大鼠组织因子(TF)Elisa试剂盒

大鼠组织因子(TF)Elisa试剂盒性质、用途与生产工艺

应用

大鼠组织因子(TF)ELISA试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中大鼠组织因子(TF)的含量。

检测原理

该试剂盒基于ELISA检测方法。该试剂盒中提供的微量滴定板已用组织因子(TF)预涂。在反应过程中，样品或标准品中的组织因子(TF)与组织因子(TF)特异性生物素化检测抗体上固定相载体上固定量的组织因子(TF)竞争。从板中洗涤过量的缀合物和未结合的样品或标准品，并将HRP-链霉亲和素（SABC）加入每个微孔板并孵育。然后将TMB底物溶液加入每个孔中。通过加入硫酸溶液终止酶-底物反应，并在450nm的波长下用分光光度法测定颜色变化。然后通过将样品的O D与标准曲线进行比较来确定样品中组织因子(TF)的浓度。

操作步骤

1.标准品的加样：设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL

2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.加酶：每孔加入酶标试剂100μl，空白孔除外。

4.温育：用封板膜封板后置37℃温育60分钟。

5.配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。

6.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

7.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

8.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

9.测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

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