Ki-67抗体

Ki-67抗体性质、用途与生产工艺

背景

Ki-67 存在于所有增殖细胞中，其作为增殖标志物的作用引起了广泛关注。Ki-67 是一种核非组蛋白，存在于细胞周期的所有活跃期（G0 期除外）。此外，Ki-67 是 Oncotype DXTM 检测中包含的 21 个前瞻性选定基因之一，用于预测淋巴结阴性、ER+ 乳腺癌女性的复发风险和化疗益处程度。增殖生物标志物 Ki-67 也被认为是乳腺癌的预后因素，并已在多项研究中进行了研究。Ki-67 蛋白存在于脊椎动物中。在人类中，Ki-67 由基因 MKI67 编码。尽管 Ki-67 包含几个保守的功能区域，但这些区域之外的一级序列保守性较低。 Ki-67 蛋白的主要区域包括 N 端叉头相关 (FHA) 结构域、蛋白磷酸酶 1 (PP1) 结合结构域、由串联重复组成的大型中心区域和 C 端 LR（富含亮氨酸/精氨酸）染色质结合结构域[1]。

检测原理

免疫原：编码人类 ki-67 的长度为 1002bp 的 cDNA 片段重组多肽。

特异性：对多发性骨髓瘤细胞系 IM-9 的蛋白免疫印迹检测显示，MIB-1 抗体标记的条带为 345 和 395kDa 的两个条带，与原始 Ki-67 抗体标记的目的条带一致。而且，免疫印迹和竞争结 合实验清晰地显示，MIB-1 与 Ki-67 抗体一样，能够与 Ki-67 基因中 66bp 重复元件编码的 表位反应。免疫组织化学方法中，在扁桃体冷冻组织切片上，MIB-1 和 Ki-67 抗体能够提供 相同的染色模式。MIB-1 抗体能够识别原始 Ki-67 抗原及 Ki-67 分子的重组片段。

免疫组化（IHC）反应原理： 应用抗原与抗体特异结合的原理，用已知抗体与待测抗原结合，通过抗体再结合酶（HRP 或 AP)标记的放大系统（显色系统）形成复合物，加上酶的底物（显色剂）使之显色，找到 待测抗原，通过显微镜观察结果。

参考资料

[1] Xiaoming Sun, Paul D Kaufman. “Ki-67: more than a proliferation marker.” Chromosoma 127 2 (2018): 175–186.

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