COLO 16 Cells(赠送Str鉴定报告)|人皮肤鳞癌细胞

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细胞背景资料：皮肤鳞癌；女性

细胞形态：上皮细胞样

传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些殊的细胞和分化征。传代细胞形成细胞株的Zui大利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。【操作步骤】１)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；２)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；３)置３７℃孵箱或室温(２５℃温度)下进行消化，２~５min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；５)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；６)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO２培养箱中进行培养；７)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般２～３d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】１)掌握HAO细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；２)掌握HAO消化浓度，当消化液浓度过GAO时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。

细胞生长：贴壁

H2052_MM细胞类似产品：：SNU-368细胞、GBCSD细胞、WM 451-Lu细胞

Reuber-H-35 hepatoma细胞类似产品：：HCC-1588细胞、MPC5细胞、SW-527细胞

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P3-X63-Ag 8.653细胞类似产品：：NCIH1618细胞、NBLS细胞、TGW细胞

NCIH841细胞类似产品：：C33-A细胞、HARAB细胞、NCI-SNU-761细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，ZuiHAO经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

P3X63NS1细胞类似产品：：KYSE 30细胞、RSC 96细胞、VP 267细胞

SP-2细胞类似产品：：FBHE细胞、U-226AR1细胞、BNL 1ME A.7R.1细胞

HFLS-OA细胞类似产品：：HFF-1细胞、L5178-R细胞、COV 434细胞

T98-G细胞类似产品：：H-28细胞、D341 Med细胞、OV1/P细胞

HSC6细胞类似产品：：HOP 92细胞、Dami细胞、SNU620细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁

RC-4B细胞类似产品：：RIN-14B细胞、MDA468细胞、MonoMac1细胞

UMUC3细胞类似产品：：JJN3细胞、hTERT-RPE1细胞、Rat Lung-65细胞

SW480细胞类似产品：：HPAEpiC细胞、SK-LMS-1细胞、TK-1细胞

Roswell Park Memorial Institute 8402细胞类似产品：：Centre Antoine Lacassagne-39细胞、NCI-H378细胞、CAL-33细胞

hTERT-HME-1细胞类似产品：：293-EBNA细胞、HGF-1细胞、KOPN-8细胞

Ramos G6.C10细胞类似产品：：SW-579细胞、T-ALL-1细胞、MDA-MB-175VII细胞

细胞冻存的步骤：１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天ZuiHAO换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为５×１０６～１×１０７/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具体要看培养的细胞类型来选择；３)将分装上述细胞悬液于２ml冻存管中，每管０.２５ml。冻存管要将盖子盖紧，并标记HAO细胞名称和冻存日期，同时作HAO登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)；４)将装HAO细胞的冻存管放到冻存盒中，-８０℃冰箱过夜。；如果有程序降温器(放在-８０℃冰箱过夜，放入液氮罐)ZuiHAO;或者可以在４℃，２h;然后转到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，ZuiHAO取出一只冻存管细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。

细胞株(系)的使用，为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的，长期连续传代的细胞，不仅消耗大量的人力和物力，而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化，因而细胞失去原有的遗传性，有时还会由于细胞污染而造成传代中断，种子丢失。因此，在实际工作中常需冻存一定数量的细胞，以备替换使用。细胞冷冻与复苏是细胞培养 室的常规工作和通用技术。目前，细胞冻存Zui常用的技术是液氮冷冻保存法，主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。细胞在不加任何保护剂的情况下直接冷冻，细胞内外的水分会很快形成冰晶，从而引起一系列不良反应。如细胞脱水使局部电解质浓度增GAO，pH值改变，部分蛋白质由于上述原因而变性，引起细胞内部空间结构紊乱，溶酶体膜由此遭到损伤而释放出溶酶体酶，使细胞内结构成分造成破坏，线粒体肿胀，功能丢失，并造成能量代谢障碍。胞膜上的类脂蛋白复合体也易破坏引起细胞膜通透性的改变，使细胞内容物丢失。如果细胞内冰晶形成较多，随冷冻温度的降低，冰晶体积膨胀造成细胞核DNA空间构型发生不可逆的损伤，而致细胞死亡。因此，细胞冷冻技术的关键是尽可能地减少细胞内水分，减少细胞内冰晶的形成。采用甘油或二甲基亚砜作保护剂，这两种物质分子量小，溶解度大，易穿透细胞，可以使冰点下降，提GAO细胞膜对水的通透性，且对细胞无明显毒性。慢速冷冻方法又可使细胞内的水分渗出细胞外，减少胞内形成冰结晶的机会，从而减少冰晶对细胞的损伤。

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2B4细胞类似产品：：MOPC细胞、PK 15细胞、KY180细胞

SNU-398细胞类似产品：：NOZ细胞、LICR-HN-6细胞、NF639细胞

APRE-19细胞类似产品：：HuTu-80细胞、RAW2647细胞、OCI-LY-1细胞

SUIT-2细胞类似产品：：K1735细胞、GalK 1细胞、HLCL9B10细胞

HOP 62细胞类似产品：：SNU886细胞、NCI-SNU-16细胞、H-1105细胞

SKLMS1细胞类似产品：：SCLC-21H细胞、PLA 802细胞、L5178Y TK+/-3.7.2c细胞

MCF7/WT细胞类似产品：：MDAMB134VI细胞、MMAc-Serum Free细胞、C26细胞

H1876细胞类似产品：：22Rv-1细胞、Mo7e细胞、GC9811-P细胞

CCD-841CoN细胞类似产品：：HPF细胞、Tsup-1细胞、hTERT-RPE细胞

HCC-2279细胞类似产品：：HPAEC细胞、UMRC2细胞、UO31细胞

Hs870T细胞类似产品：：JG细胞、NCI-H748细胞、SK-MEL-1细胞

UMR-106细胞类似产品：：NK 10a细胞、T8细胞、HOS-TE85细胞

HuT 102细胞类似产品：：CAKI 1细胞、SW-480细胞、NG108-15细胞

C4-2B细胞类似产品：：H-II-E-C3细胞、ADR-RES细胞、MOLP-8细胞

16HBE细胞类似产品：：MC38细胞、Hs 729.T细胞、H-35 Reuber细胞

COLO 357细胞类似产品：：HCC44细胞、H2126细胞、MDA-kb2细胞

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