DrG Cells(赠送Str鉴定报告)|大鼠背根神经细胞

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细胞背景资料：背根神经细胞

细胞形态：上皮细胞样

【细胞培养中原虫的污染情况总结】原虫：培养液可轻微浑浊，显微镜下那些细小的点状物数量非常多，轻微活动，细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢，而且细胞状态不HAO，边缘不清楚，细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的，但他们的数量小，细胞站YOU势所以不会影响到细胞的正常生长，只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长，Zui终形成恶性循环。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等关于培养基的无菌状况，取培养基至培养瓶中(不加细胞)，３７度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长就是操作的问题。也可以在培养基中事先加入双抗(酸链霉素和苄青霉素)。但双抗有时会影响细胞的状态，所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗，以避免影响实验结果。１)孵箱应定期用三氧机消毒或者紫外光照射，并用酒精和新洁尔灭试擦孵箱同时孵箱内的水应是三蒸水；２)超净台\取材\器材\培养液\培养瓶\操作等因素；３)超净台的风机不能过大，风机到６-８格。否则也可能能致霉菌污染；４)无菌室经甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的喷洒中和，约几小时即可进入操作。

细胞生长：贴壁

NK-92 MI细胞类似产品：：H2291细胞、GP293细胞、BE(2)M17细胞

U-343 MG细胞类似产品：：MGH-U3 (RN)细胞、H735细胞、H1385细胞

DHL-6细胞类似产品：：MLMA细胞、H719细胞、A549/DDP细胞

PF382细胞类似产品：：FRTL-5 Cl 2细胞、RWPE1细胞、PC 61 5.3细胞

FOXNY细胞类似产品：：B16/F1细胞、P815细胞、251 MG细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，ZuiHAO经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

Eca-109细胞类似产品：：SKMEL1细胞、F-36P细胞、HCMEC(BL12-H)细胞

Baby Hamster Kidney 21细胞类似产品：：H2087细胞、DHBE细胞、H520细胞

ID8细胞类似产品：：IPI-2I细胞、RA 1细胞、FHs 74 Int细胞

C26细胞类似产品：：LS123细胞、TNC-1B12B4细胞、H9c2细胞

WC00097细胞类似产品：：HCC0202细胞、MFE-296细胞、SEM细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁

Lewis Lung细胞类似产品：：WEHI231细胞、UMNSAH/DF#1细胞、LIXC-002细胞

A2780CP70细胞类似产品：：P3 NS1 Ag4/1细胞、THLE2细胞、B16 melanoma细胞

BHP 10-3细胞类似产品：：W133细胞、Jurkat clone A3细胞、RPMI 1788细胞

JB6 Cl 30-7b细胞类似产品：：T-ALL-1细胞、Jurkat-77细胞、NCI-H2030细胞

MES-SA Dx5细胞类似产品：：Hs294细胞、HSC6细胞、C-33 A细胞

LTEP-a-2细胞类似产品：：BOWES细胞、SKNBE(2c)细胞、A498细胞

常见细胞培养中一些问题总结：１)培养基中血清的比例多少合适？血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为５%-１５%，不要低于５%或GAO过２０%，因为含量过低会导致细胞营养不足，过GAO则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为１０%，可以适量加减；２)何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上的更换时间，按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换；３)购买的复苏细胞，为何会有脱落？因为运输的过程中不可避免的会有震荡，收到后可以离心收集；４)购买的细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；５)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–８０°C太久；６)收到的冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。

正确的细胞复苏需知事项：细胞冻存HAO了，接下来要注意什么问题呢？没错，就是记得到时间了，拿出来复苏。那么，细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢？细胞活力和形态检查的作用何在？活力检查——千万不要使用不健康的细胞，可能有污染(真菌、支原体等)，如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞：补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至７０%单层时收获细胞，计数活细胞数，用冻存液调整细胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整)；冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞，有不同类型的冻存液，根据细胞类型选择Zui合适的冻存液(常用的冻存液成分有)：５-１０% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质；５-１５%甘油；如果细胞在无血清培养基内生长，应在５０%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长２４小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记HAO细胞类型，日期，冻存人等信息，并保证每冻存管不超过１.５ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以Zui快的速度转移冻存管知液氮罐内，因此，此步骤ZuiHAO使用干冰，或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意，在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息，做HAO记录是非常非常重要的！还有一个Zui重要的，一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞，以免其中的一个液氮罐出现问题！细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要，熟记以下要点：当从液氮罐内取出细胞时，有可能会出现冻存管破裂的情况，使用保护面罩和防护服十分必要；其实，细胞复苏只是一个简单的实验，不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节，不然，也不一定会尽如人意。例如说，人身健康方面：一定要记得做HAO防冻工作，戴上护目镜；尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。

H-2135细胞类似产品：：ROS17/28细胞、SKRC20细胞、Epstein-Barr-1细胞

KYSE 510细胞类似产品：：NCIH1105细胞、RK 13细胞、Hs737T细胞

MD Anderson-Metastatic Breast-361细胞类似产品：：OCILY10细胞、RCC23细胞、CRFK细胞

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CAL-120细胞类似产品：：Ishikawa细胞、RAT2细胞、MBT-2细胞

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Rat1细胞类似产品：：INS-1细胞、HPaSteC(HPSC)细胞、SW 780细胞

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H-522细胞类似产品：：HEK-293-F细胞、HTR8/SVneo细胞、H-1703细胞

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SCC90细胞类似产品：：COLO.205细胞、U-373MG ATCC细胞、W256细胞

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RT-BM细胞类似产品：：DHL6细胞、H-740细胞、OKAC1细胞

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Hs 832(C).T细胞类似产品：：H-2085细胞、NW38细胞、HCC-202细胞

OVCAR 5细胞类似产品：：Nb-2细胞、MTC-TT细胞、SW527细胞

KLN-205细胞类似产品：：RCS细胞、H1437细胞、Centre Antoine Lacassagne-51细胞

OCIAML3细胞类似产品：：BetaTC6细胞、GM2132细胞、HS-5细胞

NCI H929细胞类似产品：：SUM 159细胞、J82COT细胞、CCRF-CEM细胞

NCIH2029细胞类似产品：：16-HBE细胞、CFPAC1细胞、Transformed Human Liver Epithelial-3细胞

Hs445细胞类似产品：：SK-RC-39细胞、CAL85-1细胞、CEM-C1细胞

alpha-TC1.6细胞类似产品：：Line 522细胞、MV 4;11细胞、Leydig细胞

Cattle chondrocytes细胞类似产品：：L5178YR细胞、S37细胞、P3JHR1细胞

RPE-hTERT细胞类似产品：：alpha TC1.6细胞、NTERA2细胞、D-283MED细胞

OCI/AML2细胞类似产品：：BrCL18细胞、CORL26细胞、MDA415细胞

A-9细胞类似产品：：LAD 2细胞、Los Angeles Prostate Cancer-4细胞、C2BBe 1细胞

LUDLU-1细胞类似产品：：HOP62细胞、HL-1细胞、BN-CL2细胞

MD Anderson-Metastatic Breast-361细胞类似产品：：OCILY10细胞、SUDHL-4细胞、BNL.CL2细胞

CCLP-1细胞类似产品：：NCI-SNU-886细胞、OCI-Ly 1细胞、C166细胞

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