SUP-M2 Cells(赠送Str鉴定报告)|人间变性大细胞

"SUP-M2 Cells(赠送Str鉴定报告)|人间变性大细胞

细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

【细胞培养中原虫的污染情况总结】原虫：培养液可轻微浑浊，显微镜下那些细小的点状物数量非常多，轻微活动，细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢，而且细胞状态不HAO，边缘不清楚，细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的，但他们的数量小，细胞站YOU势所以不会影响到细胞的正常生长，只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长，Zui终形成恶性循环。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等关于培养基的无菌状况，取培养基至培养瓶中(不加细胞)，３７度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长就是操作的问题。也可以在培养基中事先加入双抗(酸链霉素和苄青霉素)。但双抗有时会影响细胞的状态，所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗，以避免影响实验结果。１)孵箱应定期用三氧机消毒或者紫外光照射，并用酒精和新洁尔灭试擦孵箱同时孵箱内的水应是三蒸水；２)超净台\取材\器材\培养液\培养瓶\操作等因素；３)超净台的风机不能过大，风机到６-８格。否则也可能能致霉菌污染；４)无菌室经甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的喷洒中和，约几小时即可进入操作。

细胞生长：贴壁

CAMA细胞类似产品：：CAL 51细胞、TSU-Pr1细胞、H929细胞

OCI-Ly 3细胞类似产品：：32Dc3细胞、LA 4细胞、SR-786细胞

HT clone H9细胞类似产品：：AsPC-1细胞、KU-19-19细胞、NCI-H2081细胞

H211细胞类似产品：：UCLA-SO-M21细胞、HCa/16A3-F细胞、HGE细胞

NUGC-3细胞类似产品：：H-735细胞、MOLT 16细胞、HTR-8/SV neo细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，ZuiHAO经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

H2347细胞类似产品：：ChaGo-K1细胞、P388细胞、Centre Antoine Lacassagne-148细胞

Hs852细胞类似产品：：FDCP1细胞、OCI-AML4细胞、PC-3M细胞

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HBL100细胞类似产品：：PLB985细胞、Mel RM细胞、SU-DHL-10细胞

LOUNH91细胞类似产品：：CCD-112 CoN细胞、HSC-T6细胞、Vx-2细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分

Jurkat (clone E6-1)细胞类似产品：：SW756细胞、CEM-CCRF (CAMR)细胞、MOLT-16细胞

HT 1080.T细胞类似产品：：SK-Hep1细胞、HANK细胞、HFL细胞

SNU5细胞类似产品：：NCI-SNU-C2B细胞、Hela-Ap-1细胞、HEK 293-EBNA细胞

P3J.HR1K细胞类似产品：：H-510A细胞、B16BL6细胞、SUSM1细胞

HEI193细胞类似产品：：DLD1细胞、138MG细胞、UMNSAH/DF-1细胞

P560细胞类似产品：：HuT-78细胞、H889细胞、OVCAR-10细胞

细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏HAO的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。

细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加GAO浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液HAO不HAO，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不HAO。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝Zui后换课题，这个见得太多了，别不当会事。

AX-Mel细胞类似产品：：TCMK-1细胞、OCUM-1细胞、AE 1201细胞

EMT-6细胞类似产品：：CTLL2细胞、MCM细胞、GA-10细胞

SK-N-BE(2C)细胞类似产品：：MOLP8细胞、INS1E细胞、LM2-4175细胞

CAL 120细胞类似产品：：CV-1.K细胞、D562细胞、MRC9细胞

HCC0038细胞类似产品：：U-373MG细胞、Hs688(A)T细胞、J-774细胞

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Hs-688A-T细胞类似产品：：LNCaP.FGC细胞、ANA1细胞、HTR-8/SV-neo细胞

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HBZY 1细胞类似产品：：HOS-MNNG细胞、HEK-293F细胞、REC1细胞

SUP-M2 Cells(赠送Str鉴定报告)|人间变性大细胞

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NU-GC-3细胞类似产品：：MGC803细胞、ACCM细胞、MC 116细胞

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HIEC细胞类似产品：：Hs 600.T细胞、DoHH-2细胞、CCRF.CEM细胞

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CAL 39细胞类似产品：：MM1S细胞、NCI-H1522细胞、MMAc.SF细胞

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细胞类似产品：：NCIH1299细胞、SUP-B15细胞、C6细胞

PC3M-IE8细胞类似产品：：NWA细胞、SW-1417细胞、X63.Ag8.653细胞

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CHP 100细胞类似产品：：PANC3.27细胞、RWPE-1细胞、Hs-611-T细胞

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SUM52PE细胞类似产品：：AtT-20细胞、451Lu细胞、JM1细胞

P3HR-1细胞类似产品：：CA-OV-3细胞、REC 1细胞、KMS11细胞

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MMVECs细胞类似产品：：MFE 280细胞、MOLT16细胞、JIMT1细胞

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KCL22S细胞类似产品：：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞、SHG-44细胞、SK UT 1细胞

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MES 13细胞类似产品：：MCA38细胞、HLEB-3细胞、SUM 149PT细胞

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Human Epidermoid carcinoma #2细胞类似产品：：HCC1569细胞、NBL-4细胞、NS20Y细胞

LS-411N细胞类似产品：：N-87细胞、H1648细胞、MESSA细胞

HCC1419细胞类似产品：：Lymph Node Carcinoma of the prostate细胞、LC-1Sq细胞、SK-RC 52细胞

GBC-SD细胞类似产品：：Alexander细胞、Hx-147细胞、PL5细胞

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NCI-H446细胞类似产品：：WM 451-Lu细胞、TALL1细胞、H-226细胞

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WI 38细胞类似产品：：GM-346细胞、MOLT-4细胞、Okayama University Medical School-27细胞

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PLA-801D细胞类似产品：：THP1细胞、PMVEC细胞、NCIH64细胞

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