L-M(TK-) Cells(赠送Str鉴定报告)|小鼠结缔组织细胞

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细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

【细胞培养中支原体、黑蛟虫、真菌的污染情况总结】支原体：黑色的，HAO象多为多形，培养液一般培养液一般会浑浊，原体感染，国内血清很多都没有做支原体阴性检测，而支原体是牛血清中Zui常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后，细胞病变不很明显，只是慢慢死去。用泰乐菌素，兽用支原体病的药，但可用于细胞培养，无任何不良反应。如果作为常用的抗生素的话, 建议用８ug/ml的浓度；黑蛟虫：可以穿透滤膜，也可以通过空气传播，低倍下为黑色点状，GAO倍下可看见黑色的小虫游来游去，培养液也是不浑的，一般不会太影响，细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良HAO，且观测到的运动物无明显增多，且培养液颜色、透明度无明显变化，可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响，在细胞增殖旺盛之后会自然消失，除更换血清外无须殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话，可以增加细胞的种板密度，以提GAO细胞的生存率；真菌：一般培养液清亮，不变色，镜下有丝状物，有些真菌开始很像死细胞碎片，只是它很多很多的小块很清楚，象珊瑚状，不象细胞碎片分不清，慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢，不象细菌那么容易被发现，但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了，也很难救活了。

细胞生长：贴壁

WEHI 164 TC细胞类似产品：：Hs683T细胞、OVCA 432细胞、MARC 145细胞

ANA-1细胞类似产品：：RBE4细胞、Rat 2细胞、NCI-460细胞

MUM2B细胞类似产品：：EL4细胞、H-187细胞、KP-N-RT-BM-1细胞

SV40-MES13细胞类似产品：：KRC Y细胞、G519细胞、149 PT细胞

RPMI7666细胞类似产品：：MFD-1细胞、EFM192C细胞、Panc_05_04细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

预防细胞污染的注意事项：实验进行前，超净台用紫外灯照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超净台台面，并开启超净台风扇运转10min左右再开始实验操作。实验用品用75%酒精擦拭后才能放入超净台内；实验用品用完应移出超净台，以利于气流的流通。实验完成后用75%酒精擦拭超净台台面。每次操作只处理一种细胞；即使不同细胞使用相同的培养基也不要共享同一瓶培养基，避免细胞间的交叉污染。操作时小心取用无菌的物品，避免污染。勿碰触吸管尖头，不小心碰触后应立即更换；不要在打开的容器瓶口正上方操作，容器打开后，倾斜45°操作，操作完成后及时盖上瓶盖。CO2培养箱的清洁是较易被忽视的地方，应1-2个月对培养箱定期进行清洁消毒。先用75%酒精擦拭培养箱内壁、隔板、水盘2-3次，用双蒸水清洗，再用酒精棉球擦拭一遍，后紫外灯照射4h以上。水盘内加入无菌水（应每周更换），待培养箱内温度、湿度、CO2浓度稳定后再放入细胞。定期清洗或更换超净台过滤膜、预滤网。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

P3X63 Ag8.653细胞类似产品：：Factor Dependent Cell-Paterson 1细胞、HHL-5细胞、MDA231-LM2-4175细胞

COLO-320HSR细胞类似产品：：UACC-812细胞、G-401细胞、NIH3T3细胞

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SJSA1细胞类似产品：：L2细胞、CL34细胞、SHG44细胞

GM02131A细胞类似产品：：B16/F10细胞、PLC-8024细胞、MDA MB 453细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分

OV2008细胞类似产品：：NS1-Ag4/1细胞、HRC-99细胞、NCI-H727细胞

Det. 562细胞类似产品：：H19-7细胞、SNU620细胞、MES 13细胞

CG-4细胞类似产品：：Panc 4.03细胞、K562/ADP细胞、H647ell细胞

NCIH1568细胞类似产品：：THEECs细胞、118 MG细胞、RPMC细胞

3T3-L1细胞类似产品：：NS1-Ag 4/1细胞、LTEP-a2细胞、CCD1112Sk细胞

KTC1细胞类似产品：：VMM39细胞、3T3 Swiss Albino细胞、HCC-94细胞

细胞冻存的步骤：１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天ZuiHAO换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为５×１０６～１×１０７/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具体要看培养的细胞类型来选择；３)将分装上述细胞悬液于２ml冻存管中，每管０.２５ml。冻存管要将盖子盖紧，并标记HAO细胞名称和冻存日期，同时作HAO登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)；４)将装HAO细胞的冻存管放到冻存盒中，-８０℃冰箱过夜。；如果有程序降温器(放在-８０℃冰箱过夜，放入液氮罐)ZuiHAO;或者可以在４℃，２h;然后转到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，ZuiHAO取出一只冻存管细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。

正确的细胞复苏需知事项：细胞冻存HAO了，接下来要注意什么问题呢？没错，就是记得到时间了，拿出来复苏。那么，细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢？细胞活力和形态检查的作用何在？活力检查——千万不要使用不健康的细胞，可能有污染(真菌、支原体等)，如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞：补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至７０%单层时收获细胞，计数活细胞数，用冻存液调整细胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整)；冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞，有不同类型的冻存液，根据细胞类型选择Zui合适的冻存液(常用的冻存液成分有)：５-１０% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质；５-１５%甘油；如果细胞在无血清培养基内生长，应在５０%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长２４小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记HAO细胞类型，日期，冻存人等信息，并保证每冻存管不超过１.５ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以Zui快的速度转移冻存管知液氮罐内，因此，此步骤ZuiHAO使用干冰，或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意，在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息，做HAO记录是非常非常重要的！还有一个Zui重要的，一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞，以免其中的一个液氮罐出现问题！细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要，熟记以下要点：当从液氮罐内取出细胞时，有可能会出现冻存管破裂的情况，使用保护面罩和防护服十分必要；其实，细胞复苏只是一个简单的实验，不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节，不然，也不一定会尽如人意。例如说，人身健康方面：一定要记得做HAO防冻工作，戴上护目镜；尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。

CEM T4细胞类似产品：：DHL5细胞、Douglas Foster-1细胞、NPA 87细胞

HNE-1细胞类似产品：：SP-2细胞、DMS 79细胞、NCI-SNU-119细胞

L-cells细胞类似产品：：UPCI-SCC-090细胞、HCT 116细胞、Hopkins-92细胞

Hepa-RG细胞类似产品：：SF 763细胞、DHL4细胞、NCIH1373细胞

NBLAN5T细胞类似产品：：KFB细胞、HEL-299细胞、CEK细胞

PG-4 (S+L-)细胞类似产品：：SB细胞、MCF7细胞、COC1/CDDP细胞

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BALB/3T3 (clone A31)细胞类似产品：：OVCAR5细胞、MUTZ3细胞、BNL CL2细胞

MDAPCa2b细胞类似产品：：TE3细胞、JM1细胞、Lieming Xu-2细胞

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1301细胞类似产品：：L cell line细胞、CoCL2细胞、PSN-1细胞

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KY180细胞类似产品：：SW1353细胞、SW 1088细胞、RKO-E6细胞

HS-766-T细胞类似产品：：HuCCT-1细胞、COLO 394细胞、ONS-76细胞

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H-1694细胞类似产品：：HEL 92.1.7细胞、526-mel细胞、SKMEL-2细胞

CFPAC1细胞类似产品：：PJ34细胞、143B TK-细胞、G-402细胞

32D.cl3细胞类似产品：：Mouse Podocyte Clone-5细胞、LS-411N细胞、QBC939细胞

MCF7-GFP细胞类似产品：：P3/NS-1细胞、SW 1353细胞、CCRF-CEM C1细胞

293 H细胞类似产品：：RGC5细胞、NCI-H2291细胞、H-125细胞

SW 527细胞类似产品：：UMUC-3细胞、H1435细胞、A375-S2细胞

HCC0015细胞类似产品：：COV434细胞、IBMF-7细胞、IMCD-3细胞

GTL-16细胞类似产品：：H35 Reuber细胞、SNG-M细胞、Colo205细胞

Hs 739.T细胞类似产品：：U138-MG细胞、MV-522细胞、OSRC2细胞

YD15细胞类似产品：：Hs940T细胞、Panc-08.13细胞、H-322细胞

L-cells细胞类似产品：：UPCI-SCC-090细胞、IMR32细胞、NK-10A细胞

DV90细胞类似产品：：HEK 293细胞、TE-10细胞、SW-1990细胞

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