HuH-28 Cells(赠送Str鉴定报告)|人胆管癌细胞

"HuH-28 Cells(赠送Str鉴定报告)|人胆管癌细胞

细胞背景资料：肝内胆管癌

细胞形态：上皮细胞样

养了几年细胞，说一点自己培养细胞方面的看法：１)培养细胞前，可以看看细胞点说明书，包括细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等；２)不同细胞生长周期不同，有的生长很快，比如说MDA-MB-２３１，传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了，有的又是别慢，等的人心焦，BT４７４就是，传代是一分二，复苏起始的时候两周多才能长满，所以就要在培养细胞的过程中多多摸索了；３)对于娇弱的细胞，就得细心呵护了，胰酶消化不能过久，吹得时候要轻柔，离心时候也要注意转速和时间，每天都要去看一下细胞，肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况；４)冻存细胞复苏后第二天ZuiHAO更换一次培养基；５)培养箱隔一段时间彻底用酒精棉擦洗一次；６)养细胞Zui大的教训：不能偷懒!细胞虐我千百遍，我待细胞如初恋。１)不管买的细胞、惠赠的细胞，刚拿到手赶紧做两件事：检测是否有支原体污染; 迅速扩增冻存；２)发现有污染迅速处理掉，别是当你养了很多种细胞时; 细菌污染，真菌污染很容易发现，支原体污染的话，细胞会长的慢，买个支原体检测的kit定期检测一下；３)传代细胞日常的值日清洁是必须的，此外还要定期熏蒸；４)细胞的传代一定要规律，保持相同的confluency和传代时间间隔，不要随心所欲或者拖延；５)注意个人卫生。

细胞生长：贴壁

PCI:SG-231细胞类似产品：：SK-ES1细胞、Hs 27细胞、Hs 706.T细胞

TGW-nu-1细胞类似产品：：Hep2细胞、SW 626细胞、SF-539 BT细胞

BV2细胞类似产品：：KYSE 520细胞、HCC-2108细胞、SKG3A细胞

GB1细胞类似产品：：COLO 680N细胞、HL1细胞、rUCMSCs细胞

COV434细胞类似产品：：SRS-82细胞、NWA细胞、FL83B细胞

HuH-28 Cells(赠送Str鉴定报告)|人胆管癌细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，ZuiHAO经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

A-549细胞类似产品：：MDAMB468细胞、HCC1937细胞、P30-OHK细胞

HCT/Taxo1细胞类似产品：：NTERA2-D1细胞、RKN细胞、NW-MEL-38细胞

B104 [Rat neuroblastoma]细胞类似产品：：C57/B6-L细胞、HHL5细胞、C166细胞

NTERA-2cl.D1细胞类似产品：：DHBE细胞、MDA PCa 2b细胞、KCL22S细胞

H647细胞类似产品：：DMS-273细胞、FRhK4细胞、Reuber-H-35 hepatoma细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

HuH-28 Cells(赠送Str鉴定报告)|人胆管癌细胞

细胞生长特性：贴壁

NCIH647细胞类似产品：：Kit 225-K6细胞、Tca-83细胞、CX1细胞

Eca-109细胞类似产品：：SKMEL1细胞、F-36P细胞、HCMEC(BL12-H)细胞

NB.4细胞类似产品：：FHL 124细胞、OV-90细胞、FDCP1细胞

TE-15细胞类似产品：：MV4:11细胞、CHOS细胞、NCI-H820细胞

NCIH1395细胞类似产品：：C2-C12细胞、MH-S细胞、BJAB-1细胞

OCM1细胞类似产品：：CTV-1细胞、hTERTHME1细胞、CL-11细胞

购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，原因比较复杂，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳；血清使用错误或血清的品质不佳；解冻过程错误；冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心；悬浑细胞误认为死细胞；培养温度使用错误；细胞置于-８０℃太久等。建议严格参照ATCC的标准操作规程进行细胞复苏、冻存等工作。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００×g(约１OOOrpm),５-１０分钟，转速过GAO或离心时间过长都将造成细胞死亡。合适的离心转速是根据相对离心力决定。RCF=１.１１９×１０５×r×(rpm)２，其中r为离心机转轴中心与离心套管底部内壁的距离；rpm为离心机每分钟的转数；RCF(relative centrifugal force)为相对离心力，以重力加速度g(９８０.６６cm/s２)的倍数来表示单位。

贴壁消化难题：１，先用PBS 把细胞洗两遍，使瓶内没有血清了，减少对胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在细胞有些消化下来时，拿着瓶口，运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体，这样细胞很快就下来了，还不需要吹打，分散也均匀；２，成团、絮状：消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象，血清可以终止胰酶的作用，如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清终止，如果消化液中加入了edta的话，就要将消化液倒干净，如果细胞贴壁要求不是很严格的话，一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基，加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性Zui强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势)，随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验，则不能弃去胰酶)，加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代，否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片)；消化过度：马上用培养基中和，用吸管吹打细胞，收集全部的细胞到以无菌的离心管中８００RPM ３分钟。弃上清，用全培重悬，换新的培养瓶继续培养，状态不HAO的细胞在培养的过程中会死亡脱落，在换液的时候可以清除掉！

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266 Bl细胞类似产品：：GM03671C细胞、KM-H2细胞、SACC-83细胞

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GM03573细胞类似产品：：L5178Y TK+/-3.7.2c细胞、GM03320细胞、H-2141细胞

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Hs 729T细胞类似产品：：MDA175细胞、3T3-F442A细胞、SW1463细胞

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Panc 05.04细胞类似产品：：KMST6细胞、CMEC/D3细胞、NUGC-4细胞

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A-673细胞类似产品：：NCI-H2085细胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3细胞、KG-1a细胞

H-498细胞类似产品：：NHRF细胞、SNU368细胞、COLO 320 DM细胞

H1623细胞类似产品：：OCILY7细胞、HO-8910PM细胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3细胞

MFE296细胞类似产品：：SU-DHL1细胞、CCD-841CoTr细胞、HBL1细胞

786.O细胞类似产品：：NCIH2347细胞、Caov-3细胞、NCIH1838细胞

WM 239A细胞类似产品：：WEHI 164 TC细胞、NCI-H1672细胞、JHH-2细胞

CHP212细胞类似产品：：CTV1细胞、T-98细胞、Farage Original Line细胞

HET1A细胞类似产品：：COR-L279细胞、Gerner 7666细胞、H2195细胞

HD-LM-2细胞类似产品：：EOC 20细胞、P30/OHK细胞、LOUNH91细胞

NCIH1703细胞类似产品：：NK-10A细胞、U-138 MG细胞、MKN-1细胞

CCD-18Co细胞类似产品：：KMB-17细胞、NTera2 cl.D1细胞、SW 962细胞

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