病毒包装
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- CAS号:
- 英文名:
- Virus packaging
- 英文别名:
- 中文名:
- 病毒包装
- 中文别名:
- 病毒包装
- CBNumber:
- CB65522754
- 分子式:
- 分子量:
- 0
- MOL File:
- Mol file
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病毒包装性质、用途与生产工艺
病毒包装是一种基因诊断、基因治疗技术。因为目的基因不能直接整合到大多数真核细胞,常用的手段是将目的基因包装成病毒来感染细胞,从而使表达满足实验需求。
病毒包装所用的病毒有很多种,常见的有慢病毒和腺病毒。
慢病毒(Lentivirus)是逆转录病毒的一种。构建的siRNA / miRNA慢病毒载体,与化学合成的siRNA 和基于瞬时表达载体构建的普通 siRNA 载体相比,一方面可以扩增替代瞬时表达载体使用,另一方面,Lentivirus-siRNA 克隆经过慢病毒包装系统包装后,可用于感染依靠传统转染试剂难于转染的细胞系如原代细胞、悬浮细胞和处于非分裂状态的细胞,并且在感染后可以整合到受感染细胞的基因组,进行长时间的稳定表达。
腺病毒(Adenovirus,Ad)是一种无包膜的线状双链DNA病毒,其复制不依赖于宿主细胞的分裂。有近50个血清型,大多数Ad载体都是基于血清型2和5,通过转基因的方式取代E1和E3基因,降低病毒的复制能力。这些重组病毒仅在高水平表达E1和E3基因的细胞中复制,因此是一种适用于治疗的高效控制系统。
病毒包装的关键节点:
细胞因素、载体系统(尽量使用成熟的商业化载体系统)、构建重组的质粒正确与否、质粒抽提纯化情况、包装转染控制(24、48 小时的细胞及荧光状态判断)、目的基因对病毒包装影响 (基因大小、序列情况、蛋白功能毒性等都会影响到是否能包装成功)。
病毒包装利用病毒载体对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力,病毒基因组整合于宿主基因组,可长时间、稳定表达外源基因。
病毒包装
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