RIN-14B Cells(赠送Str鉴定报告)|大鼠胰岛素瘤细胞

"RIN-14B Cells(赠送Str鉴定报告)|大鼠胰岛素瘤细胞

细胞背景资料：胰岛素瘤；雄性；NEDH

细胞形态：上皮细胞样

体内细胞培养及其操作步骤：【瘤细胞悬液接种】１)无菌选取生长良HAO(有光泽，淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞；２)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨，经８０～１００目筛网过滤成细胞悬液；３)培养细胞应用PBS洗两遍；４)计数并调整细胞浓度至１０７～１０８／ml；５)常规消毒后，于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(０.１ml／部位，＞１０６细胞)。初次接种成功率低，细胞数尽可能多一些；６)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期，以后随着传代潜伏期逐渐缩短，Zui后固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤细胞，将这种腹水反复传代，即可成为腹水瘤。初次传代时，腹水常呈血性(含大量红细胞)，反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。１)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤，进行细胞计数；２)消毒动物，左下腹穿刺接种１０６腹水瘤细胞；３)接种腹水瘤细胞后约７~１２d，待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９号针头抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水经３０００rpm离心１５min，收集上清，分装冻存备用。

细胞生长：贴壁

HPASMC细胞类似产品：：SW780细胞、Hs-600-T细胞、PAMC82细胞

HRA 19细胞类似产品：：Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative细胞、NCI-H2444细胞、L02细胞

SAOS 2细胞类似产品：：EO771细胞、SU.86细胞、Toledo细胞

H2135细胞类似产品：：HCC-1143细胞、Pa14C细胞、OCI-Ly19细胞

MONO-MAC 6细胞类似产品：：H-2135细胞、P30/OHK细胞、EOC 20细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

预防细胞污染的注意事项：实验进行前，超净台用紫外灯照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超净台台面，并开启超净台风扇运转10min左右再开始实验操作。实验用品用75%酒精擦拭后才能放入超净台内；实验用品用完应移出超净台，以利于气流的流通。实验完成后用75%酒精擦拭超净台台面。每次操作只处理一种细胞；即使不同细胞使用相同的培养基也不要共享同一瓶培养基，避免细胞间的交叉污染。操作时小心取用无菌的物品，避免污染。勿碰触吸管尖头，不小心碰触后应立即更换；不要在打开的容器瓶口正上方操作，容器打开后，倾斜45°操作，操作完成后及时盖上瓶盖。CO2培养箱的清洁是较易被忽视的地方，应1-2个月对培养箱定期进行清洁消毒。先用75%酒精擦拭培养箱内壁、隔板、水盘2-3次，用双蒸水清洗，再用酒精棉球擦拭一遍，后紫外灯照射4h以上。水盘内加入无菌水（应每周更换），待培养箱内温度、湿度、CO2浓度稳定后再放入细胞。定期清洗或更换超净台过滤膜、预滤网。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

SKLU01细胞类似产品：：WM 239细胞、MM-1S细胞、ATDC-5细胞

Hu-P-T4细胞类似产品：：COV362细胞、697细胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3细胞

COLO829细胞类似产品：：HS-695T细胞、L-02细胞、H341细胞

Bovine Turbinate细胞类似产品：：MARC-145细胞、TCC-PAN2细胞、RPMI-1846细胞

HS-294细胞类似产品：：KPL-4细胞、RIN-m5F细胞、Huh 7.5细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁

SKMES-1细胞类似产品：：PCI-04B细胞、MDBK细胞、GES1细胞

Madin-Darby Bovine Kidney细胞类似产品：：C3H/10T1/2细胞、WM 239-A细胞、U-266 AR1细胞

SK Mel28细胞类似产品：：USMC细胞、KU 812F细胞、RWPE-2细胞

PK136细胞类似产品：：NFS60细胞、Vero-76细胞、Institute for Medical Research-90细胞

NBL-3细胞类似产品：：RL952细胞、H-2085细胞、WSUDLCL2细胞

WiDr细胞类似产品：：HPAF细胞、TOV-112细胞、L cell细胞

为什么培养的细胞要及时传代？体外培养的细胞大多具有生长接触抑制的性，也就是说当一个细胞被其他细胞包围的时候，它就会停止生长，及时传代后，细胞的生长得以继续。培养细胞生长减慢的原因在哪些?其解决办法有哪些？可能的原因有：更换了不同的培养液或血清；培养液中一些细胞生长必需成分如谷眈肢或生长因子等耗尽或缺乏或己被破坏；培养物中有少量细菌或真菌污染；试剂保存不当；比较新培养液与原培养液成分，比较新血清与旧血清等，找出其它可能的原因。解决办法：增加起始培养细胞浓度；让细胞逐渐适应新培养液；换入新鲜配制培养液；补加谷酷肢或生长因子等；用无抗生素培养液培养，如发现污染，去弃培养物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培养液需在２-８℃避光保存;含血清完全培养液在２-８℃保存，并在２周内用完;分离培养物，检测支原体。冷冻管应如何解冻？取出冷冻管后，须立即放入３７℃水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在１-２分钟内大部分融化，别注意，需残留一小块冰块，就可拿到超净工作台操作细胞，用７５%酒精消毒冻存管，用新鲜培养基将细胞转移至培养瓶。另外冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管爆裂。

细胞冻存复苏材料与方法步骤：常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器，规格有３５L和５０L两种。使用时要注意以下几点：(１)一般两周需充液氮一次，至少一个月充氮一次。液氮温度达-１９６℃，使用时注意勿让液氮溅到皮肤上，以免引起冻伤。(２)液氮容器为双层结构，中间为真空层，瓶口有双层焊接处，应防止焊接部裂开。(３)在装入液氮时，要注意缓慢小心，并用厚纸卷筒或制漏斗作引导，使液氮直达瓶底，如有专用液氮灌注装置则更HAO。若为初次使用，加液氮时更要缓慢，以免温度骤降而使容器损坏。细胞冻存时常备的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培养液，DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(１２１°C蒸气GAO压消毒)，２mL安瓿(或专用细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天ZuiHAO换液。将多个培养瓶中的细胞培养 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０６～１×１０７/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记HAO细胞名称和冻存日期，同时作HAO登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装HAO细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，Zui后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，ZuiHAO取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。

SUD6细胞类似产品：：NCI-H1623细胞、RCS细胞、Walker-256-TC细胞

NBL-2细胞类似产品：：NPC-039细胞、Farage Original Line细胞、EFM192B细胞

SP2/0 Ag-14细胞类似产品：：Cloudman S91 melanoma细胞、KTA7细胞、Psi-2-DAP细胞

TCC-PAN2细胞类似产品：：Suzhou Human Glioma-44细胞、LMH细胞、IOSE-Van细胞

ASH3细胞类似产品：：University of Michigan-Renal Carcinoma-2细胞、MM1细胞、NCTC-929细胞

D283 Med细胞类似产品：：253JB-V细胞、L 428细胞、BC3H1细胞

CAMA-1细胞类似产品：：Human Microglia Clone 3细胞、PC3M-IE8细胞、WERI细胞

HuH7细胞类似产品：：CAL-120细胞、MeT 5A细胞、M 1细胞

TE12细胞类似产品：：UMNSAH/DF#1细胞、Rat podocyte细胞、OCI-Ly 1细胞

H-1184细胞类似产品：：MES23.5细胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15细胞、MH-22a细胞

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MEC1细胞类似产品：：J 111细胞、Rat Chondrosarcoma Swarm细胞、SK Col 1细胞

174xCEM.T2细胞类似产品：：NCI-H446细胞、GA10细胞、H-460细胞

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KMS11细胞类似产品：：B 95-8细胞、HCA-7细胞、RBMEC细胞

Hut292细胞类似产品：：H650细胞、GM3569细胞、H-841细胞

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HCC-1954BL细胞类似产品：：Walker256-TC细胞、WSUDLCL2细胞、MEF细胞

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MDA.MB.231细胞类似产品：：PANC 203细胞、VP267细胞、KY70细胞

RIN-14B Cells(赠送Str鉴定报告)|大鼠胰岛素瘤细胞

CWR22R细胞类似产品：：EAhy926细胞、A72细胞、SK_N_BE2C细胞

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Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8细胞类似产品：：L 540细胞、RMC细胞、P3-X63-Ag8-653细胞

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GM2132细胞类似产品：：CCD 841 CoTr细胞、H2347细胞、WEHI-3细胞

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Los Angeles Prostate Cancer-4细胞类似产品：：SF295细胞、HKBML细胞、HRVEC细胞

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细胞、Colo741细胞、D10G41细胞

NPA 87细胞类似产品：：L-6TG细胞、32Dcl3细胞、Swiss 3T3细胞

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WB F344细胞类似产品：：T-HSC细胞、LS-174T细胞、RPMI8226/S细胞

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CAL 78细胞类似产品：：SNU-387细胞、U138-MG细胞、MB49细胞

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3T6 Swiss Albino细胞类似产品：：D283-MED细胞、NCI H23细胞、TI-73细胞

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U 937细胞类似产品：：EAHY-926细胞、N1S1细胞、HBdSMC细胞

B16-F1细胞类似产品：：Huh7.5.1细胞、PAN 02细胞、143B TK-细胞

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CD 18细胞类似产品：：KU1919细胞、Earle's L cells细胞、HR-8348细胞

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RIN-14B Cells(赠送Str鉴定报告)|大鼠胰岛素瘤细胞

HN 4细胞类似产品：：NTERA2细胞、EFM-192A细胞、NCI-H1915细胞

B-104细胞类似产品：：COLO-320DM细胞、SaOS细胞、RMS 13细胞

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