Tu 177 Cells(赠送Str鉴定报告)|人喉鳞癌细胞

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细胞背景资料：喉鳞癌

细胞形态：上皮细胞样

解冻细胞出现大量细胞碎片的可能原因及推荐解决方案如下：１)冷冻时细胞密度过低：推荐的解决方案：缩短解冻过程中的时间。将细胞取出后，立即将冻存管浸入在３７℃的水浴中，并震荡至全部融化，然后迅速地转移到预热的培养基中；２)不适当的冷冻过程：推荐的解决方案：解冻不同冷冻室总的试管。确保在冻存过程中采用的适当的技术，并确保使用了适量和适合的冷冻液。出现生长缓慢的可能原因及推荐解决方案如下：１)培养瓶的大小：一般解决方案是一些细胞在培养基中倾向于维持一定的密度。将培养物转移到较小的培养瓶中，使细胞密度上升；如，根据培养基的体积，从T７５培养瓶转移到２或３个T２５培养瓶中；２)细胞密度过低：通常解决方案是提GAO未来冷冻物种细胞的冻存密度，或使用较小的培养容器，或解冻多个试管来进行培养。

细胞生长：贴壁

TFK-1细胞类似产品：：PNT1A细胞、MES-SA-Dx5细胞、MDA PCa 2b细胞

SkChA-1细胞类似产品：：CMT93细胞、Human ErythroLeukemia细胞、H-211细胞

P3JHR-1细胞类似产品：：SV40-MES13细胞、NCI-H920细胞、SKNBE细胞

H-1435细胞类似产品：：YD15细胞、H-2135细胞、OCI/AML2细胞

Hs 294T细胞类似产品：：NTERA-2 clone D1细胞、OVCAR.5细胞、CHL细胞

Tu 177 Cells(赠送Str鉴定报告)|人喉鳞癌细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞培养过程中，总是会出现各种意想不到的问题，一不留神就会全盘皆输。所谓细胞虐我千百遍，我待细胞如初恋。下面是贴壁细胞的保藏方法，希望对细胞培养初学操作者有所帮助：1)观察细胞状态：贴壁细胞密度达到85-90%，即可以细胞冻存形式进行保藏，拍照，记录细胞状态；2)细胞清洗：培养皿表面消毒后，转移至生物安全柜中，去除培养皿中培养液，加入12mlPBS，轻轻摇晃培养皿清洗细胞，随后吸除PBS清洗液；3)细胞消化：将2ml胰酶加入培养皿中，完全覆盖细胞，置于显微镜下观察（期间禁止摇晃培养皿），当细胞刚开始脱落时，立即转移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余约0.5ml胰酶，转移至培养箱内继续消化，每30秒肉眼观察细胞状态，至细胞成流沙状完全脱落，转移至生物安全柜中，加入12ml完全培养基，终止消化；4)细胞离心：将终止消化后的细胞悬液吹打均匀，吸取至15ml离心管中，1000r/min（110g），离心3min；5)细胞冻存：离心后去除细胞上清液，按照冻存细胞量5*10^5/ml，吸取冻存液重悬细胞沉淀，吹打均匀后分装至相应的冻存管中，进行冻存；6)细胞保藏：冻存管做HAO标记，放至程序降温盒中，于4℃冰箱放置30min，转移至-80℃超低温冰箱过夜，将过夜后的冻存细胞转移至液氮中保藏。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

GalK 1细胞类似产品：：Homo sapiens No. 578, breast cells细胞、HEB细胞、WiDr细胞

Pt-K1细胞类似产品：：HCC0070细胞、Kasumi-6细胞、NCI-H1373细胞

Neuro 2a细胞类似产品：：A10细胞、HCC-95细胞、OLN 93细胞

HCC-2279细胞类似产品：：HPAEC细胞、UMRC2细胞、UO31细胞

DMS53细胞类似产品：：Ca-Ski细胞、L428细胞、H1836细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

Tu 177 Cells(赠送Str鉴定报告)|人喉鳞癌细胞

细胞生长特性：贴壁

SKNBE(1)细胞类似产品：：WERI-Rb 1细胞、HCC-1588细胞、NBL_S细胞

U266BL细胞类似产品：：HP615细胞、RMG1细胞、NOZ细胞

P3X63Ag8653细胞类似产品：：A704细胞、CHO cell clone K1细胞、HEC-1B细胞

H-676细胞类似产品：：X63-Ag 8.6.5.3细胞、Hs742T细胞、H1238细胞

NB4细胞类似产品：：Hep G2细胞、H524细胞、COR-L105细胞

HUT-125细胞类似产品：：HEL-92_1_7细胞、hTERT-RPE-1细胞、VeroE6细胞

细胞冻存的步骤：１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天ZuiHAO换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为５×１０６～１×１０７/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具体要看培养的细胞类型来选择；３)将分装上述细胞悬液于２ml冻存管中，每管０.２５ml。冻存管要将盖子盖紧，并标记HAO细胞名称和冻存日期，同时作HAO登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)；４)将装HAO细胞的冻存管放到冻存盒中，-８０℃冰箱过夜。；如果有程序降温器(放在-８０℃冰箱过夜，放入液氮罐)ZuiHAO;或者可以在４℃，２h;然后转到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，ZuiHAO取出一只冻存管细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。

细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加GAO浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液HAO不HAO，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不HAO。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝Zui后换课题，这个见得太多了，别不当会事。

K7M2细胞类似产品：：GM03569D细胞、Pro-Lec1.3C细胞、NCI-H1092细胞

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X63Ag8-653细胞类似产品：：HCMEC(BL12-H)细胞、HCCLM3细胞、GNM细胞

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JF305细胞类似产品：：HT115细胞、HT22细胞、HTh74细胞

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Jurkat细胞类似产品：：Pt-K1细胞、ACC2细胞、mRMEC细胞

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C3H10T1/2 clone8细胞类似产品：：COS-1细胞、MCF10A细胞、NCIH322细胞

B-cell with DC Morphology细胞类似产品：：SCL2细胞、Caco-2/ATCC细胞、CA46细胞

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H2405细胞类似产品：：BALL-1细胞、C3H/10T1/2 CL8细胞、P3 NS1 Ag4细胞

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MKN-1细胞类似产品：：SNB-19细胞、SUM-159-PT细胞、HDLM-2细胞

OCI/AML-4细胞类似产品：：IGR.OV1细胞、PTK 2细胞、COLO 16细胞

EOL1细胞类似产品：：H-2126细胞、NCI-SNU-475细胞、CMT.64细胞

SF-126细胞类似产品：：HGSMC细胞、OCIAML2细胞、Lu-99A细胞

HES [Human embryonic skin fibroblast]细胞类似产品：：QSG7701细胞、HOP62细胞、THPI细胞

B16 melanoma F10细胞类似产品：：NCIH69细胞、OKT3细胞、EFO-27细胞

CLONE M3细胞类似产品：：P3-X63-Ag 8.653细胞、A3细胞、HPAF-II细胞

MFM-223细胞类似产品：：SKLU-1细胞、KM12-SM细胞、P3X63Ag8-6-5-3细胞

bEnd3细胞类似产品：：OCI-LY-7细胞、H1792细胞、Hs729细胞

Tsup-1细胞类似产品：：CCFSTTG1细胞、LL/2(LLc1)细胞、RMS 13细胞

SCCVII细胞类似产品：：U-373MG ATCC细胞、HS 683T细胞、RH35细胞

CV-1 in Origin Simian-7细胞类似产品：：J774.A1细胞、HO-8910细胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative细胞

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