Gentamicin assay medium I

Gentamicin assay medium I性质、用途与生产工艺

概述

庆大霉素检定培养基Ⅰ可用于嗜水气单胞菌的分离鉴定培养。庆大霉素为氨基糖苷类广谱抗生素，对各种革兰阴性细菌及革兰阳性细菌都有良好抗菌作用，对各种肠杆菌科细菌如大肠埃希菌、克雷伯菌属、变形杆菌属、沙门菌属、志贺菌属、肠杆菌属、沙雷菌属及铜绿假单胞菌等有良好抗菌作用。

奈瑟菌属和流感嗜血杆菌对该品中度敏感。对布鲁菌属、鼠疫杆菌、不动杆菌属、胎儿弯曲菌也有一定作用。

应用

庆大霉素检定培养基Ⅰ用于鱼源嗜水气单胞菌aopB~-aopD~-aroA~-缺失株构建及其生物学特性研究。
aopB-/aopD-缺失株的构建参照GenBank中嗜水气单胞菌aopB/aopD序列,从Ah2056基因组中扩增aopB/aopD上下游片断,连接到自杀性质粒pRE112上,构建了缺失369bp的aopB/aopD基因并含有蔗糖敏感基因（sacB）的重组自杀性质粒pREaopB/aopD。
重组自杀性质粒pREaopB/aopD转化大肠杆菌X7213,以大肠杆菌X7213阳性克隆为供体菌,与受体菌Ah2056进行接合转移,经涂布氯霉素（Cm）抗性平板并转印到含10%蔗糖的平皿,筛选出Cm抗性（CmR）蔗糖敏感（SucS）的接合子,并用PCR鉴定重组自杀性质粒已经整合到染色体中。
阳性接合子在不含NaCl的培养基中培养促使第二次同源重组。再涂布含10%蔗糖的平皿,并转印到Cm平板上,筛选出Cm敏感（CmS）蔗糖抗性（SucR）的克隆,并用PCR鉴定第二次交换,从而构建aopB-/aopD-缺失株。

贮存

用途

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