BC-025 Cells(赠送Str鉴定报告)|人乳腺癌细胞

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细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

养了几年细胞，说一点自己培养细胞方面的看法：１)培养细胞前，可以看看细胞点说明书，包括细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等；２)不同细胞生长周期不同，有的生长很快，比如说MDA-MB-２３１，传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了，有的又是别慢，等的人心焦，BT４７４就是，传代是一分二，复苏起始的时候两周多才能长满，所以就要在培养细胞的过程中多多摸索了；３)对于娇弱的细胞，就得细心呵护了，胰酶消化不能过久，吹得时候要轻柔，离心时候也要注意转速和时间，每天都要去看一下细胞，肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况；４)冻存细胞复苏后第二天ZuiHAO更换一次培养基；５)培养箱隔一段时间彻底用酒精棉擦洗一次；６)养细胞Zui大的教训：不能偷懒!细胞虐我千百遍，我待细胞如初恋。１)不管买的细胞、惠赠的细胞，刚拿到手赶紧做两件事：检测是否有支原体污染; 迅速扩增冻存；２)发现有污染迅速处理掉，别是当你养了很多种细胞时; 细菌污染，真菌污染很容易发现，支原体污染的话，细胞会长的慢，买个支原体检测的kit定期检测一下；３)传代细胞日常的值日清洁是必须的，此外还要定期熏蒸；４)细胞的传代一定要规律，保持相同的confluency和传代时间间隔，不要随心所欲或者拖延；５)注意个人卫生。

细胞生长：贴壁

NCI-H1648细胞类似产品：：CT26-clone 25细胞、UPCI:SCC154细胞、MSTO-211H细胞

SK Mel 24细胞类似产品：：Earle's L cells细胞、SNK-6细胞、Mono Mac 6细胞

PASMCS细胞类似产品：：138MG细胞、P3 88 D1细胞、DLD1细胞

L929细胞类似产品：：NCI-H1792细胞、HuCC-T1细胞、293 EBNA细胞

NCIH1573细胞类似产品：：CT26细胞、KYSE50细胞、MOVAS细胞

BC-025 Cells(赠送Str鉴定报告)|人乳腺癌细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，ZuiHAO经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

CMT64细胞类似产品：：LN382细胞、Ramos(RA1)细胞、LMH细胞

C33-A细胞类似产品：：OCI-Ly03细胞、A-498细胞、NGP细胞

8226细胞类似产品：：HCT-15细胞、H-1930细胞、NCI H295R细胞

MS751细胞类似产品：：INS1细胞、EJ 138细胞、HEK-293 c18细胞

CHP 126细胞类似产品：：H-23细胞、OVCAR.3细胞、Cates-1B细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分

Hep 3B2细胞类似产品：：JKT-1细胞、CCD-841-CoN细胞、769-P细胞

DMS 53细胞类似产品：：CCRF-CEM C7细胞、VB细胞、Eca 109细胞

L5178YR细胞类似产品：：D10细胞、L M (TK-)细胞、NCIH748细胞

MFD-1细胞类似产品：：LAPC-4细胞、JHH-7细胞、MC3T3-E1 Subclone 24细胞

H-1954细胞类似产品：：OV 1063细胞、ZR75_1细胞、C-Lu65细胞

NCI-H522细胞类似产品：：SJCRH30细胞、RIN-m 14B细胞、H2170细胞

细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏HAO的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。

贴壁细胞的消化方法介绍：１、胰酶。这是用得Zui多的。一般浓度在０.２５-０.５%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大，从几分钟到几十分钟不等。０.２５%的胰酶作用于单层贴壁的细胞，在３７度条件下，一般消化１-５分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含、镁的平衡液，否则影响活性。保存于-２０度。２、胶原酶。这种方法比较少，一般是用原代培养时，从组织消化下细胞。这种方法作用温和，对细胞损伤较小，但是，价格也较贵。中止同样是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般浓度在０.０２%左右。作用于细胞与间质，对细胞间也有一定作用。注意，它能显著影响pH值，而且在弱碱性条件下才易溶。因此，配制时应调节HAO酸碱度。它不能被终和。因此，消化下来的细胞要洗一遍。４、商品化的无酶消化液。个人的使用经常觉得对细胞的损伤比较大，但是分离成单细胞悬液的能力确实比较强。５、物理法。直接吹打或用细胞刮子将细胞刮下来。６、冷冻法。此方法仅能用于细胞传代时。无法使组织上的细胞脱落下来。本方法的原理，我想是因细胞冷冻后收缩，从而从培养瓶上脱落下来。YOU点是：对细胞损伤小，不需要中止或洗细胞，方便，不需要另外配制消化液。别适用那些贴壁不是别紧，又别娇气的细胞。不足是细胞常成小片脱落。此种方法曾用于因用其它方法传代导致大量细胞死亡操作的间充质干细胞、DC细胞的培养，效果非常满意。具体过程是：１、用较多的４度的PBS 洗涤一遍细胞(以６孔板为例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，静置操作台上，很快细胞就小片脱落，３、轻轻吹打，细胞即完全脱落，４、按一定比例传代。

HFL-1细胞类似产品：：CCRF-SB细胞、RCC10RGB细胞、H196细胞

HEB细胞类似产品：：KMS26细胞、H-847细胞、EB1细胞

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