WM35 Cells(赠送Str鉴定报告)|人黑色素瘤细胞

"WM35 Cells(赠送Str鉴定报告)|人黑色素瘤细胞

细胞背景资料：黑色素瘤；女性

细胞形态：上皮细胞样

【细胞培养中原虫的污染情况总结】原虫：培养液可轻微浑浊，显微镜下那些细小的点状物数量非常多，轻微活动，细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢，而且细胞状态不HAO，边缘不清楚，细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的，但他们的数量小，细胞站YOU势所以不会影响到细胞的正常生长，只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长，Zui终形成恶性循环。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等关于培养基的无菌状况，取培养基至培养瓶中(不加细胞)，３７度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长就是操作的问题。也可以在培养基中事先加入双抗(酸链霉素和苄青霉素)。但双抗有时会影响细胞的状态，所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗，以避免影响实验结果。１)孵箱应定期用三氧机消毒或者紫外光照射，并用酒精和新洁尔灭试擦孵箱同时孵箱内的水应是三蒸水；２)超净台\取材\器材\培养液\培养瓶\操作等因素；３)超净台的风机不能过大，风机到６-８格。否则也可能能致霉菌污染；４)无菌室经甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的喷洒中和，约几小时即可进入操作。

细胞生长：贴壁

PC-14细胞类似产品：：SW 982细胞、DV90细胞、C33A细胞

Ej138细胞类似产品：：Hi5细胞、MB-49细胞、G422细胞

4T1.2细胞类似产品：：SHG-44细胞、143 B细胞、Colon26细胞

HANK1细胞类似产品：：MCA-38细胞、H-1781细胞、NCI-H322细胞

LCMS细胞类似产品：：KRC-Y细胞、Tj-905细胞、CT-26细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞培养过程中，总是会出现各种意想不到的问题，一不留神就会全盘皆输。所谓细胞虐我千百遍，我待细胞如初恋。下面是贴壁细胞的保藏方法，希望对细胞培养初学操作者有所帮助：1)观察细胞状态：贴壁细胞密度达到85-90%，即可以细胞冻存形式进行保藏，拍照，记录细胞状态；2)细胞清洗：培养皿表面消毒后，转移至生物安全柜中，去除培养皿中培养液，加入12mlPBS，轻轻摇晃培养皿清洗细胞，随后吸除PBS清洗液；3)细胞消化：将2ml胰酶加入培养皿中，完全覆盖细胞，置于显微镜下观察（期间禁止摇晃培养皿），当细胞刚开始脱落时，立即转移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余约0.5ml胰酶，转移至培养箱内继续消化，每30秒肉眼观察细胞状态，至细胞成流沙状完全脱落，转移至生物安全柜中，加入12ml完全培养基，终止消化；4)细胞离心：将终止消化后的细胞悬液吹打均匀，吸取至15ml离心管中，1000r/min（110g），离心3min；5)细胞冻存：离心后去除细胞上清液，按照冻存细胞量5*10^5/ml，吸取冻存液重悬细胞沉淀，吹打均匀后分装至相应的冻存管中，进行冻存；6)细胞保藏：冻存管做HAO标记，放至程序降温盒中，于4℃冰箱放置30min，转移至-80℃超低温冰箱过夜，将过夜后的冻存细胞转移至液氮中保藏。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

SHIN3细胞类似产品：：HO8910PM细胞、H187细胞、PC 61细胞

SK-MES-1细胞类似产品：：NEC细胞、SU-86-86细胞、Simpson细胞

95C细胞类似产品：：BT474细胞、Lu-99A细胞、UO.31细胞

FRTL5细胞类似产品：：HPASMC细胞、HARA-B细胞、FDCP-1细胞

MC38细胞类似产品：：QG56细胞、H-1238细胞、OCM1A细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁

SKG-3a细胞类似产品：：TALL1细胞、NIT-1细胞、Hs 604.T细胞

HFTF细胞类似产品：：HeLa细胞、AX-Mel细胞、NCIH1048细胞

U-87MG ATCC细胞类似产品：：BJ [Human fibroblast]细胞、SW 1222细胞、HT-1376细胞

SNU601细胞类似产品：：KYSE0030细胞、WiDr-TC细胞、KPNRTBM1细胞

OCI-Ly7细胞类似产品：：NRK 49F细胞、HFT 8810细胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]细胞

L-6TG细胞类似产品：：P-2003细胞、A875细胞、GS-9L细胞

细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏HAO的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。

贴壁消化难题：１，先用PBS 把细胞洗两遍，使瓶内没有血清了，减少对胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在细胞有些消化下来时，拿着瓶口，运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体，这样细胞很快就下来了，还不需要吹打，分散也均匀；２，成团、絮状：消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象，血清可以终止胰酶的作用，如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清终止，如果消化液中加入了edta的话，就要将消化液倒干净，如果细胞贴壁要求不是很严格的话，一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基，加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性Zui强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势)，随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验，则不能弃去胰酶)，加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代，否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片)；消化过度：马上用培养基中和，用吸管吹打细胞，收集全部的细胞到以无菌的离心管中８００RPM ３分钟。弃上清，用全培重悬，换新的培养瓶继续培养，状态不HAO的细胞在培养的过程中会死亡脱落，在换液的时候可以清除掉！

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LNCaP细胞类似产品：：Y79细胞、CCK81细胞、PE/CA-PJ34细胞

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DSL-6A-C1细胞类似产品：：HTh 74细胞、SW-1271细胞、HMEC细胞

A431/P细胞类似产品：：NCIH2135细胞、MCF12F细胞、LMTK-细胞

FHs74 Int细胞类似产品：：HRC-99细胞、Med 283细胞、LO2细胞

LN-229细胞类似产品：：RGCs细胞、786-0细胞、hSCC-25细胞

KPL-4细胞类似产品：：NCIH1417细胞、SW626细胞、BMDC细胞

293E细胞类似产品：：INS-1E细胞、LS 174 T细胞、SHP77细胞

HPAF-II/CD18细胞类似产品：：MSC细胞、GM-346细胞、SUP-B15细胞

McArdle RH-7777细胞类似产品：：WB F344细胞、MDA-MB157细胞、RBMVEC细胞

Hs 706.T细胞类似产品：：NUGC4细胞、SL1细胞、NCI-H2342细胞

CEM-0细胞类似产品：：33604细胞、NCIH1975细胞、MDA175细胞

D10G41细胞类似产品：：NT2细胞、MN-9D细胞、CW2细胞

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