ND7/23 Cells(赠送Str鉴定报告)|鼠神经母细胞瘤细胞

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细胞背景资料：神经母细胞瘤

细胞形态：上皮细胞样

解冻细胞常见实验问题分析及推荐解决方法：在解冻冻存细胞时，发现会出现存活率低、大量细胞碎片及生长缓慢等问题，究竟是什么原因导致，我们该怎么进行解决？以下是国内外细胞培养专家针对解冻细胞实验问题，总结的一些解决方案！出现低存活率的可能原因及推荐解决方案如下：１)解冻过程中细胞裂解，推荐的解决方案：可预期到一定量的细胞死亡，因此细胞的浓度应足够GAO，考虑到这一损失。起始浓度为１*１０(６)至１*１０(７)细胞/毫升；２)解冻过程中的问题，推荐的解决方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷冻的培养物，保存时间为１-５天，但这不是保存的方法。在３７℃充分解冻后应立即开始培养；３)对冷冻液过敏，推荐的解决方案：A.完全或部分更换培养基，减少培养基中冷冻液的量。在２４小时后更换培养液体可全部去除冷冻液。B.留出更多时间供培养物恢复。有时细胞需要几周时间才能形成单层或密集的悬浮物，取决于冷冻时细胞的年龄或传代次数或在生长阶段中的位置。冷冻的Zui佳条件在对数期；４)被冷冻的原种细胞的年龄或冷冻时培养物的年龄，推荐的解决方案：解冻Zui近冷冻的细胞。细胞处于冷冻状态的时间越长，存活率越低。检查冷冻细胞的时间和方法。在冷冻时细胞应处于对数期。

细胞生长：贴壁

FLS细胞类似产品：：Hs68细胞、PC10细胞、SNU484细胞

HFLS细胞类似产品：：MPC11细胞、HCC-9204细胞、HEM细胞

H-1954细胞类似产品：：OV 1063细胞、ZR75_1细胞、C-Lu65细胞

HCGC细胞类似产品：：BC3H-1细胞、PG-BE1细胞、OCUM-1细胞

NCIH747细胞类似产品：：SK Mel 1细胞、RFL-6细胞、U266BL细胞

ND7/23 Cells(赠送Str鉴定报告)|鼠神经母细胞瘤细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

预防细胞污染的注意事项：实验进行前，超净台用紫外灯照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超净台台面，并开启超净台风扇运转10min左右再开始实验操作。实验用品用75%酒精擦拭后才能放入超净台内；实验用品用完应移出超净台，以利于气流的流通。实验完成后用75%酒精擦拭超净台台面。每次操作只处理一种细胞；即使不同细胞使用相同的培养基也不要共享同一瓶培养基，避免细胞间的交叉污染。操作时小心取用无菌的物品，避免污染。勿碰触吸管尖头，不小心碰触后应立即更换；不要在打开的容器瓶口正上方操作，容器打开后，倾斜45°操作，操作完成后及时盖上瓶盖。CO2培养箱的清洁是较易被忽视的地方，应1-2个月对培养箱定期进行清洁消毒。先用75%酒精擦拭培养箱内壁、隔板、水盘2-3次，用双蒸水清洗，再用酒精棉球擦拭一遍，后紫外灯照射4h以上。水盘内加入无菌水（应每周更换），待培养箱内温度、湿度、CO2浓度稳定后再放入细胞。定期清洗或更换超净台过滤膜、预滤网。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

PY8119细胞类似产品：：Lu-165细胞、LN382细胞、BC-022细胞

L5178Y细胞类似产品：：Transformed Human Liver Epithelial-3细胞、J774.A1细胞、PL-5细胞

H-1105细胞类似产品：：UWB1289细胞、Pt K2 (NBL-5)细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞

CTSC-3细胞类似产品：：HFF细胞、Nb2-11细胞、SU-DHL-5细胞

Hs819T细胞类似产品：：HS-766-T细胞、U2OS细胞、INS1-E细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁

CL1.0细胞类似产品：：COR-L 105细胞、M14-MEL细胞、MMAc-Serum Free细胞

BRL3A细胞类似产品：：WEHI-164细胞、NTera-2D1细胞、COLO-205细胞

SW837细胞类似产品：：MRC 5细胞、293AD细胞、EBC-1细胞

OVCAR 420细胞类似产品：：Panc 02.03细胞、GM01232细胞、Hs675T细胞

MLFC细胞类似产品：：Murine Carcinoma-38细胞、Karpas422细胞、MM1细胞

KP4细胞类似产品：：NS653细胞、F9细胞、VP229细胞

细胞冻存的步骤：１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天ZuiHAO换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为５×１０６～１×１０７/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具体要看培养的细胞类型来选择；３)将分装上述细胞悬液于２ml冻存管中，每管０.２５ml。冻存管要将盖子盖紧，并标记HAO细胞名称和冻存日期，同时作HAO登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)；４)将装HAO细胞的冻存管放到冻存盒中，-８０℃冰箱过夜。；如果有程序降温器(放在-８０℃冰箱过夜，放入液氮罐)ZuiHAO;或者可以在４℃，２h;然后转到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，ZuiHAO取出一只冻存管细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。

贴壁消化难题：１，先用PBS 把细胞洗两遍，使瓶内没有血清了，减少对胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在细胞有些消化下来时，拿着瓶口，运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体，这样细胞很快就下来了，还不需要吹打，分散也均匀；２，成团、絮状：消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象，血清可以终止胰酶的作用，如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清终止，如果消化液中加入了edta的话，就要将消化液倒干净，如果细胞贴壁要求不是很严格的话，一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基，加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性Zui强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势)，随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验，则不能弃去胰酶)，加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代，否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片)；消化过度：马上用培养基中和，用吸管吹打细胞，收集全部的细胞到以无菌的离心管中８００RPM ３分钟。弃上清，用全培重悬，换新的培养瓶继续培养，状态不HAO的细胞在培养的过程中会死亡脱落，在换液的时候可以清除掉！

NCI-H810细胞类似产品：：ACHN细胞、JB6 Cl 30-7b细胞、H2228细胞

G-292, clone A141B1细胞类似产品：：Hs 766.T细胞、SCC-1395细胞、MT4细胞

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SBC3细胞类似产品：：L-M[TK-]细胞、RPE1细胞、WERI Rb-1细胞

MGH-U3 (RN)细胞类似产品：：P3X63Ag8细胞、MCF-10 Attached细胞、BV-173细胞

P3-Jiyoye细胞类似产品：：M-NFS-60细胞、SHZ-88细胞、SK-RC-39细胞

LM1细胞类似产品：：MDA231-LM2-4175细胞、TCC Sup细胞、149PT细胞

HCC-1428细胞类似产品：：BNL-CL.2细胞、HFL1细胞、130-T细胞

GLAG-66细胞类似产品：：Molm 13细胞、RPMI7666细胞、SV-HUC-1细胞

751细胞类似产品：：SK-NEP-1细胞、H-1792细胞、RIN-14B细胞

LC-1 sq细胞类似产品：：CEM/C1细胞、MIO-M1细胞、WEHI3B细胞

MDCK2细胞类似产品：：MDA-MB-134细胞、Walker-256细胞、Mv 1 Lu细胞

SUM190细胞类似产品：：SW 780细胞、L-929细胞、BALB 3T3 clone A31细胞

ChaGo-K-1细胞类似产品：：Hs 729细胞、AG06814-J细胞、PC10细胞

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