大豆磷脂
大豆磷脂 性质
储存条件 | 2-8°C |
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大豆磷脂是大豆中所含的卵磷脂、脑磷脂、肌磷脂的总称。人体所有的细胞中均含有卵磷脂,它是细胞膜的主要组成部分,对维护细胞的正常结构与功能、促进细胞生长发育有重要作用。
磷脂酰胆碱是大豆磷脂中治疗高脂血症的主要有效成分。机理可能是磷脂酰胆碱被肠道吸收入血后主要掺入到HDL-C中去,为胆固醇转变为胆固醇酯提供底物和激活卵磷脂胆固醇酰基转移酶、促进载脂蛋白AI稳定有关。大豆磷脂治疗高脂血症的有效剂量为成人每天至少10g,2个月才有显著效果。大豆磷脂对急性脑梗死有显著的治疗作用,机理可能是减少了脑梗死时脑中磷脂含量的下降。丸剂剂型、铝箔纸包装、4℃、含水2%以下时,大豆磷脂的酸值、碘值变化最小,性质稳定。
琥珀酸细胞色素C还原酶(SCR)是复合物II(SQR)和复合物III(QCR)的紧密复合体,SQR主要是亲水部分,而QCR主要是疏水部分。SCR中磷脂的主要成分为PC、PE和CL。李路等研究了磷脂在SCR中的作用。磷脂对SCR重组活力的影响主要是体现在对QCR的影响上,任一单纯磷脂重组活力都不如大豆磷脂,但适当比例的单一磷脂混合物重组活性远高于大豆磷脂。活力恢复的最佳磷脂比例中PE和CL含量约60%,其中CL约40%。大豆磷脂重组活性达不到最大值的原因与它的CL含量比例太小有关。
磷脂的分离多采用薄层层析法和高效液相层析法,李星全等以薄层层析为先导,用硅胶柱层析法分离了磷脂酰胆碱(PC)和磷脂酰乙醇胺(PE)。方法如下:总磷脂的提取。取约1g的脑组织(猪脑、鼠脑),用生理盐水冲洗,按氯仿:甲醇=1:2(体积比)的比例加混合溶剂3ml,在冰浴中匀浆,然后按氯仿:甲醇=2:1(体积比)的比例加混合溶剂8ml,搅拌,离心10min后,用长滴管小心分出第I份上清液。在剩余沉淀中按氯仿:甲醇=4:1(体积比)的比例加混合溶剂5ml,用上法处理,分出第II份上清液。合并两次(I+II)上清液,加入1滴15mol/L NH3·H2O,并用氮气吹干,得到乳白色液体。总磷脂的薄层分离。层析条件为:薄层板-硅胶G板;展开剂-氯仿:甲醇:氨水=13.5:6.5:1.0(体积比);显色剂碘蒸气。TLC结果表明:总磷脂中含PC、PE成分,且两者得到较好的分离。总磷脂的柱层析。条件:吸附剂,层析用硅胶200-300目,干法装柱;洗脱剂,氯仿:甲醇:氨水=13.5:6.5:1.0(体积比);样品,将提取的总磷脂加氯仿溶解为1.5ml。方法:将样品一次上柱,用上述洗脱剂洗脱,分部收集,每份为1ml,共收集16份。经TLC检查,合并相同部位,其中第4、5份为PE部位,第9、10份为PC部位。
提取液的制备 取粗磷脂,加1.5倍量工业用丙酮,充分搅拌,静置,倾出上层液回收丙酮,沉淀加丙酮,充分搅拌,静置,反复处理沉淀4-5次,至洗液用滤纸检查无油迹,合并沉淀物。真空抽滤至干,得颗粒状磷脂。加95%药用乙醇,加热回流提取1h,冷却,抽出提取液,沉淀用乙醇再提取2次,合并提取液,放入-5℃冷库中过夜,次日取出。
粗磷脂[丙酮]→颗粒状磷脂[乙醇]→提取液
滤液的制备 将取出的提取液加热,加入氧化铝,加热回流1h,冷却,放出氧化铝和提取液,将提取液加针剂用活性炭,加热回流搅拌1h,除热原,过滤,得滤液。
提取液[Al2O3]→上层液[活性炭]→滤液
注射用豆磷脂的制备 将滤液真空浓缩,得浓缩液,加活性炭,加热回流搅拌1h,过滤,滤液在恒温水浴上,真空减压蒸馏至干,加丙酮洗涤5-6次,即得注射用豆磷脂。
滤液[浓缩]→浓缩液[活性炭]→[丙酮]注射用豆磷脂
方法二、以粉状大豆卵磷脂为原料,制备注射用大豆磷脂
取粉状大豆卵磷脂,溶解于水,加硫酸钠盐析,析出磷脂,减压干燥后,用95%乙醇回流抽提液,得卵磷脂乙醇溶液。加活性铝搅拌吸附杂质,过滤,得除去吸附杂质后的母液。加活性炭搅拌、脱色、过滤,减压蒸馏至干,得粘稠糊状物。加无水丙酮脱水、脱油,得黏稠状注射用精制大豆磷脂。
粉状大豆磷脂[水]→[Na2SO4]磷脂[95%乙醇]→大豆磷脂乙醇厚溶液[Al2O3]→母液[活性炭]→[丙酮]注射用豆磷脂
方法三、以豆油为原料
粗磷脂的制备 大豆油加2%-3%水,在50-70℃混合,或在大豆油中通入水蒸气,得磷脂水合物,用泵送入离心分离器中分离,收集泥浆状物,即得粗磷脂。
大豆油[2%-3%水]→[50-70℃]磷脂水合物[分离]→粗磷脂
干燥 粗磷脂脱水干燥至含水量小于1%,最终可降至0.5%。干燥后,迅速冷却至50℃以下,制得大豆磷脂成品,立即包装,防止吸湿。干燥形式有两种,即间歇干燥和连续干燥,间歇干燥是指65-70℃进行真空干燥;连续干燥是指用膜蒸发器在115℃左右快速真空干燥。
粗磷脂[干燥]→大豆磷脂成品
方法四、以大豆种子为原料
准备种子,脱胶 取成熟的大豆种子制成大豆油。用较多碎裂或长期贮放的大豆制备卵磷脂得率较低,用未成熟的大豆则产品中含叶绿素较多,卵磷脂呈暗色,不易漂白。取压榨所得粗品油沥清,其中含磷脂约2%-3%,加水1%-2.5%使成磷脂水合物,用管道混合器搅拌均匀,避免带人空气,加热至70-80℃;,保持30-60min,湿的胶状体磷脂水合物不溶于油,用离心法分离,所得胶状体移至储料槽,加入液态化剂,如有必要可加入漂白剂。
大豆种子→大豆油[1%-2.5%水]→[70-80℃]磷脂水合物[分离]→粗大豆磷脂
漂白 用过氧化氢除去黄色色素,或用过氧化苯甲酰除去红色物质,得漂白卵磷脂。亦可用0.315%过氧化氢溶液在脱胶操作中代替所加的水,亦可加过氧化物至储料槽中进行漂白。
粗大豆磷脂[漂白剂]→漂白大豆磷脂
干燥 经漂白的卵磷脂含水分25%-50%,用80-105℃及3.3-4kPa薄膜减压干燥,干燥后立即冷却至55-60℃,制得大豆磷脂成品。
漂白大豆磷脂[干燥]→大豆磷脂成品
方法五、以大豆为原料
经处理的大豆用乙醇、汽油及苯,或其他挥发性碳化氢作溶媒,逆流连续抽提后,将溶媒自抽提液中蒸出,引入蒸汽或水至抽提物中使卵磷脂沉淀而出,析出的黄色乳化液经离心分离,减压,在60℃蒸去水分,同时除去臭味,其中约含2/3的卵磷脂。用丙酮除去甘油酯类、脂肪酸、少量组分及苦味物质,得更高纯品。
大豆[乙醇]→抽提液[水或蒸汽]→粗大豆磷脂[减压浓缩]→大豆磷脂成品
方法六、以新鲜大豆油脚为原料
大豆油脚处理 将新鲜大豆油脚用旋转蒸发器脱水,加丙酮脱油3-5次,得粉末状粗大豆磷脂。回收丙酮和大豆油,回收的丙酮可循环使用,回收的大豆油可进行精炼或作它用。
大豆油脚[脱水,脱油]→粉状粗大豆磷脂
大豆磷脂的精制 取粗大豆磷脂,加3份85%乙醇溶液(pH10.5),于20-30℃下搅拌20 min。静置后分出上层含大豆磷脂的乙醇溶液。如此重复提取 3次,合并提取液,减压蒸馏回收乙醇,得半固体状大豆磷脂。加少量丙酮洗涤数次,真空干燥,得微黄色蜡状精制大豆磷脂。
粗大豆磷脂[85%乙醇]→[pH10.5, 20-30℃]大豆磷脂乙醇溶液[浓缩,洗涤]→大豆磷脂精品
方法七、以粉状大豆卵磷脂为原料,制备大豆磷脂片剂
原料中卵磷脂含量高达97%以上,其中磷脂酰胆碱≥23%、脑磷脂≥20%、肌醇磷脂≥14%、维生素E≥5×104 g/g,制成片剂后卵磷脂含量高达75%以上。
化学性质
磷脂是自然界中存在的一种主要复脂,它广泛存在于人及动物体的大脑、神经系统、心、肝等器官和各种微生物、禽蛋类以及大部分植物种子中,几乎所有的生物细胞内都含有磷脂。工业级大豆磷脂按色泽分有本色的、漂白的及两次漂白的三类,分别呈棕色至淡黄色。纯化的卵磷脂近于白色,放置后即逐渐变黄至棕色,无臭味。mp160℃。在植物油和乙醚中易溶,在乙醇中能溶,在丙酮中难溶。吸湿性极强。与镉盐等能生成不溶性的复合物。在任何pH值下,均以两性离子状态存在,所以具有表面活性作用。磷脂酰胆碱是大豆磷脂中治疗高脂血症的主要有效成分。机理可能是磷脂酰胆碱被肠道吸收入血后主要掺入到HDL-C中去,为胆固醇转变为胆固醇酯提供底物和激活卵磷脂胆固醇酰基转移酶、促进载脂蛋白AI稳定有关。大豆磷脂治疗高脂血症的有效剂量为成人每天至少10g,2个月才有显著效果。大豆磷脂对急性脑梗死有显著的治疗作用,机理可能是减少了脑梗死时脑中磷脂含量的下降。丸剂剂型、铝箔纸包装、4℃、含水2%以下时,大豆磷脂的酸值、碘值变化最小,性质稳定。
琥珀酸细胞色素C还原酶(SCR)是复合物II(SQR)和复合物III(QCR)的紧密复合体,SQR主要是亲水部分,而QCR主要是疏水部分。SCR中磷脂的主要成分为PC、PE和CL。李路等研究了磷脂在SCR中的作用。磷脂对SCR重组活力的影响主要是体现在对QCR的影响上,任一单纯磷脂重组活力都不如大豆磷脂,但适当比例的单一磷脂混合物重组活性远高于大豆磷脂。活力恢复的最佳磷脂比例中PE和CL含量约60%,其中CL约40%。大豆磷脂重组活性达不到最大值的原因与它的CL含量比例太小有关。
磷脂的分离多采用薄层层析法和高效液相层析法,李星全等以薄层层析为先导,用硅胶柱层析法分离了磷脂酰胆碱(PC)和磷脂酰乙醇胺(PE)。方法如下:总磷脂的提取。取约1g的脑组织(猪脑、鼠脑),用生理盐水冲洗,按氯仿:甲醇=1:2(体积比)的比例加混合溶剂3ml,在冰浴中匀浆,然后按氯仿:甲醇=2:1(体积比)的比例加混合溶剂8ml,搅拌,离心10min后,用长滴管小心分出第I份上清液。在剩余沉淀中按氯仿:甲醇=4:1(体积比)的比例加混合溶剂5ml,用上法处理,分出第II份上清液。合并两次(I+II)上清液,加入1滴15mol/L NH3·H2O,并用氮气吹干,得到乳白色液体。总磷脂的薄层分离。层析条件为:薄层板-硅胶G板;展开剂-氯仿:甲醇:氨水=13.5:6.5:1.0(体积比);显色剂碘蒸气。TLC结果表明:总磷脂中含PC、PE成分,且两者得到较好的分离。总磷脂的柱层析。条件:吸附剂,层析用硅胶200-300目,干法装柱;洗脱剂,氯仿:甲醇:氨水=13.5:6.5:1.0(体积比);样品,将提取的总磷脂加氯仿溶解为1.5ml。方法:将样品一次上柱,用上述洗脱剂洗脱,分部收集,每份为1ml,共收集16份。经TLC检查,合并相同部位,其中第4、5份为PE部位,第9、10份为PC部位。
用途
赋形剂,用于口服制剂的乳化。可用于治疗高脂血症、急性脑梗死、神经衰弱。使用静注用大豆磷脂,仅个别患者输注后有短暂的体温升高、畏寒、头痛、胸闷、恶心、关节痛等反应,不经处理可自行消退。高脂血症、肝肾功能损害者慎用。用途
用于化工、轻工行业生产方法
方法一、以粗磷脂为原料,制备注射用豆磷脂提取液的制备 取粗磷脂,加1.5倍量工业用丙酮,充分搅拌,静置,倾出上层液回收丙酮,沉淀加丙酮,充分搅拌,静置,反复处理沉淀4-5次,至洗液用滤纸检查无油迹,合并沉淀物。真空抽滤至干,得颗粒状磷脂。加95%药用乙醇,加热回流提取1h,冷却,抽出提取液,沉淀用乙醇再提取2次,合并提取液,放入-5℃冷库中过夜,次日取出。
粗磷脂[丙酮]→颗粒状磷脂[乙醇]→提取液
滤液的制备 将取出的提取液加热,加入氧化铝,加热回流1h,冷却,放出氧化铝和提取液,将提取液加针剂用活性炭,加热回流搅拌1h,除热原,过滤,得滤液。
提取液[Al2O3]→上层液[活性炭]→滤液
注射用豆磷脂的制备 将滤液真空浓缩,得浓缩液,加活性炭,加热回流搅拌1h,过滤,滤液在恒温水浴上,真空减压蒸馏至干,加丙酮洗涤5-6次,即得注射用豆磷脂。
滤液[浓缩]→浓缩液[活性炭]→[丙酮]注射用豆磷脂
方法二、以粉状大豆卵磷脂为原料,制备注射用大豆磷脂
取粉状大豆卵磷脂,溶解于水,加硫酸钠盐析,析出磷脂,减压干燥后,用95%乙醇回流抽提液,得卵磷脂乙醇溶液。加活性铝搅拌吸附杂质,过滤,得除去吸附杂质后的母液。加活性炭搅拌、脱色、过滤,减压蒸馏至干,得粘稠糊状物。加无水丙酮脱水、脱油,得黏稠状注射用精制大豆磷脂。
粉状大豆磷脂[水]→[Na2SO4]磷脂[95%乙醇]→大豆磷脂乙醇厚溶液[Al2O3]→母液[活性炭]→[丙酮]注射用豆磷脂
方法三、以豆油为原料
粗磷脂的制备 大豆油加2%-3%水,在50-70℃混合,或在大豆油中通入水蒸气,得磷脂水合物,用泵送入离心分离器中分离,收集泥浆状物,即得粗磷脂。
大豆油[2%-3%水]→[50-70℃]磷脂水合物[分离]→粗磷脂
干燥 粗磷脂脱水干燥至含水量小于1%,最终可降至0.5%。干燥后,迅速冷却至50℃以下,制得大豆磷脂成品,立即包装,防止吸湿。干燥形式有两种,即间歇干燥和连续干燥,间歇干燥是指65-70℃进行真空干燥;连续干燥是指用膜蒸发器在115℃左右快速真空干燥。
粗磷脂[干燥]→大豆磷脂成品
方法四、以大豆种子为原料
准备种子,脱胶 取成熟的大豆种子制成大豆油。用较多碎裂或长期贮放的大豆制备卵磷脂得率较低,用未成熟的大豆则产品中含叶绿素较多,卵磷脂呈暗色,不易漂白。取压榨所得粗品油沥清,其中含磷脂约2%-3%,加水1%-2.5%使成磷脂水合物,用管道混合器搅拌均匀,避免带人空气,加热至70-80℃;,保持30-60min,湿的胶状体磷脂水合物不溶于油,用离心法分离,所得胶状体移至储料槽,加入液态化剂,如有必要可加入漂白剂。
大豆种子→大豆油[1%-2.5%水]→[70-80℃]磷脂水合物[分离]→粗大豆磷脂
漂白 用过氧化氢除去黄色色素,或用过氧化苯甲酰除去红色物质,得漂白卵磷脂。亦可用0.315%过氧化氢溶液在脱胶操作中代替所加的水,亦可加过氧化物至储料槽中进行漂白。
粗大豆磷脂[漂白剂]→漂白大豆磷脂
干燥 经漂白的卵磷脂含水分25%-50%,用80-105℃及3.3-4kPa薄膜减压干燥,干燥后立即冷却至55-60℃,制得大豆磷脂成品。
漂白大豆磷脂[干燥]→大豆磷脂成品
方法五、以大豆为原料
经处理的大豆用乙醇、汽油及苯,或其他挥发性碳化氢作溶媒,逆流连续抽提后,将溶媒自抽提液中蒸出,引入蒸汽或水至抽提物中使卵磷脂沉淀而出,析出的黄色乳化液经离心分离,减压,在60℃蒸去水分,同时除去臭味,其中约含2/3的卵磷脂。用丙酮除去甘油酯类、脂肪酸、少量组分及苦味物质,得更高纯品。
大豆[乙醇]→抽提液[水或蒸汽]→粗大豆磷脂[减压浓缩]→大豆磷脂成品
方法六、以新鲜大豆油脚为原料
大豆油脚处理 将新鲜大豆油脚用旋转蒸发器脱水,加丙酮脱油3-5次,得粉末状粗大豆磷脂。回收丙酮和大豆油,回收的丙酮可循环使用,回收的大豆油可进行精炼或作它用。
大豆油脚[脱水,脱油]→粉状粗大豆磷脂
大豆磷脂的精制 取粗大豆磷脂,加3份85%乙醇溶液(pH10.5),于20-30℃下搅拌20 min。静置后分出上层含大豆磷脂的乙醇溶液。如此重复提取 3次,合并提取液,减压蒸馏回收乙醇,得半固体状大豆磷脂。加少量丙酮洗涤数次,真空干燥,得微黄色蜡状精制大豆磷脂。
粗大豆磷脂[85%乙醇]→[pH10.5, 20-30℃]大豆磷脂乙醇溶液[浓缩,洗涤]→大豆磷脂精品
方法七、以粉状大豆卵磷脂为原料,制备大豆磷脂片剂
原料中卵磷脂含量高达97%以上,其中磷脂酰胆碱≥23%、脑磷脂≥20%、肌醇磷脂≥14%、维生素E≥5×104 g/g,制成片剂后卵磷脂含量高达75%以上。