KYSE-520 Cells(赠送Str鉴定报告)|人食管鳞癌细胞

"KYSE-520 Cells(赠送Str鉴定报告)|人食管鳞癌细胞

细胞背景资料：食管鳞癌；女性

细胞形态：上皮细胞样

【细胞培养中细菌、霉菌的污染情况总结】细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在GAO压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象！可在培养液中加相应的抗生素处理；霉菌：培养液是清亮的，倒置显微镜下无杂质，３７度孵箱培养２-３天，仍清亮，但出现絮状杂质，镜下可见呈细丝状的团状漂浮物，可看到明显的菌丝，细胞仍可生长，但时间长之后，细胞的活力状态变差，用酸铜溶液擦拭CO２孵箱内，再把水盘里也加上饱和量的酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒二钠GAO盐液体,可以防止霉菌污染。CO２孵箱被霉菌污染后，可把所有细胞暂时转移，采用擦洗孵箱(包括隔板，箱壁)。并把放置在孵箱内一个小时，使其蒸汽弥漫。待的气味消散后，再移入细胞。孵箱应定期清洁(２月左右)，尤其在多雨的季节。其它培养箱清洗方法是：用８４液擦洗－清水擦洗－７５%酒精擦洗－紫外灯照。预防霉菌污染，可在培养基里加３u/ml的两性霉素或制霉菌素或D或双抗；但细胞一旦污染，很难挽救，制霉菌素或D或双抗都于事无补，建议舍弃该污染细胞，将环境彻底消毒，如果所有细胞都污染，可能是系统污染，检查一下培养基和器材，如果只是个别污染，可能是操作问题，就要注意操作。

细胞生长：贴壁

NCI-H1882细胞类似产品：：HOPC细胞、SEM细胞、SKCO-1细胞

HCC1954细胞类似产品：：MFE280细胞、A549-Taxol细胞、SKO3细胞

NCI-H2347细胞类似产品：：KATO III细胞、32D/cl3细胞、KAT-5细胞

LoMeT-ccRcc细胞类似产品：：RASMCs细胞、EoL-1细胞、OVCAR.5细胞

Evsa-T细胞类似产品：：PC-9S1细胞、C42细胞、NCI-H1703细胞

KYSE-520 Cells(赠送Str鉴定报告)|人食管鳞癌细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

预防细胞污染的注意事项：实验进行前，超净台用紫外灯照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超净台台面，并开启超净台风扇运转10min左右再开始实验操作。实验用品用75%酒精擦拭后才能放入超净台内；实验用品用完应移出超净台，以利于气流的流通。实验完成后用75%酒精擦拭超净台台面。每次操作只处理一种细胞；即使不同细胞使用相同的培养基也不要共享同一瓶培养基，避免细胞间的交叉污染。操作时小心取用无菌的物品，避免污染。勿碰触吸管尖头，不小心碰触后应立即更换；不要在打开的容器瓶口正上方操作，容器打开后，倾斜45°操作，操作完成后及时盖上瓶盖。CO2培养箱的清洁是较易被忽视的地方，应1-2个月对培养箱定期进行清洁消毒。先用75%酒精擦拭培养箱内壁、隔板、水盘2-3次，用双蒸水清洗，再用酒精棉球擦拭一遍，后紫外灯照射4h以上。水盘内加入无菌水（应每周更换），待培养箱内温度、湿度、CO2浓度稳定后再放入细胞。定期清洗或更换超净台过滤膜、预滤网。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

NCI-SNU-668细胞类似产品：：B16-BL6细胞、PATU-S细胞、L2细胞

hTERTHME1细胞类似产品：：SK-MEL-3细胞、PaCa2细胞、LY-R细胞

RM-1细胞类似产品：：ChaGo K-1细胞、HOP-92细胞、159PT细胞

CTX TNA2细胞类似产品：：JB-6 Cl 30细胞、USMC细胞、C-32细胞

HEK293-EBNA细胞类似产品：：Panc 2.03细胞、Hs746T细胞、U-937细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

KYSE-520 Cells(赠送Str鉴定报告)|人食管鳞癌细胞

细胞生长特性：贴壁

AML-193细胞类似产品：：SNU878细胞、KYSE 30细胞、Kelly细胞

G292细胞类似产品：：Nb 2细胞、HS940细胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate细胞

OEC19细胞类似产品：：TE671细胞、PE/CA-PJ34细胞、Mia PACA 2细胞

H283细胞类似产品：：U266 Bl细胞、beta TC6细胞、Gerner 7666细胞

HT-1080细胞类似产品：：AMJ2C8细胞、Capan-2细胞、U266细胞

L363细胞类似产品：：alpha-TC1-6细胞、H1568细胞、S180细胞

如何进行细胞复苏：１)从液氮容器中取出冻存管，直接浸入３７℃温水中，并不时摇动令其尽快融化；２)从３７℃水浴中取出冻存管，打开盖子，用吸管吸出细胞悬液，加到离心管并滴加１０倍以上培养液，混匀；３)离心，１０００rpm，５min；４)弃去上清液，加入含１０%小牛血清培养液重悬细胞，计数，调整细胞密度，接种培养瓶，３７℃培养箱静置培养；５)次日更换一次培养液，继续培养。【温馨提醒】１)从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存，但ZuiHAO为对数生长期细胞。在冻存前一天ZuiHAO换一次培养液；２)将冻存管放入液氮容器或从中取出时，要做HAO防护工作(戴棉手套)，以免冻伤；３)冻存和复苏ZuiHAO用新配制的培养液。细胞复苏的时候，有些初次实验员将冻存管从液氮中取出后，放在室温下，经常发生冻存管爆炸，该怎么避免出现这种情况吗？其中在拧紧冻存管的时候是否有哪些细节要注意的？一般常用的方法是取出冻存管后在超净工作台中用酒精棉球擦试管口，再稍拧松盖子，再放３７度水浴锅中摇溶，在将细胞转移到装有３７度预热过的培养基的试管中，迅速离心，再用培养基洗一遍。

细胞冻存复苏材料与方法步骤：常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器，规格有３５L和５０L两种。使用时要注意以下几点：(１)一般两周需充液氮一次，至少一个月充氮一次。液氮温度达-１９６℃，使用时注意勿让液氮溅到皮肤上，以免引起冻伤。(２)液氮容器为双层结构，中间为真空层，瓶口有双层焊接处，应防止焊接部裂开。(３)在装入液氮时，要注意缓慢小心，并用厚纸卷筒或制漏斗作引导，使液氮直达瓶底，如有专用液氮灌注装置则更HAO。若为初次使用，加液氮时更要缓慢，以免温度骤降而使容器损坏。细胞冻存时常备的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培养液，DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(１２１°C蒸气GAO压消毒)，２mL安瓿(或专用细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天ZuiHAO换液。将多个培养瓶中的细胞培养 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０６～１×１０７/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记HAO细胞名称和冻存日期，同时作HAO登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装HAO细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，Zui后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，ZuiHAO取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。

Vero-76细胞类似产品：：Jurkat Clone E6-1细胞、KMS26细胞、NCIH1694细胞

NCI-H187细胞类似产品：：RCK8细胞、Y 1细胞、HEK-293H细胞

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TE4细胞类似产品：：RKO_AS45细胞、SNB-19细胞、BrCL18细胞

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RINm5F细胞类似产品：：AMO1细胞、U138MG细胞、SKHEP-1细胞

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786-O RCC细胞类似产品：：SMA 560细胞、Murine Carcinoma-38细胞、VK2/E6E7细胞

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IPEC1细胞类似产品：：SKNBE2C细胞、hFOB细胞、Mel526细胞

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769P细胞类似产品：：AHH1细胞、AU-565细胞、H-1770细胞

HCC-1438细胞类似产品：：LN229细胞、PA I细胞、BpRcl细胞

CTV-1细胞类似产品：：P3/NS1/Ag4-1细胞、T-98G细胞、FLS细胞

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PG-BE1细胞类似产品：：H-1792细胞、SUPT-1细胞、H510A细胞

AE1201细胞类似产品：：COLO 357细胞、WM-266-mel细胞、MM1S细胞

HFB细胞类似产品：：SNU484细胞、SUSM-1细胞、BA/F3细胞

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GT38细胞类似产品：：TOG细胞、CoCL3细胞、Mv 1 Lu细胞

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HRIF细胞类似产品：：CV-1细胞、Madin-Darby Bovine Kidney细胞、MCF-10A细胞

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