UPCI-SCC-154 Cells(赠送Str鉴定报告)|人舌鳞癌细胞

"UPCI-SCC-154 Cells(赠送Str鉴定报告)|人舌鳞癌细胞

细胞背景资料：舌鳞癌；男性；HPV６转化

细胞形态：上皮细胞样

体内细胞培养及其操作步骤：【瘤细胞悬液接种】１)无菌选取生长良HAO(有光泽，淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞；２)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨，经８０～１００目筛网过滤成细胞悬液；３)培养细胞应用PBS洗两遍；４)计数并调整细胞浓度至１０７～１０８／ml；５)常规消毒后，于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(０.１ml／部位，＞１０６细胞)。初次接种成功率低，细胞数尽可能多一些；６)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期，以后随着传代潜伏期逐渐缩短，Zui后固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤细胞，将这种腹水反复传代，即可成为腹水瘤。初次传代时，腹水常呈血性(含大量红细胞)，反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。１)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤，进行细胞计数；２)消毒动物，左下腹穿刺接种１０６腹水瘤细胞；３)接种腹水瘤细胞后约７~１２d，待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９号针头抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水经３０００rpm离心１５min，收集上清，分装冻存备用。

细胞生长：贴壁

MUM2B细胞类似产品：：EL4细胞、H-187细胞、KP-N-RT-BM-1细胞

Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2细胞类似产品：：B10BR细胞、C-33A细胞、HuH 6细胞

SR细胞类似产品：：RPMI 1788细胞、CaEs17细胞、MALME.3M细胞

C4-1细胞类似产品：：IOSE80UBC细胞、HeLa S 3细胞、COR-L88细胞

B16-F10-BL6细胞类似产品：：OVCAR.4细胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative细胞、NP69细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，ZuiHAO经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

SPDC-CCL141细胞类似产品：：CCC-HEH-2细胞、CHP-126细胞、LTEP a2细胞

CALU1细胞类似产品：：LUDLU1细胞、NCI-HUT-69细胞、H1770细胞

Hs 819.T细胞类似产品：：MPVECs细胞、NU-GC-3细胞、M3 Clone M-3细胞

HuH1细胞类似产品：：NCI-H747细胞、Wien133细胞、AKR细胞

CNE1细胞类似产品：：OE33细胞、KMS-11细胞、HEK-293细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁

TK+/- (clone 3.7.2C)细胞类似产品：：NCI-H2106细胞、130 T细胞、PLC-8024细胞

SK-MEL-2细胞类似产品：：SNU638细胞、Mouse Bladder Tumor line-2细胞、CCD 841 CoN细胞

Sarcoma OSteogenic-2细胞类似产品：：8305C_1细胞、MZ-CRC-1细胞、MC116细胞

MDA-PCa-2b细胞类似产品：：H-2110细胞、HT144mel细胞、MLMEC细胞

Giant Cell Tumor细胞类似产品：：L- cell细胞、NCI-H69细胞、E.L.4细胞

Huh-7细胞类似产品：：MCM细胞、EAhy926细胞、MDAMB435S细胞

细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间Zui长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请YOU先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做HAO照片记录并联系实验室。

贴壁消化难题：１，先用PBS 把细胞洗两遍，使瓶内没有血清了，减少对胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在细胞有些消化下来时，拿着瓶口，运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体，这样细胞很快就下来了，还不需要吹打，分散也均匀；２，成团、絮状：消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象，血清可以终止胰酶的作用，如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清终止，如果消化液中加入了edta的话，就要将消化液倒干净，如果细胞贴壁要求不是很严格的话，一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基，加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性Zui强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势)，随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验，则不能弃去胰酶)，加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代，否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片)；消化过度：马上用培养基中和，用吸管吹打细胞，收集全部的细胞到以无菌的离心管中８００RPM ３分钟。弃上清，用全培重悬，换新的培养瓶继续培养，状态不HAO的细胞在培养的过程中会死亡脱落，在换液的时候可以清除掉！

B16 subline B78细胞类似产品：：SKMEL-2细胞、DMS-273细胞、CALU1细胞

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CMT 93细胞类似产品：：FaDu细胞、Hs445细胞、P3/NS-1细胞

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NCIH345细胞类似产品：：COLO 738细胞、MT4细胞、Jurkat clone A3细胞

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NCI-H69C细胞类似产品：：SK.MEL.28细胞、KNS42细胞、HEK;293细胞

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COLO320HSR细胞类似产品：：H2110细胞、SuDHL 4细胞、H2073细胞

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H-1651细胞类似产品：：A431/P细胞、SC1细胞、LTEP-sm细胞

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PTK-2细胞类似产品：：MHCC97L细胞、SUDHL-1细胞、Ramos (RA 1)细胞

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H-510细胞类似产品：：LC-2 ad细胞、FHL124细胞、SK-BR3细胞

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OVCA432_Bast细胞类似产品：：NCI-A549细胞、130-T细胞、SW-1271细胞

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NT2细胞类似产品：：T1-73细胞、C 643细胞、NFHIOSE-80细胞

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HPAC细胞类似产品：：JVM-3细胞、H2198细胞、YES2细胞

BEAS-2B细胞类似产品：：PA-1细胞、143TK-细胞、HCC0078细胞

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MA-782细胞类似产品：：NKT细胞、AR41P细胞、UCLA SO M14细胞

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