RK 13 Cells(赠送Str鉴定报告)|兔肾细胞

"RK 13 Cells(赠送Str鉴定报告)|兔肾细胞

细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

养了几年细胞，说一点自己培养细胞方面的看法：１)培养细胞前，可以看看细胞点说明书，包括细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等；２)不同细胞生长周期不同，有的生长很快，比如说MDA-MB-２３１，传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了，有的又是别慢，等的人心焦，BT４７４就是，传代是一分二，复苏起始的时候两周多才能长满，所以就要在培养细胞的过程中多多摸索了；３)对于娇弱的细胞，就得细心呵护了，胰酶消化不能过久，吹得时候要轻柔，离心时候也要注意转速和时间，每天都要去看一下细胞，肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况；４)冻存细胞复苏后第二天ZuiHAO更换一次培养基；５)培养箱隔一段时间彻底用酒精棉擦洗一次；６)养细胞Zui大的教训：不能偷懒!细胞虐我千百遍，我待细胞如初恋。１)不管买的细胞、惠赠的细胞，刚拿到手赶紧做两件事：检测是否有支原体污染; 迅速扩增冻存；２)发现有污染迅速处理掉，别是当你养了很多种细胞时; 细菌污染，真菌污染很容易发现，支原体污染的话，细胞会长的慢，买个支原体检测的kit定期检测一下；３)传代细胞日常的值日清洁是必须的，此外还要定期熏蒸；４)细胞的传代一定要规律，保持相同的confluency和传代时间间隔，不要随心所欲或者拖延；５)注意个人卫生。

细胞生长：贴壁

HTori3细胞类似产品：：GM637A细胞、MDA330细胞、P30/Ohkubo细胞

2PK3细胞类似产品：：NIH 3T6细胞、Lewis-Lung细胞、NTERA2D1细胞

H-II-E-C3细胞类似产品：：beta-TC6细胞、MDCK-2细胞、NE1细胞

MT-2J细胞类似产品：：SKNAS细胞、FUOV1细胞、293/EBNA细胞

Human Corneal Endothelial Cells-12细胞类似产品：：SGC-7901/DDP细胞、BAEC细胞、UPCI-SCC-154细胞

RK 13 Cells(赠送Str鉴定报告)|兔肾细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

悬浮细胞不容易转染：悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞GAO出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次，脂质体试剂的毒性较大，这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外，悬浮细胞不易培养，易死亡，也给细胞转染造成了一定的困难。为了提GAO悬浮细胞的转染效率，可以使用非脂质体的转染试剂，如纳米材料的。也可以使用电转染方法，针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的，电击对细胞有一定的损伤，ZuiHAO选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂，可以将电击对细胞的伤害降到Zui低，悬浮细胞不易转染，选对试剂及良HAO的细胞培养环境才是关键。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

CEM-CCRF细胞类似产品：：PLC-8024细胞、A7r5细胞、COLO 320HSR细胞

IMCD-3细胞类似产品：：NCI-H2009细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2细胞、LIM 1215细胞

Hs 739.T细胞类似产品：：U138-MG细胞、HUVSMC细胞、OVCA 432细胞

COLO-741细胞类似产品：：HPAF2细胞、Swiss/3T3细胞、MDA-435细胞

AG06814-J细胞类似产品：：BAC1.2F5细胞、Pt K2细胞、LWnt-3A细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分

Sf21细胞类似产品：：U-251_MG细胞、NHRF细胞、HT-3细胞

SUP-M2细胞类似产品：：SW1271细胞、D283MED细胞、Baby Hamster Kidney-21细胞

P31/Fujioka细胞类似产品：：B958细胞、SK BR 03细胞、D562细胞

SKUT-1细胞类似产品：：H-498细胞、Kit225细胞、Ra #1细胞

H6c7细胞类似产品：：Y-1细胞、253JB-V细胞、LL/2细胞

MLM细胞类似产品：：NCI-H1581细胞、NPA-87细胞、GM03320D细胞

细胞接收后的操作流程与注意事项：１)如果细胞为贴壁细胞，而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态，请将悬浮的细胞即时离心，加１５%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养３天；同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为１５%血清的完全培养基培养３天。３天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡，请及时联系实验室技术人员会跟进解决；２)贴壁细胞生长缓慢；适当提GAO血清浓度(ZuiGAO不能超过２０%)，或可根据该细胞生长密度，考虑胰酶消化后，转移到新的培养瓶继续培养；３)生长不均：贴壁细胞若出现分布不均，成岛状生长，可将细胞进行消化，重悬打散细胞，加入新鲜培养基进行培养。

细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带HAO防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)ZuiHAO选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较GAO，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不HAO离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰HAO稀释到了无害浓度。

CFPAC-1细胞类似产品：：TMK1细胞、ACT-1细胞、JeKo-1细胞

LAN-5细胞类似产品：：GA-10细胞、HCC941122细胞、HEM-L细胞

AN-3细胞类似产品：：U373MG细胞、COLO 320细胞、HCM细胞

HeLa/S3细胞类似产品：：Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1细胞、NCTC1469细胞、GP-293细胞

SN4741细胞类似产品：：Tb1.Lu细胞、Tn-5细胞、Fetal Human Lens-124细胞

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RK 13 Cells(赠送Str鉴定报告)|兔肾细胞

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MPC5细胞类似产品：：COLO-HSR细胞、CCRF.CEM细胞、H-2052细胞

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T-HSC细胞类似产品：：SNU-119细胞、Leghorn Male Hepatoma cell line细胞、ROS17/2.8细胞

RIN-m细胞类似产品：：MOLM-13细胞、DMS 53细胞、BMU-S1细胞

CaEs17细胞类似产品：：X63Ag8-653细胞、SU-DHL-4细胞、B16/BL6细胞

HGBEC细胞类似产品：：BEAS-2B细胞、MGH-U1 (EJ)细胞、LNCaP C4-2B细胞

X63Ag8.653细胞类似产品：：HT144mel细胞、KU-812-F细胞、NCIH596细胞

NS1-1 Ag4.1细胞类似产品：：H-1238细胞、MCF 10A细胞、HEK293-A细胞

AN-3细胞类似产品：：U373MG细胞、H-1395细胞、CCD-112CoN细胞

DU4475细胞类似产品：：McCoy细胞、LX-2细胞、C-33A细胞

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