LK2 Cells(赠送Str鉴定报告)|人肺鳞癌细胞

"LK2 Cells(赠送Str鉴定报告)|人肺鳞癌细胞

细胞背景资料：肺鳞癌；男性

细胞形态：上皮细胞样

【细胞培养中原虫的污染情况总结】原虫：培养液可轻微浑浊，显微镜下那些细小的点状物数量非常多，轻微活动，细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢，而且细胞状态不HAO，边缘不清楚，细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的，但他们的数量小，细胞站YOU势所以不会影响到细胞的正常生长，只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长，Zui终形成恶性循环。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等关于培养基的无菌状况，取培养基至培养瓶中(不加细胞)，３７度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长就是操作的问题。也可以在培养基中事先加入双抗(酸链霉素和苄青霉素)。但双抗有时会影响细胞的状态，所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗，以避免影响实验结果。１)孵箱应定期用三氧机消毒或者紫外光照射，并用酒精和新洁尔灭试擦孵箱同时孵箱内的水应是三蒸水；２)超净台\取材\器材\培养液\培养瓶\操作等因素；３)超净台的风机不能过大，风机到６-８格。否则也可能能致霉菌污染；４)无菌室经甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的喷洒中和，约几小时即可进入操作。

细胞生长：贴壁

MC3T3, E1 subgroup-4 clone细胞类似产品：：Ketr-3细胞、HAPI细胞、C-6细胞

KE-37细胞类似产品：：KE39细胞、6-T CEM细胞、HM1900细胞

PL-45细胞类似产品：：KPNRTBM1细胞、SAOS 2细胞、DHL-4细胞

M-1细胞类似产品：：HEEpiC细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415细胞、RPMI7951细胞

SU-DHL-6细胞类似产品：：SL-1细胞、H2227细胞、B-CPAP细胞

LK2 Cells(赠送Str鉴定报告)|人肺鳞癌细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

预防细胞污染的注意事项：实验进行前，超净台用紫外灯照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超净台台面，并开启超净台风扇运转10min左右再开始实验操作。实验用品用75%酒精擦拭后才能放入超净台内；实验用品用完应移出超净台，以利于气流的流通。实验完成后用75%酒精擦拭超净台台面。每次操作只处理一种细胞；即使不同细胞使用相同的培养基也不要共享同一瓶培养基，避免细胞间的交叉污染。操作时小心取用无菌的物品，避免污染。勿碰触吸管尖头，不小心碰触后应立即更换；不要在打开的容器瓶口正上方操作，容器打开后，倾斜45°操作，操作完成后及时盖上瓶盖。CO2培养箱的清洁是较易被忽视的地方，应1-2个月对培养箱定期进行清洁消毒。先用75%酒精擦拭培养箱内壁、隔板、水盘2-3次，用双蒸水清洗，再用酒精棉球擦拭一遍，后紫外灯照射4h以上。水盘内加入无菌水（应每周更换），待培养箱内温度、湿度、CO2浓度稳定后再放入细胞。定期清洗或更换超净台过滤膜、预滤网。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

NCI-H1930细胞类似产品：：TCC Sup细胞、Hs695细胞、NCI-H1793细胞

SHP77细胞类似产品：：HS-683细胞、PFSK细胞、TE-10细胞

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EFO-27细胞类似产品：：PLA-802细胞、NCIH1092细胞、PNT1A细胞

RT-112细胞类似产品：：C32-mel细胞、HeLa/DDP细胞、RCC10细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

LK2 Cells(赠送Str鉴定报告)|人肺鳞癌细胞

细胞生长特性：贴壁

KCL-22细胞类似产品：：Central Adrenergic TH-expressing a细胞、MKN28细胞、SaOS细胞

SUSM1细胞类似产品：：SW 527细胞、KNS-42细胞、Eca109细胞

RCS细胞类似产品：：A375细胞、GM17219细胞、PANC3.27细胞

ROS17/2.8细胞类似产品：：WERI细胞、HOS TE 85细胞、SKNAS细胞

K1735细胞类似产品：：C3H 10T1/2细胞、Hs 742.T细胞、LI7细胞

Michigan Cancer Foundation-12F细胞类似产品：：HBL 100细胞、HRCEC细胞、WM-2664细胞

常见细胞培养中一些问题总结：１)培养基中血清的比例多少合适？血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为５%-１５%，不要低于５%或GAO过２０%，因为含量过低会导致细胞营养不足，过GAO则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为１０%，可以适量加减；２)何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上的更换时间，按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换；３)购买的复苏细胞，为何会有脱落？因为运输的过程中不可避免的会有震荡，收到后可以离心收集；４)购买的细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；５)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–８０°C太久；６)收到的冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。

贴壁消化难题：１，先用PBS 把细胞洗两遍，使瓶内没有血清了，减少对胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在细胞有些消化下来时，拿着瓶口，运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体，这样细胞很快就下来了，还不需要吹打，分散也均匀；２，成团、絮状：消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象，血清可以终止胰酶的作用，如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清终止，如果消化液中加入了edta的话，就要将消化液倒干净，如果细胞贴壁要求不是很严格的话，一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基，加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性Zui强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势)，随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验，则不能弃去胰酶)，加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代，否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片)；消化过度：马上用培养基中和，用吸管吹打细胞，收集全部的细胞到以无菌的离心管中８００RPM ３分钟。弃上清，用全培重悬，换新的培养瓶继续培养，状态不HAO的细胞在培养的过程中会死亡脱落，在换液的时候可以清除掉！

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EO771细胞类似产品：：NCIH841细胞、BALB/3T3 cl. A31细胞、Hs 852.T细胞

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LK2 Cells(赠送Str鉴定报告)|人肺鳞癌细胞

Transformed Human Liver Epithelial-3细胞类似产品：：NRCC细胞、TE-1细胞、S.B.细胞

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SK-NEP-1细胞类似产品：：SCL II细胞、Dunn LM8细胞、COLO-829细胞

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NCI-HUT-520细胞类似产品：：P3J HR-1细胞、RS(4;11)细胞、MF2059细胞

U-251 MG细胞类似产品：：AML-EOL-1细胞、AMO1细胞、PC615.3细胞

COR-L26细胞类似产品：：EJ 138细胞、Psi2 DAP细胞、JB-6细胞

NOR10细胞类似产品：：NCI-SNU-387细胞、SL-29细胞、UM-UC14细胞

Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B细胞类似产品：：QBC(939)细胞、JB 6细胞、HIT T15细胞

G292细胞类似产品：：Nb 2细胞、HS940细胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate细胞

H766T细胞类似产品：：Hs27细胞、EAHY-926细胞、Y3Ag1.2.3细胞

A549/ATCC细胞类似产品：：DU-4475细胞、ReNcell CX细胞、CCD-841CoTr细胞

NCI-H2106细胞类似产品：：Institute for Medical Research-32细胞、B16细胞、H2073细胞

CNE2Z细胞类似产品：：LOU-NH-91细胞、CAL 33细胞、C8166细胞

RPMI-2650细胞类似产品：：BC-021细胞、P3/NSI/1-AG4-1细胞、GM04671细胞

COLO 320DM细胞类似产品：：KTCTL-140细胞、TE-4细胞、H6c7细胞

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