Huh-7.5 Cells

"Huh-7.5 Cells(赠送Str鉴定报告)|人肝癌细胞

细胞背景资料：肝癌；男性

细胞形态：上皮细胞样

解冻细胞常见实验问题分析及推荐解决方法：在解冻冻存细胞时，发现会出现存活率低、大量细胞碎片及生长缓慢等问题，究竟是什么原因导致，我们该怎么进行解决？以下是国内外细胞培养专家针对解冻细胞实验问题，总结的一些解决方案！出现低存活率的可能原因及推荐解决方案如下：１)解冻过程中细胞裂解，推荐的解决方案：可预期到一定量的细胞死亡，因此细胞的浓度应足够GAO，考虑到这一损失。起始浓度为１*１０(６)至１*１０(７)细胞/毫升；２)解冻过程中的问题，推荐的解决方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷冻的培养物，保存时间为１-５天，但这不是保存的方法。在３７℃充分解冻后应立即开始培养；３)对冷冻液过敏，推荐的解决方案：A.完全或部分更换培养基，减少培养基中冷冻液的量。在２４小时后更换培养液体可全部去除冷冻液。B.留出更多时间供培养物恢复。有时细胞需要几周时间才能形成单层或密集的悬浮物，取决于冷冻时细胞的年龄或传代次数或在生长阶段中的位置。冷冻的Zui佳条件在对数期；４)被冷冻的原种细胞的年龄或冷冻时培养物的年龄，推荐的解决方案：解冻Zui近冷冻的细胞。细胞处于冷冻状态的时间越长，存活率越低。检查冷冻细胞的时间和方法。在冷冻时细胞应处于对数期。

细胞生长：贴壁

HOC细胞类似产品：：H-2073细胞、293S细胞、H1648细胞

TK-10细胞类似产品：：Panc 03.27细胞、FLC-7细胞、Hep2细胞

Mono Mac6细胞类似产品：：138 MG细胞、KATOIII细胞、SCC-9细胞

GOTO细胞类似产品：：MTC-TT细胞、OV 1063细胞、KRC-Y细胞

Mahlavu细胞类似产品：：Sp2/0-Ag14细胞、MB468细胞、HO-1-N-1细胞

Huh-7.5 Cells(赠送Str鉴定报告)|人肝癌细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞培养更HAO经验详解：1)收到细胞，首先要镜检：观察细胞形态是否正常，对于贴壁细胞则要注意看贴壁情况是否很HAO，观察细胞密度，有疑议及时咨提供细胞的技术人员。 由于运输的时间或者温度的变化，很多贴壁细胞在盛满培养基的瓶子里生长的状态和平时会有点不一样，主要是贴壁牢固问题。比如293T，平时贴壁就不是很牢，在装满的培养基瓶子里面，会发生大片的脱落，细胞聚集在一起，但是细胞生长还是正常的，通过离心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的贴壁生长。2)当通过上一步的观察，细胞初步没有问题时，进行下一步操作。当收到的细胞密达到80%左右时，则处理如下：弃除瓶中大部分培养基，仅保留5到10mL培养所需的常规培养基；或更换新鲜的培养基，置于培养箱中，随后每天观察。 细胞在低于正常生长温度情况下，会调整为静止期，或者慢速生长期，恢复37度的环境至少3个小时左右，才能重新调整到接近对数生长期的状态，在对数生长期进行细胞的传代会大大增加传代的成功率，和细胞的存活率。3)如果经步观察发现细胞密度超过90%，并且细胞状态很HAO时，则复温后2个小时需要立即传代。传代的比例应依据不同的细胞而定。对于生长比较快，状态稳定，不易受外界影响的细胞可以一次多传几瓶；对于生长较慢，细胞比较薄，状态容易波动的细胞类型，一次少传些，每瓶细胞密度大些，便于稳定生长。至于一些比较陌生的细胞，次处理也可以依照第二种情况。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

H2107细胞类似产品：：38C-13细胞、HIT T-15细胞、KB细胞

Lu99A细胞类似产品：：B16-F1细胞、Renal Carcinoma细胞、MBT2细胞

SK_N_BE2C细胞类似产品：：MSTO-211 H细胞、NCI-H865细胞、NCIH2126细胞

TCC-SUP细胞类似产品：：NTERA-2/D1细胞、COLO824细胞、SK-RC-20细胞

SKNBE(1)细胞类似产品：：WERI-Rb 1细胞、HCC-1588细胞、NBL_S细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

Huh-7.5 Cells(赠送Str鉴定报告)|人肝癌细胞

细胞生长特性：贴壁

NTERA-2 cl.D1细胞类似产品：：GM02219细胞、HMC3细胞、B16/F1细胞

KM12SM细胞类似产品：：OV90细胞、16-HBEo细胞、SW 948细胞

293T细胞类似产品：：CMT-64细胞、HL-60 clone15细胞、SMA560细胞

PLB985细胞类似产品：：Pro-5WgaRI3C细胞、P30-OHKUBO细胞、Panc-05.04细胞

SNUC1细胞类似产品：：HSC3细胞、PY8119细胞、AML-EOL-1细胞

OAW42细胞类似产品：：EAC细胞、M210B4细胞、MDA-MB-175-VII细胞

为什么培养的细胞要及时传代？体外培养的细胞大多具有生长接触抑制的性，也就是说当一个细胞被其他细胞包围的时候，它就会停止生长，及时传代后，细胞的生长得以继续。培养细胞生长减慢的原因在哪些?其解决办法有哪些？可能的原因有：更换了不同的培养液或血清；培养液中一些细胞生长必需成分如谷眈肢或生长因子等耗尽或缺乏或己被破坏；培养物中有少量细菌或真菌污染；试剂保存不当；比较新培养液与原培养液成分，比较新血清与旧血清等，找出其它可能的原因。解决办法：增加起始培养细胞浓度；让细胞逐渐适应新培养液；换入新鲜配制培养液；补加谷酷肢或生长因子等；用无抗生素培养液培养，如发现污染，去弃培养物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培养液需在２-８℃避光保存;含血清完全培养液在２-８℃保存，并在２周内用完;分离培养物，检测支原体。冷冻管应如何解冻？取出冷冻管后，须立即放入３７℃水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在１-２分钟内大部分融化，别注意，需残留一小块冰块，就可拿到超净工作台操作细胞，用７５%酒精消毒冻存管，用新鲜培养基将细胞转移至培养瓶。另外冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管爆裂。

细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带HAO防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)ZuiHAO选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较GAO，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不HAO离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰HAO稀释到了无害浓度。

8402细胞类似产品：：VMCUB1细胞、BMDC细胞、WM 2664细胞

TO 175.T细胞类似产品：：RAW264.7细胞、HCC70细胞、SCL2细胞

GM07404D细胞类似产品：：H1838细胞、NS20Y细胞、KP2细胞

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RMC-1细胞类似产品：：VM-CUB-I细胞、LC-1-sq细胞、HuT102细胞

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NS-I/1细胞类似产品：：3T3J2细胞、WRL-68细胞、SNUC2B细胞

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CD18/HPAF细胞类似产品：：NB-9细胞、RL95-2细胞、Chinese Hamster Lung细胞

A 375细胞类似产品：：Hs 746T细胞、MCF-7/ADR细胞、451Lu细胞

PIEC细胞类似产品：：SK-SH-SY5Y细胞、GC-1 spg细胞、WiDr-TC细胞

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University of Arizona Cell Culture-812细胞类似产品：：WEHI 231细胞、HCC-1143细胞、NCIH460细胞

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细胞

Madin Darby Bovine Kidney细胞类似产品：：LU65细胞、JB6 [Mouse]细胞、H1623细胞

HT-29/CX-1细胞类似产品：：231-luc细胞、PC-3/M细胞、HL60细胞

293 F细胞类似产品：：Huh-7.5.1细胞、RS4-11细胞、U87细胞

hs 68细胞类似产品：：MSB1细胞、MOLP-2细胞、RBL2H3细胞

JROECL 21细胞类似产品：：KATOIII细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231细胞、MeT5A细胞

KCL22S细胞类似产品：：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞、SHG-44细胞、SK UT 1细胞

MDA-MB-175VII细胞类似产品：：H-2108细胞、SF767细胞、BNL-HCC细胞

Hep G2/C3A细胞类似产品：：HeLa-229细胞、GM05887细胞、SK-MEL28细胞

211H细胞类似产品：：Gejiu Lung Carcinoma-82细胞、TO175T细胞、HSC 3细胞

PAa细胞类似产品：：ML2细胞、HCC2218细胞、C-8161细胞

MKN45细胞类似产品：：TE-671细胞、MCMEC细胞、SVG(P12)细胞

GM-215细胞类似产品：：H2286细胞、NeHepLxHT细胞、KYSE 410细胞

ABE­8.1/2细胞类似产品：：Bovine ENDometrial cells细胞、SNU886细胞、MCA38细胞

GM07404A细胞类似产品：：SNU407细胞、Hs888 Lu细胞、NPC-TW 039细胞

CHP100细胞类似产品：：HIT-T15细胞、HEK293-EBNA细胞、LTEP-a2细胞

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