背景[1-3]
MEM(含NEAA,不含L-谷氨酰胺)也称最低必需培养基、最小基本培养基或低限量Eagle培养基，由Harry Eagle在Eagle基本培养基（BEM）的基础上发展而来的，是一种最基本、适用范围最广的培养基，是动物细胞培养中最常用的培养基之一。MEM培养基仅含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素，成分简单，主要用于贴壁细胞的培养，配方修改后也可用于其他类型细胞培养。
MEM含NEAA（非必须氨基酸）的培养基，是在MEM培养基的基础上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天（门）冬酰胺、L-天（门）冬氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸和甘氨酸7种NEAA，能降低细胞培养时细胞自身生产非必须氨基酸的副作用，有效促进细胞增殖代谢。
L-谷氨酰胺（Glutamine）是细胞培养中所必需的一种营养元素，但其在溶液中不稳定，会自发降解，不含L-谷氨酰胺的培养基，可以根据研究需要任意调整L-谷氨酰胺的用量，在使用时添加新鲜的L-谷氨酰胺或其替代物更利于细胞的生长。
注意事项：
1、培养基长期放置，需要2-8℃避光保存，请勿低温冻存。
2、培养基中添加的L-谷氨酰胺在溶液中不稳定、易分解，长期放置后使用若发现细胞生长变慢可在使用前加入适量的L-谷氨酰胺，来维持细胞的正常代谢。
3、含有NaHCO3的培养基开瓶次数较多后，培养基内的CO2会逐渐溢出，PH值上升，培养基的颜色会偏紫色。培养基偏碱性会造成细胞生长停滞或死亡，建议分装成小瓶使用或用HEPES调至正常PH范围。
应用[4][5]
用于不同培养基与饲养细胞组合对体外培养泡球蚴原头节的影响研究
房棘球绦虫原头节的体外成囊培养是提取与研究其生发层干细胞的实验基础,D-MEM(高/低糖型)与RPMI-1640是最常用于多房棘球绦虫体外培养的商业培养基,HeLa细胞与大鼠肝癌细胞(ATCC no.CRL-1600)也被证实是适宜的饲养细胞,以上培养基与饲养细胞两两组合对多房棘球绦虫体外生长的影响尚未见直接的对比研究。
构建多房棘球绦虫体外培养模型,观察泡球蚴在不同饲养细胞(HeLa细胞与大鼠肝癌细胞(ATCC no.CRL-1600))及含有10%胎牛血清的不同培养基(D-MEM(高/低糖型)与RPMI-1640)下生长情况,为体外培养泡球蚴获取泡球蚴囊泡提供新的思路。
方法预先培养HeLa细胞及大鼠肝癌细胞(ATCC no.CRL-1600),从饲养6个月以上种鼠体内提取泡球蚴原头节后分别与不同饲养细胞及培养基体外共同培养。
实验根据饲养细胞与培养基成分的不同,组合成6组:I组:HeLa细胞与RPMI-1640培养基;II组:HeLa细胞与D-MEM(高糖型)培养基;III组:肝癌细胞与RPMI-1640培养基;IV组:肝癌细胞与D-MEM(高糖型)培养基;V组:HeLa细胞与D-MEM(低糖型)培养基;VI组:肝癌细胞与D-MEM(低糖型)培养基,观察泡球蚴原头节的生存、生长和发育,每7天计算原头蚴成囊率,并使用显微镜目镜测微尺测量囊泡平均直径大小。
培养结束后注射器分别抽取小鼠体内囊泡及培养56D囊泡囊液,并用BCA蛋白定量试剂盒测定各组囊液蛋白含量。
参考文献
[1]Chemoprophylactic and therapeutic efficacy of thymol in murine cystic echinococcosis[J].M.Maggiore,P.E.Pensel,G.Denegri,M.C.Elissondo.Parasitology International.2015(5)
[2]Targeting Echinococcus multilocularis Stem Cells by Inhibition of the Polo-Like Kinase EmPlk1[J].Andreas Schubert,Uriel Koziol,Katia Cailliau,Mathieu Vanderstraete,Colette Dissous,Klaus Brehm.PLOS Neglected Tropical Diseases.2014(6)
[3]Diagnosis,treatment,and management of echinococcosis[J].Donald P McManus,Darren J Gray,Wenbao Zhang,Yurong Yang.BMJ.2012(jun1)
[4]The role of evolutionarily conserved signalling systems in Echinococcus multilocularis development and host–parasite interaction[J].Klaus Brehm.Medical Microbiology and Immunology.2010(3)
[5]韩振阳.不同培养基与饲养细胞组合对体外培养泡球蚴原头节的影响[D].石河子大学,2019.