Yeast genomic DNA rapid extraction kit

Yeast genomic DNA rapid extraction kit性质、用途与生产工艺

背景

DNA的提取是根据DNA不溶于酒精的化学性质进行实验。DNA是生物的主要遗传物质，它位于细胞核的染色体上。DNA在一定浓度的食盐溶液中可以析出，细胞的一些膜物质可用清洁剂吸附。DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的另外一些物质则可以溶于酒精溶液，利用上述原理可以提取出含杂质较少的DNA。

产品描述

本试剂盒采用DNA吸附柱和独特的溶液系统，适合于从多种来源的酵母培养物中快速简单地提取基因组DNA。约3ml处于指数生长期的酵母培养液一般一次抽提可纯化出10-15μg的高质量的基因组DNA。纯化DNA产物可直接用于PCR、酶切和杂交等实验。酵母细胞经lyticase处理去除细胞壁后，独特的结合液/蛋白酶K迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶，然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜， 再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤， 抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物，蛋白等杂质去除， 最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。

下游应用

本试剂盒采用高效、专一结合DNA 的离心吸附柱和独特的缓冲液系统，提取酵母菌基因组DNA，样品裂解后，DNA 在高盐条件下与硅胶膜特异结合，在低盐、高pH 值时DNA 从硅胶膜上洗脱下来。纯化过的基因组DNA 可直接用作PCR 模板、酶切、杂交等分子生物学实验。

产品特点

1.操作简单、快速：1 h 内即可获得高质量的酵母基因组DNA。

2.无毒害：无需使用酚、氯仿等有害试剂，操作安全。

3.纯度高：可直接用于PCR、酶切、杂交等分子生物学实验。

使用方法

本试剂盒采用蜗牛酶（Snailase）去除酵母顽固的外壳，再通过裂解液（Buffer Digestion）使 DNA 释放，然后使用高盐溶液除去蛋白质、脂质以及多糖等杂质。用 75% 乙醇漂洗后，用 TE Buffer 充分溶解，即可快速得到基因组 DNA。 从 2 ml 酵母菌液可以获得 5-10μg DNA，OD260/OD280 比值一般在 1.7~1.9 之间。抽提出的 DNA 可用于酶切、PCR、文库构建、Southern Blot 等相关实验。

注意事项

 1.对大肠杆菌可从固体培养基上挑取单个菌落直接进行煮沸法提取质粒DNA。     

2. 煮沸法中添加溶菌酶有一定限度，浓度高时，细菌裂解效果反而不好。有时不同溶菌酶也能溶菌。      

3. 提取的质粒DNA 中会含有RNA，但RNA 并不干扰进一步实验,如限制性内切酶消化，亚克隆及连接反应等。

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