INS-1E Cells(赠送Str鉴定报告)|大鼠胰岛素瘤细胞

"INS-1E Cells(赠送Str鉴定报告)|大鼠胰岛素瘤细胞

细胞背景资料：胰岛素瘤；NEDH

细胞形态：上皮细胞样

传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些殊的细胞和分化征。传代细胞形成细胞株的Zui大利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。【操作步骤】１)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；２)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；３)置３７℃孵箱或室温(２５℃温度)下进行消化，２~５min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；５)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；６)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO２培养箱中进行培养；７)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般２～３d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】１)掌握HAO细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；２)掌握HAO消化浓度，当消化液浓度过GAO时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。

细胞生长：贴壁

H-226细胞类似产品：：RSC96细胞、CAL 62细胞、NCI-H28细胞

H-1930细胞类似产品：：PaCa2细胞、HS-294-T细胞、253J-BV细胞

HET-1A细胞类似产品：：GM3190细胞、Caco2-BBE细胞、LX-2细胞

WEHI 164细胞类似产品：：HFLS-OA细胞、H-250细胞、Neuro-2a细胞

Nakata-1细胞类似产品：：H2172细胞、JVM-2细胞、NCIADRRES细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，ZuiHAO经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

PG-4 S+L-细胞类似产品：：PLMVEC细胞、SW-780细胞、HSC-3细胞

MBMEC细胞类似产品：：CNLMG-B5537SKIN细胞、alphaTC1 Clone 6细胞、UPCI:SCC90细胞

32D-Cl3细胞类似产品：：FT-293细胞、Co 115细胞、H1581细胞

JHH2细胞类似产品：：DMS 153细胞、KCL22细胞、675T细胞

BEND细胞类似产品：：SJ-Rh 30细胞、HBMEC细胞、MOLP-2细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

INS-1E Cells(赠送Str鉴定报告)|大鼠胰岛素瘤细胞

细胞生长特性：贴壁

EC-GI细胞类似产品：：MV-3细胞、PK13细胞、293-GP细胞

GM00637B细胞类似产品：：Neukoplast细胞、L-M(TK-)细胞、alphaTC1 Clone 6细胞

LM2-4175细胞类似产品：：Spodoptera frugiperda clone 9细胞、MHCC97细胞、T-98G细胞

UCLA-RO 81细胞类似产品：：M-14细胞、HTori:3细胞、MDA.MB.231细胞

HFT8810细胞类似产品：：MV 3细胞、Bac12F5细胞、CCD1095Sk细胞

NCIH526细胞类似产品：：Panc8.13细胞、WERI Rb-1细胞、ATC241细胞

细胞冻存的步骤：１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天ZuiHAO换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为５×１０６～１×１０７/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具体要看培养的细胞类型来选择；３)将分装上述细胞悬液于２ml冻存管中，每管０.２５ml。冻存管要将盖子盖紧，并标记HAO细胞名称和冻存日期，同时作HAO登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)；４)将装HAO细胞的冻存管放到冻存盒中，-８０℃冰箱过夜。；如果有程序降温器(放在-８０℃冰箱过夜，放入液氮罐)ZuiHAO;或者可以在４℃，２h;然后转到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，ZuiHAO取出一只冻存管细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。

细胞冻存复苏材料与方法步骤：常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器，规格有３５L和５０L两种。使用时要注意以下几点：(１)一般两周需充液氮一次，至少一个月充氮一次。液氮温度达-１９６℃，使用时注意勿让液氮溅到皮肤上，以免引起冻伤。(２)液氮容器为双层结构，中间为真空层，瓶口有双层焊接处，应防止焊接部裂开。(３)在装入液氮时，要注意缓慢小心，并用厚纸卷筒或制漏斗作引导，使液氮直达瓶底，如有专用液氮灌注装置则更HAO。若为初次使用，加液氮时更要缓慢，以免温度骤降而使容器损坏。细胞冻存时常备的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培养液，DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(１２１°C蒸气GAO压消毒)，２mL安瓿(或专用细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天ZuiHAO换液。将多个培养瓶中的细胞培养 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０６～１×１０７/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记HAO细胞名称和冻存日期，同时作HAO登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装HAO细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，Zui后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，ZuiHAO取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。

J774A.1细胞类似产品：：32D:cl3细胞、UCLA-SO-14细胞、U-138-MG细胞

A549细胞类似产品：：D-341Med细胞、38C13细胞、CATHa细胞

P3X63Ag8653细胞类似产品：：A704细胞、CHO cell clone K1细胞、HEC-1B细胞

SK 1细胞类似产品：：Colo-206F细胞、SW 756细胞、Hep 3B2细胞

PLA-802细胞类似产品：：BC-025细胞、H1930细胞、SK-ChA1细胞

SNUC2A细胞类似产品：：A 549细胞、Panc_02_03细胞、Michigan Cancer Foundation-12A细胞

H2347细胞类似产品：：ChaGo-K1细胞、P388细胞、Centre Antoine Lacassagne-148细胞

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SUM-102PT细胞类似产品：：MZCRC1细胞、UWB1289细胞、D283细胞

GM02131细胞类似产品：：NCTC-3960细胞、Rat Fetal Lung-6细胞、LICR-HN6细胞

HEK.EBNA细胞类似产品：：NCIH2196细胞、WM115F细胞、NCIH226细胞

WM-266-4细胞类似产品：：CCD-966SK细胞、T-HSC细胞、MCF-7/ADR-RES细胞

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L M (TK-)细胞类似产品：：UT-7细胞、FRTL-5细胞、58F细胞

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LS-174细胞类似产品：：OLN-93细胞、NCI-H1703细胞、HCC-2279细胞

SKM-1细胞类似产品：：HGMC细胞、GM00637H细胞、L cells细胞

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INS-1E Cells(赠送Str鉴定报告)|大鼠胰岛素瘤细胞

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NCI-H774细胞类似产品：：UMUC14细胞、BE2_C细胞、CCC-HEL-1细胞

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VM-CUB-1细胞类似产品：：BT-483细胞、SF-126细胞、AU565细胞

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RPE D407细胞类似产品：：WM115F细胞、MGHU3细胞、SW-480细胞

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Stanford University Pediatric T-cell line 1细胞类似产品：：SK-MES1细胞、P3.653细胞、Human Embryonic Skin细胞

Human Embryonic Kidney 293细胞类似产品：：My-La 2059细胞、NKL细胞、NKL细胞

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SW1573细胞类似产品：：JEKO细胞、MOLM-16细胞、Hs1.Tes细胞

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PC3M细胞类似产品：：BMSC/hBMSCs细胞、KM12SM细胞、PNT-1A细胞

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BTI-TN5B1-4细胞类似产品：：HASMC细胞、NTera 2/cl.D1细胞、Human Pancreatic Duct Epithelial细胞

NS-20Y细胞类似产品：：CCRF CEM细胞、VK2细胞、U2932细胞

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184A1细胞类似产品：：Hep 3B2_1-7细胞、BALB/c 3T3 clone A31细胞、RK13细胞

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Fetal Rhesus Kidney-4细胞类似产品：：IGR-OV1细胞、HOS TE85细胞、LAN-6细胞

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SR细胞类似产品：：RPMI 1788细胞、CaEs17细胞、MALME.3M细胞

RPTEC TERT1细胞类似产品：：786O细胞、H2591细胞、CF PAC-1细胞

EFM-19细胞类似产品：：SKMES细胞、RD-ES细胞、HT-115细胞

KP-N-RT-BM细胞类似产品：：HCT-116细胞、190PT细胞、VERO C 1008细胞

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H1693细胞类似产品：：PC-14细胞、QGY7703细胞、NE1-E6E7细胞

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Monomac-1细胞类似产品：：H2228细胞、Panc 10.05细胞、SUM190细胞

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T-T细胞类似产品：：CWR22-Rv1细胞、32D clone3细胞、SBC-5细胞

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Natural Killer-92细胞类似产品：：BrCL15细胞、BEL7405细胞、H-865细胞

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Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative细胞类似产品：：U-87 MG细胞、LAN-1细胞、MeT 5A细胞

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INS-1E Cells(赠送Str鉴定报告)|大鼠胰岛素瘤细胞

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RT-BM-1细胞类似产品：：HUC-1细胞、HCC1806细胞、GM 2132细胞

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