昆虫基因组DNA提取试剂盒

昆虫基因组DNA提取试剂盒性质、用途与生产工艺

背景

该试剂盒采用独特的裂解液能够有效除去多糖多酚等，能够从昆虫、软体动物、节肢动物、蛔虫等样品中提取DNA，保存在在醇类的样品也适用于本试剂盒的提取。一次操作可以处理小于50mg组织，样品经裂解液消化，氯仿分离除去大部分的多糖多酚，再经分离柱进一步纯化，便可得到高纯度的DNA。所得的DNA可以用于PCR，Southern杂交，酶切消化等实验。

适用范围

昆虫基因组DNA提取试剂盒专门为从昆虫等低等非脊索动物，包括某些植物组织中提取基因组DNA而设计。该方法结合了CTAB裂解法和硅胶柱纯化方式，能有效地去除各种色素，甲壳素，多糖等杂质。 纯化的DNA可直接用于PCR，Southern杂交，酶切等后续实验

保存条件

室温保存，12个月内有效。缓冲液IL与缓冲液 IB可能有沉淀产生，37℃水浴溶解后即可。RNase A和蛋白酶K常温运输,-20℃保存。

纯度检测

基因组DNA片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。提取的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。可配制0.8-1.0％琼脂糖凝胶，使用λ/HindIII判断基因组的大小，完整的基因组大小应在23kb以上。使用分光光度计检测时， OD260/OD280比值应为1.7–1.9之间，如果洗脱时不使用洗脱缓冲液，而使用去离子水洗脱，比值可能偏低，但并不表明DNA纯度不高。

使用方法

昆虫组织(细胞)磨碎成粉末后，用CTAB裂解液裂解,氯仿抽提去除多聚糖等物质后，异丙醇沉淀初步纯化DNA，重新溶解DNA加入乙醇调节DNA与柱子的结合条件，过柱进一步纯化DNA，通过两步快速地洗涤柱子以去除杂质，最后用灭菌水或低盐缓冲液溶解并洗脱出DNA。

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