YTMLC-90 Cells(赠送Str鉴定报告)|人肺鳞癌细胞

"YTMLC-90 Cells(赠送Str鉴定报告)|人肺鳞癌细胞

细胞背景资料：肺鳞癌；男性

细胞形态：上皮细胞样

【细胞培养中原虫的污染情况总结】原虫：培养液可轻微浑浊，显微镜下那些细小的点状物数量非常多，轻微活动，细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢，而且细胞状态不HAO，边缘不清楚，细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的，但他们的数量小，细胞站YOU势所以不会影响到细胞的正常生长，只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长，Zui终形成恶性循环。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等关于培养基的无菌状况，取培养基至培养瓶中(不加细胞)，３７度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长就是操作的问题。也可以在培养基中事先加入双抗(酸链霉素和苄青霉素)。但双抗有时会影响细胞的状态，所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗，以避免影响实验结果。１)孵箱应定期用三氧机消毒或者紫外光照射，并用酒精和新洁尔灭试擦孵箱同时孵箱内的水应是三蒸水；２)超净台\取材\器材\培养液\培养瓶\操作等因素；３)超净台的风机不能过大，风机到６-８格。否则也可能能致霉菌污染；４)无菌室经甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的喷洒中和，约几小时即可进入操作。

细胞生长：贴壁

Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4细胞类似产品：：MDA-MB361细胞、SW-837细胞、Cloudman M3细胞

RGC5细胞类似产品：：HeLa.S3细胞、L- cell细胞、SW839细胞

SNU620细胞类似产品：：NCI-H196细胞、NCI-H1838细胞、DU-145细胞

HGC-27细胞类似产品：：FLS细胞、H510细胞、Roswell Park Memorial Institute 7951细胞

HL-60 Clone 15细胞类似产品：：HHUA细胞、Roswell Park Memorial Institute 7666细胞、TE-6细胞

YTMLC-90 Cells(赠送Str鉴定报告)|人肺鳞癌细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，ZuiHAO经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

HGC-27细胞类似产品：：FLS细胞、H510细胞、Roswell Park Memorial Institute 7951细胞

LM-TK-细胞类似产品：：RPTC细胞、ID8细胞、GC-2spd(ts)细胞

293F细胞类似产品：：NCIH1876细胞、T_T_细胞、MV4;11细胞

OV1063细胞类似产品：：KYSE-30细胞、Colon38细胞、KMS-18细胞

COR L279细胞类似产品：：LAN-1细胞、BLO 11细胞、MDA-157细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁

D-341细胞类似产品：：NHA细胞、COLO684细胞、BE2-M17细胞

Mono-Mac-6细胞类似产品：：KP-N-NS细胞、OSA细胞、P 815细胞

32D clone 3细胞类似产品：：A875细胞、MDA231-LM2细胞、N-9细胞

F81细胞类似产品：：UPCI-SCC-90细胞、Natural Killer-92细胞、BHK21细胞

NCI-H1882细胞类似产品：：HOPC细胞、SEM细胞、SKCO-1细胞

NCI-SNU-C1细胞类似产品：：SH-SY5Y细胞、HeLa S3细胞、PC-9/GR细胞

细胞接收后的操作流程与注意事项：１)如果细胞为贴壁细胞，而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态，请将悬浮的细胞即时离心，加１５%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养３天；同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为１５%血清的完全培养基培养３天。３天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡，请及时联系实验室技术人员会跟进解决；２)贴壁细胞生长缓慢；适当提GAO血清浓度(ZuiGAO不能超过２０%)，或可根据该细胞生长密度，考虑胰酶消化后，转移到新的培养瓶继续培养；３)生长不均：贴壁细胞若出现分布不均，成岛状生长，可将细胞进行消化，重悬打散细胞，加入新鲜培养基进行培养。

细胞冻存复苏材料与方法步骤：常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器，规格有３５L和５０L两种。使用时要注意以下几点：(１)一般两周需充液氮一次，至少一个月充氮一次。液氮温度达-１９６℃，使用时注意勿让液氮溅到皮肤上，以免引起冻伤。(２)液氮容器为双层结构，中间为真空层，瓶口有双层焊接处，应防止焊接部裂开。(３)在装入液氮时，要注意缓慢小心，并用厚纸卷筒或制漏斗作引导，使液氮直达瓶底，如有专用液氮灌注装置则更HAO。若为初次使用，加液氮时更要缓慢，以免温度骤降而使容器损坏。细胞冻存时常备的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培养液，DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(１２１°C蒸气GAO压消毒)，２mL安瓿(或专用细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天ZuiHAO换液。将多个培养瓶中的细胞培养 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０６～１×１０７/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记HAO细胞名称和冻存日期，同时作HAO登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装HAO细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，Zui后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，ZuiHAO取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。

U266B1细胞类似产品：：OV433细胞、EO771细胞、OV1063细胞

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T9细胞类似产品：：PLA801D细胞、CWR22-R1细胞、NCIH250细胞

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NCI-H2106细胞类似产品：：Institute for Medical Research-32细胞、SK-OV-433细胞、VMM-5A细胞

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KOSC2细胞类似产品：：TALL-104细胞、SU-DHL2细胞、HGF-1细胞

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PY8119细胞类似产品：：Lu-165细胞、LN382细胞、BC-022细胞

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8226细胞类似产品：：HCT-15细胞、H-1930细胞、NCI H295R细胞

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TM3细胞类似产品：：HRCEC细胞、NS653细胞、HSC-1细胞

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CV-1.K细胞类似产品：：OVMANA细胞、Ku812F细胞、RH8994细胞

Mevo细胞类似产品：：Sci-1细胞、BxPC-3细胞、MDA2B细胞

OK-WT细胞类似产品：：BBE细胞、AML-193细胞、PLA-801C细胞

LC-1-sq细胞类似产品：：RH35细胞、P30OHK细胞、Panc_03_27细胞

EPC细胞类似产品：：M059J细胞、SPCA1细胞、HCC1419细胞

CCD18Co细胞类似产品：：HLE B-3细胞、NCI-H1385细胞、HBL 100细胞

H-510细胞类似产品：：LC-2 ad细胞、FHL124细胞、SK-BR3细胞

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U 937细胞类似产品：：EAHY-926细胞、H-2023细胞、HEK-AD293细胞

H283细胞类似产品：：U266 Bl细胞、SNU-449细胞、HeLa S 3细胞

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