CMT93 Cells(赠送Str鉴定报告)|小鼠结肠癌细胞

"CMT93 Cells(赠送Str鉴定报告)|小鼠结肠癌细胞

细胞背景资料：结肠癌；C５７BL/ICRF

细胞形态：上皮细胞样

解冻细胞常见实验问题分析及推荐解决方法：在解冻冻存细胞时，发现会出现存活率低、大量细胞碎片及生长缓慢等问题，究竟是什么原因导致，我们该怎么进行解决？以下是国内外细胞培养专家针对解冻细胞实验问题，总结的一些解决方案！出现低存活率的可能原因及推荐解决方案如下：１)解冻过程中细胞裂解，推荐的解决方案：可预期到一定量的细胞死亡，因此细胞的浓度应足够GAO，考虑到这一损失。起始浓度为１*１０(６)至１*１０(７)细胞/毫升；２)解冻过程中的问题，推荐的解决方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷冻的培养物，保存时间为１-５天，但这不是保存的方法。在３７℃充分解冻后应立即开始培养；３)对冷冻液过敏，推荐的解决方案：A.完全或部分更换培养基，减少培养基中冷冻液的量。在２４小时后更换培养液体可全部去除冷冻液。B.留出更多时间供培养物恢复。有时细胞需要几周时间才能形成单层或密集的悬浮物，取决于冷冻时细胞的年龄或传代次数或在生长阶段中的位置。冷冻的Zui佳条件在对数期；４)被冷冻的原种细胞的年龄或冷冻时培养物的年龄，推荐的解决方案：解冻Zui近冷冻的细胞。细胞处于冷冻状态的时间越长，存活率越低。检查冷冻细胞的时间和方法。在冷冻时细胞应处于对数期。

细胞生长：贴壁

RBL-I细胞类似产品：：PFSK1细胞、B16细胞、Institute for Medical Research-32细胞

ST细胞类似产品：：HGF-1细胞、THPI细胞、RGM-1细胞

U373-MG细胞类似产品：：Human Melanoma Cell Bowes细胞、HCC1954细胞、Me-Wo细胞

SW 962细胞类似产品：：OCI-Ly07细胞、MMAc.SF细胞、SNU-119细胞

NCIH526细胞类似产品：：Panc8.13细胞、WERI Rb-1细胞、ATC241细胞

CMT93 Cells(赠送Str鉴定报告)|小鼠结肠癌细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，ZuiHAO经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

HEC-1B细胞类似产品：：HPB/ALL细胞、SW-982细胞、H226细胞

PANC403细胞类似产品：：MFM223细胞、Hs294T细胞、H-929细胞

MM6细胞类似产品：：Kit225细胞、Rabbit Kidney 13细胞、C3A细胞

Ly7细胞类似产品：：CBRH-7919细胞、H-748细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453细胞

Reh细胞类似产品：：CA922细胞、BT-474细胞、FHs74 Int细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

CMT93 Cells(赠送Str鉴定报告)|小鼠结肠癌细胞

细胞生长特性：贴壁

H4-II-EC3细胞类似产品：：SUM-190细胞、SKRC-20细胞、T241细胞

SUM-52细胞类似产品：：AG 9细胞、B16/F0细胞、HCC 2185细胞

SW1783细胞类似产品：：HCT-GEO细胞、HuH-1细胞、LNCaP-C4-2细胞

Bowes melanoma cells细胞类似产品：：HCC-1187细胞、Panc327细胞、QGY-7701细胞

KP-N-YN细胞类似产品：：SW-954细胞、Bovine ENDometrial cells细胞、COV504细胞

SHI1细胞类似产品：：RAG细胞、U266 Bl细胞、LIM1215细胞

细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间Zui长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请YOU先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做HAO照片记录并联系实验室。

贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较GAO的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不HAO，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很HAO并且不损失细胞！

Hs 600.T细胞类似产品：：B 95.8细胞、SuDHL 1细胞、H1963细胞

U251MG细胞类似产品：：3AO细胞、Cattle chondrocytes细胞、MCF10A细胞

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Pt K2细胞类似产品：：Mouse podocyte细胞、MHCC 97-H细胞、KM12细胞

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MD Anderson-Metastatic Breast-361细胞类似产品：：OCILY10细胞、RCC23细胞、CRFK细胞

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Large Cell Lung Cancer-103H细胞类似产品：：WPMY-1细胞、A2780CP细胞、NCI-SNU-423细胞

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HSCT6细胞类似产品：：LSECs细胞、BI-Mel细胞、SVGp12细胞

MDA-134细胞类似产品：：CV1细胞、OACP4C细胞、LLC细胞

NCI-H2108细胞类似产品：：COLO 684细胞、D6P2T细胞、University of Arizona Cell Culture-893细胞

CCD-841-CoN细胞类似产品：：DOK细胞、SK MEL 28细胞、LK 2细胞

NCIH1155细胞类似产品：：LS 1034细胞、Jurkat-E6细胞、He-La细胞

HHUA细胞类似产品：：U266BL细胞、L(TK-)细胞、KP-4细胞

VeroC1008细胞类似产品：：Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B细胞、HOS细胞、Panc05.04细胞

CCD 19Lu细胞类似产品：：NCIH1618细胞、SO-RB50细胞、ZR751细胞

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