全血MICRORNA提取试剂盒

全血MICRORNA提取试剂盒性质、用途与生产工艺

背景

RNA酶，强烈有机抽提去除蛋白和DNA，RNA包括微小分子RNA吸附于离心柱内特殊硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤,漂洗液将细胞代谢物，蛋白等杂质进一步去除，最后低盐的洗脱液将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。

产品特点

离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端 也不需要乙醇沉淀等容易丧失微小分子RNA的步骤。 独有的裂解液配方，可直接裂解全血，不需要先裂解去除红细胞。

提取方法

• 近年来对RNA干扰和调节性小RNA的广泛研究迫切需要一种能有效提取15-30核苷酸左右大小RNA（包括siRNA和miRNA）的试剂盒。但是传统的RNA提取方法如硅胶膜法不能有效吸附回收，酚/胍抽提和乙醇沉淀并不能有效沉淀回收微小分子RNA，对于血液样本更是难以提取。
• 全血MICRORNA提取试剂盒采用独特的裂解液能迅速直接裂解全血（液体样本）和灭活细胞RNA酶，强烈去除蛋白和DNA，而RNA包括微小分子RNA吸附于离心柱内特殊硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗、离心步骤，将细胞代谢物、蛋白等杂质去除，最后低盐的洗脱液将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。

用途

适用于快速提取各种全血/血浆/液体样本miRNA和其它各种小RNA。

应用

该miRNA提取试剂盒广泛适用于冻存和新鲜的抗凝全血样本（不适用于血清和血浆），每150μl全血可获得~1μg的microRNA。

储存条件

室温可保存2年。

使用方法

1．向1.5ml EP管中加入300μl miRNA Reagent A。将150μl 抗凝全血加入到上述300μl miRNA Reagent A中，立即手腕用力震荡混合均匀。室温静置 5分钟 以充分裂解细胞。 2．向上述裂解完毕的裂解液中加入250μl miRNA Reagent B，上下颠倒混合均匀。13000rpm离心5分钟，吸取550μl上清液，转移到新的1.5ml EP管中。 3．向上述溶液中加入200μl无水乙醇，手腕用力震荡数次，室温放置 5分钟。 4．13000rpm离心10分钟，转移700μl上清液到新的1.5mlEP管中。 5．向上述溶液中加入300μl 异丙醇，手腕用力上下颠倒数次。 6．分两次将上述溶液倒入到 miRNA 吸附柱中，13000rpm离心1分钟，倒掉过滤液。 7．向吸附柱中加入700μl 75%异丙醇洗涤一次，13000rpm离心1分钟，倒掉过滤液。 8．向吸附柱中加入500μl无水乙醇洗涤一次，13000rpm离心1分钟，倒掉过滤液。 9．吸附柱 13000rpm 空离心2分钟，去掉残留的乙醇。 10．将吸附柱放入到新 1.5ml EP管中，室温放置 2分钟，使残留乙醇挥发。在吸附柱滤芯上加入30μl RnaseFree TE Buffer，室温静置 2分钟，13000rpm离心2分钟，洗脱产物即为提取的miRNA。

全血MICRORNA提取试剂盒 上下游产品信息

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