组织块;
6.继续250rpm/min离心2 min,小心倾去液体,重复上述步骤若干次,直至离心后的液体中观察不到明显的红色;
7.将清洗好的组织块重新转至无菌的培养皿中,用无菌的200 ml的吸头将组织块贴于25cm2培养瓶中;
8.加入2ml培养基,将培养瓶倒置放于37℃、5%CO2的培养箱中2-3h之后正置培养瓶继续培养;
9.培养若干天后,可观察到组织块周围陆续有细胞爬出,继续培养几天,直至组织块周围的细胞达到较高密度(培养其间两天换液一次,换液操作时动作一定要轻柔,以防组织块被摇下);
10.当组织块附近的细胞生长到较高密度后,将贴壁的组织块吹下,换新的培养基继续培养24;
11.24h后,用0.25%的Trypsin-EDTA消化细胞,FBS中止消化,将消化后的细胞悬液转入15ml离心管,1000rpm/min离心5min,之后倾去废液,用培养基重悬细胞,转入原来的培养瓶中,继续在37℃、5%CO2的培养箱中培养。
人宫颈癌组织源细胞
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