SW48细胞

SW48细胞性质、用途与生产工艺

简介

细胞特性

SW480源自原位直肠腺癌，CSAp和直肠抗体阴性。p53基因第273位密码子的G→A突变引起Arg→His替代，309位密码子的C→T突变导致Pro→Ser替代。细胞p53蛋白表达水平提高。癌基因c-myc,K-ras,H-ras,N-ras,myb,sis和fos的表达呈阳性。癌基因N-myc的表达未做检测。不表达细胞溶解酶，一种与肿瘤入侵相关的金属蛋白酶。有报道称该细胞表达GM-CSF。ras原癌基因的12位密码子有一个突变，可以用作PCR法检测该突变的阳性对照。

细胞处理

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

1.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若SW48细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

2.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

3.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

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