植物DNA试剂盒

植物DNA试剂盒性质、用途与生产工艺

应用

植物DNA试剂盒适适用于从植物组织和植物干粉中提取总DNA，包括基因组DNA，线粒体DNA以及叶绿体DNA。

实验原理

本品可以处理多至100 mg的样本，可纯化获得最大为50 kb的DNA，多数片段在20-30 kb之间。本试剂盒采用先进的硅胶膜技术和简单的离心程序，无需乙醇沉淀，简单快速地分离得到高纯度的DNA，有效去除PCR和其他酶促反应的抑制剂。本品可以在1小时内完成总DNA的提取，纯化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文库构建、Southern Blot、分子标记等下游实验。

操作步骤

1、取植物新鲜组织约100 mg或干重组织约20 mg，加入液氮充分研磨。

2、将研磨后的粉末收集到离心管(自备)中，加入700μl 65℃预热的Buffer GP1(使用前在预热的Buffer GP1中加入β-巯基乙醇，使其终浓度为0.1%)，迅速颠倒混匀后，将离心管置于65℃水浴20分钟，水浴过程中颠倒离心管混匀样品数次。

3、加入700μl氯仿，充分混匀，12000rpm(～～13400×g)离心5分钟。

4、小心将上层水相转入一新的离心管(自备)中，加入700μl Buffer GP2，充分混匀。

5、将步骤4中所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱DM中。若一次不能加完溶液，可分多次转入。12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。

6、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。

7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。

注意：如需进一步提高DNA纯度，可重复步骤7.

8、12000rpm离心2分钟，倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。

9、将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中，向吸附柱的中间部位悬空加入50-100μlBuffer GE或灭菌水，室温放置2-5分钟，12000rpm离心1分钟，收集DNA溶液，-20℃保存DNA。

植物DNA试剂盒 上下游产品信息

上游原料

下游产品

植物DNA试剂盒 生产厂家

 

植物DNA试剂盒 相关搜索:

• 植物DNA试剂盒