RMC Cells(赠送Str鉴定报告)|大鼠肾系膜细胞

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细胞背景资料：肾系膜

细胞形态：上皮细胞样

传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些殊的细胞和分化征。传代细胞形成细胞株的Zui大利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。【操作步骤】１)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；２)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；３)置３７℃孵箱或室温(２５℃温度)下进行消化，２~５min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；５)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；６)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO２培养箱中进行培养；７)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般２～３d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】１)掌握HAO细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；２)掌握HAO消化浓度，当消化液浓度过GAO时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。

细胞生长：贴壁

TE671细胞类似产品：：AU-Mel细胞、SK.MEL.28细胞、Y3.AG.1.2.3细胞

Hs27细胞类似产品：：K299细胞、OS-732细胞、HCC-44细胞

253J B-V细胞类似产品：：MNNG/HOS Cl #5细胞、HEC-1A细胞、H838细胞

SKG IIIa细胞类似产品：：HS578T细胞、NIH:OVCAR-3细胞、WEHI 3细胞

THP 1细胞类似产品：：HUT-226细胞、C2C12细胞、KMS-26细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

悬浮细胞不容易转染：悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞GAO出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次，脂质体试剂的毒性较大，这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外，悬浮细胞不易培养，易死亡，也给细胞转染造成了一定的困难。为了提GAO悬浮细胞的转染效率，可以使用非脂质体的转染试剂，如纳米材料的。也可以使用电转染方法，针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的，电击对细胞有一定的损伤，ZuiHAO选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂，可以将电击对细胞的伤害降到Zui低，悬浮细胞不易转染，选对试剂及良HAO的细胞培养环境才是关键。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

PLA-801D细胞类似产品：：THP1细胞、PMVEC细胞、NCIH64细胞

MDA231-LM2细胞类似产品：：NCI H716细胞、MA-782细胞、Reuber H-35细胞

HEK 293-H细胞类似产品：：Hs870T细胞、KYSE510细胞、PLA801-95C细胞

NUGC2细胞类似产品：：SuDHL 1细胞、GM05887A细胞、P3/X63/Ag8.653细胞

MDA-330细胞类似产品：：SPC-A-1细胞、H87细胞、10RGB细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁

NCI H929细胞类似产品：：SUM 159细胞、J82COT细胞、CCRF-CEM细胞

MB49细胞类似产品：：HOC细胞、SF-763细胞、Mhh-Call 2细胞

BCaP 37细胞类似产品：：LA-N-1细胞、PC615.3细胞、AG06814-N细胞

HT-22细胞类似产品：：HCC 70细胞、Lewis lung carcinoma line 1细胞、Walker 256细胞

Madison lung细胞类似产品：：WEHI-279细胞、CFPAC-1细胞、K 562细胞

Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8细胞类似产品：：L 540细胞、RMC细胞、P3-X63-Ag8-653细胞

为什么培养的细胞要及时传代？体外培养的细胞大多具有生长接触抑制的性，也就是说当一个细胞被其他细胞包围的时候，它就会停止生长，及时传代后，细胞的生长得以继续。培养细胞生长减慢的原因在哪些?其解决办法有哪些？可能的原因有：更换了不同的培养液或血清；培养液中一些细胞生长必需成分如谷眈肢或生长因子等耗尽或缺乏或己被破坏；培养物中有少量细菌或真菌污染；试剂保存不当；比较新培养液与原培养液成分，比较新血清与旧血清等，找出其它可能的原因。解决办法：增加起始培养细胞浓度；让细胞逐渐适应新培养液；换入新鲜配制培养液；补加谷酷肢或生长因子等；用无抗生素培养液培养，如发现污染，去弃培养物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培养液需在２-８℃避光保存;含血清完全培养液在２-８℃保存，并在２周内用完;分离培养物，检测支原体。冷冻管应如何解冻？取出冷冻管后，须立即放入３７℃水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在１-２分钟内大部分融化，别注意，需残留一小块冰块，就可拿到超净工作台操作细胞，用７５%酒精消毒冻存管，用新鲜培养基将细胞转移至培养瓶。另外冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管爆裂。

贴壁消化难题：１，先用PBS 把细胞洗两遍，使瓶内没有血清了，减少对胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在细胞有些消化下来时，拿着瓶口，运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体，这样细胞很快就下来了，还不需要吹打，分散也均匀；２，成团、絮状：消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象，血清可以终止胰酶的作用，如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清终止，如果消化液中加入了edta的话，就要将消化液倒干净，如果细胞贴壁要求不是很严格的话，一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基，加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性Zui强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势)，随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验，则不能弃去胰酶)，加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代，否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片)；消化过度：马上用培养基中和，用吸管吹打细胞，收集全部的细胞到以无菌的离心管中８００RPM ３分钟。弃上清，用全培重悬，换新的培养瓶继续培养，状态不HAO的细胞在培养的过程中会死亡脱落，在换液的时候可以清除掉！

B16 F10细胞类似产品：：A-704细胞、253JBV细胞、LNCaP subline C4-2细胞

Panc 8.13细胞类似产品：：BC-3H-1细胞、TOV-112D细胞、Medical Research Council cell strain-5细胞

HM1900细胞类似产品：：Hs 636.T细胞、RFL6细胞、Immortal Pig Intestinal-2I细胞

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LM2-4175细胞类似产品：：Spodoptera frugiperda clone 9细胞、MHCC97细胞、T-98G细胞

HGF-1细胞类似产品：：PAN 02细胞、SNU-869细胞、JIMT-1细胞

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A-101D细胞类似产品：：OCI/AML-3细胞、FRTL-5 Cl 2细胞、TE-15细胞

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H2126细胞类似产品：：AMC-HN-8细胞、NCI-HUT-520细胞、K562/ADP细胞

Normal Rat Kidney细胞类似产品：：526 mel细胞、HVSMC细胞、Hepa-RG细胞

SUPT-1细胞类似产品：：RIN14B细胞、Hs852T细胞、Cates 1B细胞

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CWR-22rv1细胞类似产品：：H-929细胞、Hs 606细胞、DF-1细胞

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DU-145细胞类似产品：：HRGEC细胞、Human Pancreatic Duct Epithelial细胞、Hx-147细胞

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3T3 J2细胞类似产品：：Henrietta Lacks cells细胞、RPMI 8402细胞、G-401细胞

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BT483细胞类似产品：：SN-12C细胞、RPMI8226/S细胞、NCI-H1648细胞

RMC Cells(赠送Str鉴定报告)|大鼠肾系膜细胞

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HT 1197.T细胞类似产品：：RBSMC细胞、RMS 13细胞、KNS-42细胞

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P3-X63Ag8细胞类似产品：：HCC 2185细胞、Reuber H35细胞、H460细胞

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BC-009细胞类似产品：：MCF-7细胞、L-540细胞、Pt-K1细胞

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NCI-H1781细胞类似产品：：253JBV细胞、NHEK细胞、ESC-410细胞

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SUDHL4细胞类似产品：：3T3-Swiss albino细胞、MPC-11细胞、GM0637细胞

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GA-10 (Clone 4)细胞类似产品：：JM细胞、CEM细胞、KMY1022细胞

HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]细胞类似产品：：Y3M细胞、HPAF2细胞、MLM细胞

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HEY A8细胞类似产品：：ME-180细胞、H-2198细胞、CMK细胞

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OVCA 432细胞类似产品：：YES2细胞、NT-2细胞、HOC细胞

IAR-20细胞类似产品：：LM1细胞、VA-ES-BJ细胞、BE(2)-M17细胞

SW-620细胞类似产品：：COR-L51细胞、CHO/dhFr-细胞、SW1088细胞

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NCI/ADRRES细胞类似产品：：118 MG细胞、WiDr/S细胞、ACCM细胞

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SUM-52PE细胞类似产品：：GM01232E细胞、LLC-PK1细胞、U-226AR1细胞

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RIN Cl-5F细胞类似产品：：SNB19细胞、HCC9204细胞、GM15452细胞

MDA175细胞类似产品：：SK-MEL28细胞、HN6细胞、MDA-MB-435细胞

AHH1细胞类似产品：：GOTO细胞、DKMG细胞、NCI-HUT-596细胞

OUMS-23细胞类似产品：：210RCY3-Ag1.2.3细胞、SF 763细胞、COLO206F细胞

Raji细胞类似产品：：VAESBJ细胞、Hs737T细胞、HGC-27细胞

SK-ML2细胞类似产品：：COR L279细胞、Sp2/0-Ag14细胞、J 111细胞

My-La 2059细胞类似产品：：U-266 AR1细胞、H345细胞、MIMVEC细胞

NCIH2171细胞类似产品：：CAL-148细胞、NCI-H2073细胞、LICR-LON-HN6细胞

WM115mel细胞类似产品：：Panc203细胞、HTori-3.1细胞、UCLA RO-81A-1细胞

NCI-SNU-16细胞类似产品：：IHH细胞、C6细胞、PSN-1细胞

GM00637I细胞类似产品：：NCIH292细胞、CAL 62细胞、SW-527细胞

HM06.A1细胞类似产品：：NCI-H847细胞、Sp2/0细胞、P31/FUJ细胞

COV434细胞类似产品：：MDA-MB-175VII细胞、MPP 89细胞、SKNBE-1细胞

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