SNU-719 Cells(赠送Str鉴定报告)|人胃癌细胞

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细胞背景资料：胃癌；男性

细胞形态：上皮细胞样

解冻细胞常见实验问题分析及推荐解决方法：在解冻冻存细胞时，发现会出现存活率低、大量细胞碎片及生长缓慢等问题，究竟是什么原因导致，我们该怎么进行解决？以下是国内外细胞培养专家针对解冻细胞实验问题，总结的一些解决方案！出现低存活率的可能原因及推荐解决方案如下：１)解冻过程中细胞裂解，推荐的解决方案：可预期到一定量的细胞死亡，因此细胞的浓度应足够GAO，考虑到这一损失。起始浓度为１*１０(６)至１*１０(７)细胞/毫升；２)解冻过程中的问题，推荐的解决方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷冻的培养物，保存时间为１-５天，但这不是保存的方法。在３７℃充分解冻后应立即开始培养；３)对冷冻液过敏，推荐的解决方案：A.完全或部分更换培养基，减少培养基中冷冻液的量。在２４小时后更换培养液体可全部去除冷冻液。B.留出更多时间供培养物恢复。有时细胞需要几周时间才能形成单层或密集的悬浮物，取决于冷冻时细胞的年龄或传代次数或在生长阶段中的位置。冷冻的Zui佳条件在对数期；４)被冷冻的原种细胞的年龄或冷冻时培养物的年龄，推荐的解决方案：解冻Zui近冷冻的细胞。细胞处于冷冻状态的时间越长，存活率越低。检查冷冻细胞的时间和方法。在冷冻时细胞应处于对数期。

细胞生长：贴壁

EBC-1细胞类似产品：：HCMEC细胞、Institute for Medical Research-32细胞、NCI-H650细胞

CF-1 MEF细胞类似产品：：Centre Antoine Lacassagne-62细胞、RM1细胞、NCI-H-82细胞

KM12SM细胞类似产品：：OV90细胞、16-HBEo细胞、SW 948细胞

TK-10细胞类似产品：：Panc 03.27细胞、FLC-7细胞、Hep2细胞

Mv1Lu细胞类似产品：：P3X63-Ag8.653细胞、KU-812细胞、BIU-87细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

悬浮细胞不容易转染：悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞GAO出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次，脂质体试剂的毒性较大，这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外，悬浮细胞不易培养，易死亡，也给细胞转染造成了一定的困难。为了提GAO悬浮细胞的转染效率，可以使用非脂质体的转染试剂，如纳米材料的。也可以使用电转染方法，针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的，电击对细胞有一定的损伤，ZuiHAO选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂，可以将电击对细胞的伤害降到Zui低，悬浮细胞不易转染，选对试剂及良HAO的细胞培养环境才是关键。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

H-1651细胞类似产品：：A431/P细胞、SC1细胞、LTEP-sm细胞

LS 1034细胞类似产品：：MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞、LY细胞、OVCA 433细胞

MH7A细胞类似产品：：HOK细胞、BHP-10细胞、H1793细胞

BIU87细胞类似产品：：H2591细胞、NCI-H358细胞、HSAEC1-KT细胞

TC7细胞类似产品：：KMBC细胞、LC2/Ad细胞、A-72细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁

NS-I/1细胞类似产品：：3T3J2细胞、WRL-68细胞、SNUC2B细胞

GM00215A细胞类似产品：：HOSEpiC细胞、H2122细胞、GM02219D细胞

IBRS-2细胞类似产品：：Lewis Lung Cancer细胞、OV2008细胞、NCIH1092细胞

H-524细胞类似产品：：SRA01/04细胞、FC33细胞、Rat Glomerular Endothelial细胞

COLO678细胞类似产品：：P30 OHK细胞、PANC403细胞、H9细胞

Hopkins-92细胞类似产品：：SKBr3细胞、H1650细胞、Panc 4.03细胞

细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏HAO的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。

贴壁消化难题：１，先用PBS 把细胞洗两遍，使瓶内没有血清了，减少对胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在细胞有些消化下来时，拿着瓶口，运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体，这样细胞很快就下来了，还不需要吹打，分散也均匀；２，成团、絮状：消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象，血清可以终止胰酶的作用，如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清终止，如果消化液中加入了edta的话，就要将消化液倒干净，如果细胞贴壁要求不是很严格的话，一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基，加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性Zui强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势)，随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验，则不能弃去胰酶)，加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代，否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片)；消化过度：马上用培养基中和，用吸管吹打细胞，收集全部的细胞到以无菌的离心管中８００RPM ３分钟。弃上清，用全培重悬，换新的培养瓶继续培养，状态不HAO的细胞在培养的过程中会死亡脱落，在换液的时候可以清除掉！

J774 A1细胞类似产品：：Hs 895.T细胞、C-26细胞、OCIAML3细胞

KM H-2细胞类似产品：：NCI-H1838细胞、Kit 225细胞、AZ521细胞

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TE4细胞类似产品：：RKO_AS45细胞、SNB-19细胞、BrCL18细胞

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COLO 320DM细胞类似产品：：4T1.2细胞、R2C细胞、C3H/10T1/2 CL8细胞

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769P细胞类似产品：：AHH1细胞、AU-565细胞、H-1770细胞

HCC-1438细胞类似产品：：LN229细胞、PA I细胞、BpRcl细胞

CTV-1细胞类似产品：：P3/NS1/Ag4-1细胞、T-98G细胞、FLS细胞

NCI-H1417细胞类似产品：：KTCTL-140细胞、SNU-620细胞、HuT78细胞

WEHI 3细胞类似产品：：NCI-H292细胞、Hs27F细胞、Clone 15 HL-60细胞

LUDLU 1细胞类似产品：：HCC9204细胞、CCD841CoTr细胞、NPC-TW-039细胞

HH [Human lymphoma]细胞类似产品：：NCIH1184细胞、HL-60 Clone 15细胞、JM1细胞

Hs-27细胞类似产品：：SKNBE2细胞、NCI-H2195细胞、AA-Mel细胞

HCC941122细胞类似产品：：NCI-H1963细胞、WM-115细胞、NMCG-1细胞

CESS细胞类似产品：：EL 4细胞、L cells细胞、KMS-26细胞

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