M2-10B4 Cells(赠送Str鉴定报告)|小鼠骨髓纤维原细胞

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细胞背景资料：骨髓；纤维原细胞；C５７BL/６J X C３H/HeJ

细胞形态：上皮细胞样

解冻细胞常见实验问题分析及推荐解决方法：在解冻冻存细胞时，发现会出现存活率低、大量细胞碎片及生长缓慢等问题，究竟是什么原因导致，我们该怎么进行解决？以下是国内外细胞培养专家针对解冻细胞实验问题，总结的一些解决方案！出现低存活率的可能原因及推荐解决方案如下：１)解冻过程中细胞裂解，推荐的解决方案：可预期到一定量的细胞死亡，因此细胞的浓度应足够GAO，考虑到这一损失。起始浓度为１*１０(６)至１*１０(７)细胞/毫升；２)解冻过程中的问题，推荐的解决方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷冻的培养物，保存时间为１-５天，但这不是保存的方法。在３７℃充分解冻后应立即开始培养；３)对冷冻液过敏，推荐的解决方案：A.完全或部分更换培养基，减少培养基中冷冻液的量。在２４小时后更换培养液体可全部去除冷冻液。B.留出更多时间供培养物恢复。有时细胞需要几周时间才能形成单层或密集的悬浮物，取决于冷冻时细胞的年龄或传代次数或在生长阶段中的位置。冷冻的Zui佳条件在对数期；４)被冷冻的原种细胞的年龄或冷冻时培养物的年龄，推荐的解决方案：解冻Zui近冷冻的细胞。细胞处于冷冻状态的时间越长，存活率越低。检查冷冻细胞的时间和方法。在冷冻时细胞应处于对数期。

细胞生长：贴壁

SMMC-7721细胞类似产品：：CCD841CoN细胞、NCIH1651细胞、L Wnt-3A细胞

EPC细胞类似产品：：M059J细胞、SPCA1细胞、HCC1419细胞

Hs 294T细胞类似产品：：NTERA-2 clone D1细胞、OVCAR.5细胞、CHL细胞

KU812-F细胞类似产品：：639V细胞、B35细胞、Pro-5 Lec1.3c细胞

LWnt3A细胞类似产品：：NCI-H2195细胞、NCI-H2330细胞、SGC-7901细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞培养时分布不均匀，通常操作步骤：做细胞生物学实验，细胞铺板大概是我们Zui常见的一个实验。但有时候铺得不是很均匀：要么中间密周围稀，要么周围密中间秃。下面为大家分享几点经验。尽量消化细胞分散成单细胞悬液。对于易于消化的细胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶润洗一遍（25cm2培养瓶或6孔板），弃掉胰酶，37度消化2-3分钟或室温消化5min左右，镜下观察是否细胞消化较为分散。如果不够，延长消化时间。96孔板一般以100微升每孔接种，直接用100微升移液器吸取细胞悬液，沿孔壁（稍离开一点孔底即可，不要离底太GAO）直接接入，移液器不需完全打到Zui大，轻轻按下即可，每铺完一行换一次枪头同时轻轻混匀细胞悬液。都加完后盖上盖子，左手轻轻扶住板的左边，右手轻轻敲击板的右边缘，注意把握力度（我一般轻巧敲三下），太强或次数太多会导致细胞集中成堆，将板顺时针旋转（逆时针效果不HAO），依次敲击剩余三个边，静置约5分钟，放入37度培养箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用将每个孔加入少量无血清培养基，晃动浸润整个孔底，然后用移液枪吸至第二孔，同样方法浸润孔底，其它孔依此类推，这样整个孔底都是湿润的，细胞悬液会平铺在整个孔底，注意加完细胞悬液后要放工作台静置一下。这个方法就是有点慢，但操作熟练了也不慢。也可以采用轻拍的方式，但力度没有96孔板HAO掌握，效果没有96孔板HAO。培养瓶里面加HAO细胞以后(比如传代HAO/分HAO细胞以后)，先顺时针摇晃3次，马上逆时针摇晃3次。然后延X轴Y轴分别水平摇动3次。放入CO2培养箱后,平放着培养瓶重复延X轴Y轴分别水平摇动3次。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

SKMES细胞类似产品：：THLE2细胞、HcerEpic细胞、hFOB1.19细胞

KATO III细胞类似产品：：MES 23.5细胞、PLC8024细胞、TGW-I-nu细胞

JHH7细胞类似产品：：TE354.T细胞、GM03190细胞、WERI-Rb-1细胞

MEF (CF-1)细胞类似产品：：HPDE6c7细胞、RMG-I细胞、1301细胞

NCI-H2195细胞类似产品：：Menschliche Und Tierische Zellkulture-3细胞、HEK 293 EBNA细胞、VMCUB1细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁

NUGC-4细胞类似产品：：WSU-DLCL-2细胞、CF-1 MEF细胞、Be-Wo细胞

LC1-Sq细胞类似产品：：SCI1细胞、NBL-2细胞、Pa17C细胞

Homo sapiens No. 578, breast cells细胞类似产品：：TMK-1细胞、Ramos.2G6.4C10细胞、COLO 206F细胞

CV-1细胞类似产品：：CCD 1112SK细胞、HCPEpiC细胞、WiDrTC细胞

NBLAN5T细胞类似产品：：KFB细胞、HEL-299细胞、CEK细胞

HEK/293细胞类似产品：：VMM5A细胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed细胞、L-M[TK-]细胞

为什么培养的细胞要及时传代？体外培养的细胞大多具有生长接触抑制的性，也就是说当一个细胞被其他细胞包围的时候，它就会停止生长，及时传代后，细胞的生长得以继续。培养细胞生长减慢的原因在哪些?其解决办法有哪些？可能的原因有：更换了不同的培养液或血清；培养液中一些细胞生长必需成分如谷眈肢或生长因子等耗尽或缺乏或己被破坏；培养物中有少量细菌或真菌污染；试剂保存不当；比较新培养液与原培养液成分，比较新血清与旧血清等，找出其它可能的原因。解决办法：增加起始培养细胞浓度；让细胞逐渐适应新培养液；换入新鲜配制培养液；补加谷酷肢或生长因子等；用无抗生素培养液培养，如发现污染，去弃培养物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培养液需在２-８℃避光保存;含血清完全培养液在２-８℃保存，并在２周内用完;分离培养物，检测支原体。冷冻管应如何解冻？取出冷冻管后，须立即放入３７℃水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在１-２分钟内大部分融化，别注意，需残留一小块冰块，就可拿到超净工作台操作细胞，用７５%酒精消毒冻存管，用新鲜培养基将细胞转移至培养瓶。另外冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管爆裂。

细胞传代培养实验：体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后，由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭，将培养的细胞分散，从容器中取出，以１:２或１:３以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为传代培养；细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间，与细胞世代或倍增不同。在一代中，细胞培增３～６次。细胞传代后，一般经过三个阶段：游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度，即细胞群的分裂相数/１００个细胞。一般细胞分裂指数介于０.２％～０.５％，肿瘤细胞可达３～５％；细胞接种２～３天分裂增殖旺盛，是活力ZuiHAO时期，称指数增生期(对数生长期)，适宜进行各种试验。实验步骤：１.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出，在超净工作台中倒掉瓶内的培养液，加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜)，静置５～１０分钟。２.在倒置镜下观察被消化的细胞，如果细胞变圆，相互之间不再连接成片，这时应立即在超净台中将消化液倒掉，加入３～５ml新鲜培养液，吹打，制成细胞悬液。３.将细胞悬液吸出２ml左右，加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加３ml左右培养液，盖HAO瓶塞，送回二氧化碳培养箱中，继续进行培养。一般情况，传代后的细胞在２小时左右就能附着在培养瓶壁上，２～４天就可在瓶内形成单层，需要再次进行传代。

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PG-LH7细胞类似产品：：RSMC细胞、T/GHA-VSMC细胞、CAL 78细胞

ST细胞类似产品：：HGF-1细胞、THPI细胞、RGM-1细胞

INS-1E细胞类似产品：：AA-Mel细胞、Ramos (RA)细胞、PL-45细胞

Calu-1细胞类似产品：：KYSE-140细胞、BCAP37细胞、NCI-BL2141细胞

MCF-7细胞类似产品：：MONO-MAC 6细胞、NCIH1436细胞、LS 513细胞

UM-UC-3细胞类似产品：：16HBEo-细胞、A704细胞、AN3CA细胞

NCI.H460细胞类似产品：：THP-1(ATCC)细胞、P3J HR-1细胞、NS-I/1细胞

B104 [Rat neuroblastoma]细胞类似产品：：C57/B6-L细胞、HHL5细胞、C166细胞

Colon26细胞类似产品：：ABE­8.1/2细胞、TE 85.T细胞、BCECs细胞

KNS-62细胞类似产品：：UMNSAH-DF-1细胞、SK-N-BE(2)细胞、MNNG/HOS细胞

GM3570细胞类似产品：：HS-729细胞、OCILY10细胞、GM02132细胞

INS-1细胞类似产品：：BALL1细胞、22Rv1细胞、COLO 206细胞

Fox/NY细胞类似产品：：ZR751细胞、HCS-2/8细胞、SNB-19细胞

SUDHL-1细胞类似产品：：NCI-SNU-119细胞、JIMT-1细胞、COS1细胞

KNS-42细胞类似产品：：P-388D1细胞、Cates 1B细胞、HMSC细胞

HH [Human lymphoma]细胞类似产品：：NCIH1184细胞、HL-60 Clone 15细胞、JM1细胞

PC3细胞类似产品：：MDCK-2细胞、PFSK1细胞、M20 [Human melanoma]细胞

CHO-Lec1细胞类似产品：：Madison细胞、T-CAM2细胞、SK-MEL-1细胞

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