凝胶阻滞迁移电泳检测服务(EMSA)

凝胶阻滞迁移电泳检测服务(EMSA)性质、用途与生产工艺

背景

凝胶阻滞迁移电泳检测服务（EMSA）是一种研究DNA/RNA结合蛋白和其相关的DNA/RNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。依据实验需要，设计标记探针、非标记探针、蛋白特异性抗体等参照物，基于DNA-蛋白质或RNA-蛋白质复合体在聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）中有不同迁移率的原理，当转录因子与特异的DNA或RNA结合后，其在PAGE中的迁移率将小于未结合核蛋白转录因子的DNA，从而检测到活化的与DNA或RNA结合的蛋白转录或调节因子。

原理

该实验利用核酸与蛋白结合后，在非变性聚丙烯酰氨凝胶中电泳的迁移速率会明显降低的原理，通过设计特异性和非特异性的探针，通过孵育与目标蛋白结合，形成探针-蛋白复合体，由于分子量变大，在聚丙烯酰氨凝胶中的电泳迁移速率下降，相比于未结合的探针会出现滞后效应，再通过探针上特殊的标记物性质，通过转膜、显色或曝光，探针-蛋白复合体所在的位置便能形成条带，从而证明核酸与蛋白的相互作用。

应用

这一技术最初用于研究DNA结合蛋白，目前也广泛用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。

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