GLC-82 Cells(赠送Str鉴定报告)|人肺腺癌细胞

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细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

【细胞培养中细菌、霉菌的污染情况总结】细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在GAO压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象！可在培养液中加相应的抗生素处理；霉菌：培养液是清亮的，倒置显微镜下无杂质，３７度孵箱培养２-３天，仍清亮，但出现絮状杂质，镜下可见呈细丝状的团状漂浮物，可看到明显的菌丝，细胞仍可生长，但时间长之后，细胞的活力状态变差，用酸铜溶液擦拭CO２孵箱内，再把水盘里也加上饱和量的酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒二钠GAO盐液体,可以防止霉菌污染。CO２孵箱被霉菌污染后，可把所有细胞暂时转移，采用擦洗孵箱(包括隔板，箱壁)。并把放置在孵箱内一个小时，使其蒸汽弥漫。待的气味消散后，再移入细胞。孵箱应定期清洁(２月左右)，尤其在多雨的季节。其它培养箱清洗方法是：用８４液擦洗－清水擦洗－７５%酒精擦洗－紫外灯照。预防霉菌污染，可在培养基里加３u/ml的两性霉素或制霉菌素或D或双抗；但细胞一旦污染，很难挽救，制霉菌素或D或双抗都于事无补，建议舍弃该污染细胞，将环境彻底消毒，如果所有细胞都污染，可能是系统污染，检查一下培养基和器材，如果只是个别污染，可能是操作问题，就要注意操作。

细胞生长：贴壁

A375mel细胞类似产品：：SKLMS-1细胞、SGC-7901细胞、JHH2细胞

PLB985细胞类似产品：：Pro-5WgaRI3C细胞、P30-OHKUBO细胞、Panc-05.04细胞

MDA-157细胞类似产品：：SJ-RH30细胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]细胞、NCIH820细胞

OCI-AML4细胞类似产品：：HCC-94细胞、F36P细胞、Colo320细胞

Ra No. 1细胞类似产品：：Hs 852.T细胞、Li-7细胞、TCC-SUP细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

预防细胞污染的注意事项：实验进行前，超净台用紫外灯照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超净台台面，并开启超净台风扇运转10min左右再开始实验操作。实验用品用75%酒精擦拭后才能放入超净台内；实验用品用完应移出超净台，以利于气流的流通。实验完成后用75%酒精擦拭超净台台面。每次操作只处理一种细胞；即使不同细胞使用相同的培养基也不要共享同一瓶培养基，避免细胞间的交叉污染。操作时小心取用无菌的物品，避免污染。勿碰触吸管尖头，不小心碰触后应立即更换；不要在打开的容器瓶口正上方操作，容器打开后，倾斜45°操作，操作完成后及时盖上瓶盖。CO2培养箱的清洁是较易被忽视的地方，应1-2个月对培养箱定期进行清洁消毒。先用75%酒精擦拭培养箱内壁、隔板、水盘2-3次，用双蒸水清洗，再用酒精棉球擦拭一遍，后紫外灯照射4h以上。水盘内加入无菌水（应每周更换），待培养箱内温度、湿度、CO2浓度稳定后再放入细胞。定期清洗或更换超净台过滤膜、预滤网。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

GA-10细胞类似产品：：NIH3T3-L1细胞、HIEC-6细胞、K1细胞

H-1435细胞类似产品：：YD15细胞、H-2135细胞、OCI/AML2细胞

H3255_DA细胞类似产品：：HCS2/8细胞、KPL-4细胞、OCI Ly3细胞

KE-39细胞类似产品：：Hs706T细胞、SUP-B1细胞、T47D:A细胞

NCI-H1838细胞类似产品：：A3细胞、Strain V细胞、B16细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

GLC-82 Cells(赠送Str鉴定报告)|人肺腺癌细胞

细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分

HEL-92细胞类似产品：：Hs 737.T细胞、NCIH1184细胞、PT-K75细胞

H2171细胞类似产品：：LS513细胞、293T/17细胞、HSC-4细胞

H-774细胞类似产品：：GM00637细胞、SKNBE细胞、GB-1细胞

LAPC4细胞类似产品：：EVSAT细胞、SNU886细胞、Bovine ENDometrial cells细胞

NCIH1975细胞类似产品：：SW 480细胞、Tb 1 Lu细胞、ME-1 [Human leukemia]细胞

AN-3细胞类似产品：：U373MG细胞、COLO 320细胞、HCM细胞

常见细胞培养中一些问题总结：１)培养基中血清的比例多少合适？血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为５%-１５%，不要低于５%或GAO过２０%，因为含量过低会导致细胞营养不足，过GAO则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为１０%，可以适量加减；２)何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上的更换时间，按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换；３)购买的复苏细胞，为何会有脱落？因为运输的过程中不可避免的会有震荡，收到后可以离心收集；４)购买的细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；５)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–８０°C太久；６)收到的冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。

细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带HAO防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)ZuiHAO选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较GAO，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不HAO离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰HAO稀释到了无害浓度。

BE(2)-M17细胞类似产品：：H-774细胞、A2780细胞、beta-TC6细胞

HMC-1细胞类似产品：：ML-2细胞、NCI-H711细胞、H35 Reuber细胞

CEK细胞类似产品：：BEAS 2B细胞、HS 445T细胞、Calu-1细胞

COLO-320-DM细胞类似产品：：GEO细胞、KYSE-520细胞、SW1353细胞

NCI-SNU-398细胞类似产品：：SCC-9细胞、MDA 231-LM2-4175细胞、SNU423细胞

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OCI-Ly 8细胞类似产品：：K562/ADP细胞、MOLT3细胞、MDA-MB-436细胞

D-341细胞类似产品：：NHA细胞、COLO684细胞、BE2-M17细胞

Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1细胞类似产品：：LIM 1215细胞、HMC-1细胞、HuH28细胞

IHC-ST1细胞类似产品：：Be-Wo细胞、H-3255细胞、HPC-Y5细胞

H-1703细胞类似产品：：Porcine Kidney-13细胞、IOSE 80细胞、U343MG细胞

MA104细胞类似产品：：ONS-76细胞、MOLM16细胞、HSC1细胞

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BLO-11细胞类似产品：：3T3-Swiss细胞、MCF 7B细胞、16HBE细胞

BT-B细胞类似产品：：HET1A细胞、Eph4 1424细胞、G-292 clone A141B1细胞

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H735细胞类似产品：：Hs 934.T细胞、IPLB-Sf21AE细胞、CAL 12细胞

Hs706T细胞类似产品：：SR786细胞、JC细胞、Panc02细胞

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KYSE-180细胞类似产品：：SUM190细胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]细胞、SKNBE(1)细胞

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