人皮肤黑色素瘤细胞
人皮肤黑色素瘤细胞 性质
1)准备MEM-EBSS培养基(Minimum Essential Medium(MEM Eagles with Earle’sBalanced Salts)(MEM-EBSS))(MEM,GIBCO,41500034,添加EBSS),90%;优质胎牛血清,10%。
2)人皮肤黑色素瘤细胞培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度,培养箱湿度为95%。
3)人皮肤黑色素瘤细胞冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
复苏人皮肤黑色素瘤细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。人皮肤黑色素瘤细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。