人胰腺癌细胞
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- CAS号:
- 英文名:
- CFPAC-1 Cell
- 英文别名:
- HPAC;JF305;HPAF2;SUIT-2;Hs 766T;PANC-28;PANC-89;COLO-587;MPanc-96;Panc10.05
- 中文名:
- 人胰腺癌细胞
- 中文别名:
- 人胰腺癌细胞;人胰腺腺泡上皮癌细胞;人胰腺癌细胞HPAC;PATU8988T细胞;PANC05.04细胞;人胰腺癌细胞JF305;人胰腺癌细胞HPAF2;人胰腺癌细胞SUIT2;SUIT-2人胰腺癌细胞;HS766T人胰腺癌细胞
- CBNumber:
- CB72540965
- 分子式:
- 分子量:
- 0
- MOL File:
- Mol file
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人胰腺癌细胞性质、用途与生产工艺
1）收到细胞后，活细胞首先观察培养瓶是否完好，培养液是否漏液，培养基是否浑浊；冻存细胞是否干冰已挥发完，冻存管盖是否脱落，破碎，若有这类情况，请务必拍照记录，并于收货24h内与我们联系。
2）细胞处理：复苏的细胞：如果是T-25培养瓶活细胞，收到后请用75%的酒精对培养瓶表面进行消毒处理，然后转入培养箱中静置2~3h后再进行后续处理。
1、细胞复苏
1）配制完全培养基：基础培养基+胎牛血清+双抗（特殊培养基特殊配置）；
2）细胞复苏：取5ml完全培养基于15ml离心管中，37℃水浴锅预热，从液氮管（或者-80度冰箱）中快速取出冻存的细胞，放入37℃水浴锅中，摇晃使快速化冻（1min左右），然后将化冻的细胞和预热的培养基，移入超净工作台中，化冻的细胞加入到含预热培养基的15ml离心管中，1000rpm离心5min；
3）吸弃上清，得到细胞沉淀，用2ml完全培养基轻轻重悬细胞，加入到T25培养瓶中，做好标记，放入37℃，5%CO2饱和适度培养箱中培养（培养皿复苏效果更好）；
4）24h后，观察细胞贴壁情况（未贴壁的即为死细胞--针对贴壁细胞），吸弃旧培养基，加入新鲜的预热（室温或37℃）的完全培养基，继续培养。
2、细胞传代
1）待细胞生长到80%-90%汇合度时，吸弃旧的培养基，加入1ml无菌PBS润洗一次，以去除残余的培养基及血清（血清含有胰酶的抑制因子），然后加入1ml 0.25%胰酶，37℃培养箱中消化（1~2min左右，不同细胞消化时间不同），取出细胞，镜下观察细胞至细胞皱缩变圆；
2）加入1ml完全培养基（含FBS）终止消化，轻轻拍打，使细胞脱落下来成单个细胞悬液，收集细胞于15ml无菌离心管中，1000rpm，离心5min；
3）收集细胞沉淀，完全培养基重悬，一分为二（可根据细胞生长速度调整比例），分别加入到2个新的培养瓶中，做好标记，放入培养箱中培养。
3、细胞冻存
1）按照细胞传代方法，在超净工作台内消化收集细胞沉淀，取少量细胞用于计数；
2）用预冷的1ml冻存液（90%完全培养基+10%DMSO）或者无血清细胞冻存液重悬细胞，加入到1.2ml冻存管中，密度为1*106个/ml。
3）放入程序冻存盒，-80℃过夜后，转入液氮长期保存。
人胰腺癌细胞
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