RT-112 Cells(赠送Str鉴定报告)|人膀胱癌细胞

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细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

体内细胞培养及其操作步骤：【瘤细胞悬液接种】１)无菌选取生长良HAO(有光泽，淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞；２)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨，经８０～１００目筛网过滤成细胞悬液；３)培养细胞应用PBS洗两遍；４)计数并调整细胞浓度至１０７～１０８／ml；５)常规消毒后，于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(０.１ml／部位，＞１０６细胞)。初次接种成功率低，细胞数尽可能多一些；６)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期，以后随着传代潜伏期逐渐缩短，Zui后固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤细胞，将这种腹水反复传代，即可成为腹水瘤。初次传代时，腹水常呈血性(含大量红细胞)，反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。１)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤，进行细胞计数；２)消毒动物，左下腹穿刺接种１０６腹水瘤细胞；３)接种腹水瘤细胞后约７~１２d，待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９号针头抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水经３０００rpm离心１５min，收集上清，分装冻存备用。

细胞生长：贴壁

Detroit 562细胞类似产品：：SUDHL6细胞、PaTu 8988s细胞、Hs746T细胞

SKGT2细胞类似产品：：Hs 895 T细胞、SK LU 1细胞、TE 32细胞

HD-LM-2细胞类似产品：：EOC 20细胞、GM04679细胞、FU-MMT-1细胞

CHL-11细胞类似产品：：U373 MG细胞、Chang Cells细胞、HC11 Mammary Epithelium细胞

H-1395细胞类似产品：：A549-Taxol细胞、NCI-322细胞、UO-31细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，ZuiHAO经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

DU-145细胞类似产品：：HRGEC细胞、Human Pancreatic Duct Epithelial细胞、Hx-147细胞

IPEC1细胞类似产品：：SKNBE2C细胞、hFOB细胞、Mel526细胞

HELA-GFP细胞类似产品：：251MG细胞、NCI-128细胞、HuPT4细胞

MT-2J细胞类似产品：：SKNAS细胞、FUOV1细胞、293/EBNA细胞

Hs 604.T细胞类似产品：：H2073细胞、L(TK-)细胞、U266-B1细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分

mREC细胞类似产品：：SKNBE(2c)细胞、16-HBE14o细胞、LLC-PK-1细胞

LP1细胞类似产品：：SW480细胞、HCC 94细胞、AML12细胞

SH-SY5Y Parental细胞类似产品：：KYSE-70细胞、YD38细胞、Calu6细胞

BaF3细胞类似产品：：ECV304细胞、NCIH526细胞、H-1437细胞

BEAS-2B细胞类似产品：：PA-1细胞、143TK-细胞、HCC0078细胞

SW 756细胞类似产品：：G422细胞、RBL-1细胞、CCD 966SK细胞

如何进行细胞复苏：１)从液氮容器中取出冻存管，直接浸入３７℃温水中，并不时摇动令其尽快融化；２)从３７℃水浴中取出冻存管，打开盖子，用吸管吸出细胞悬液，加到离心管并滴加１０倍以上培养液，混匀；３)离心，１０００rpm，５min；４)弃去上清液，加入含１０%小牛血清培养液重悬细胞，计数，调整细胞密度，接种培养瓶，３７℃培养箱静置培养；５)次日更换一次培养液，继续培养。【温馨提醒】１)从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存，但ZuiHAO为对数生长期细胞。在冻存前一天ZuiHAO换一次培养液；２)将冻存管放入液氮容器或从中取出时，要做HAO防护工作(戴棉手套)，以免冻伤；３)冻存和复苏ZuiHAO用新配制的培养液。细胞复苏的时候，有些初次实验员将冻存管从液氮中取出后，放在室温下，经常发生冻存管爆炸，该怎么避免出现这种情况吗？其中在拧紧冻存管的时候是否有哪些细节要注意的？一般常用的方法是取出冻存管后在超净工作台中用酒精棉球擦试管口，再稍拧松盖子，再放３７度水浴锅中摇溶，在将细胞转移到装有３７度预热过的培养基的试管中，迅速离心，再用培养基洗一遍。

贴壁消化难题：１，先用PBS 把细胞洗两遍，使瓶内没有血清了，减少对胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在细胞有些消化下来时，拿着瓶口，运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体，这样细胞很快就下来了，还不需要吹打，分散也均匀；２，成团、絮状：消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象，血清可以终止胰酶的作用，如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清终止，如果消化液中加入了edta的话，就要将消化液倒干净，如果细胞贴壁要求不是很严格的话，一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基，加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性Zui强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势)，随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验，则不能弃去胰酶)，加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代，否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片)；消化过度：马上用培养基中和，用吸管吹打细胞，收集全部的细胞到以无菌的离心管中８００RPM ３分钟。弃上清，用全培重悬，换新的培养瓶继续培养，状态不HAO的细胞在培养的过程中会死亡脱落，在换液的时候可以清除掉！

KTC1细胞类似产品：：VMM39细胞、3T3 Swiss Albino细胞、HCC-94细胞

MEG01细胞类似产品：：OVCAR4细胞、Hs706T细胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4细胞

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Normal Rat Kidney细胞类似产品：：526 mel细胞、HVSMC细胞、Hepa-RG细胞

H-716细胞类似产品：：CHL-IU细胞、KYSE140细胞、MGH-U3细胞

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MES-SA-Dx5细胞类似产品：：CAL-39细胞、3T3细胞、38C13细胞

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HCT-8细胞类似产品：：NCI-H-295细胞、CNE1细胞、SK.MEL.28细胞

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BLO-11细胞类似产品：：3T3-Swiss细胞、MCF 7B细胞、16HBE细胞

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OACP4C细胞类似产品：：B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞、EOC 20细胞、NB-4细胞

KHYG细胞类似产品：：Cates 1B细胞、OVCAR8/ADR细胞、H2172细胞

Ha Fe细胞类似产品：：HCC1008细胞、AN3CA细胞、OVCAR.8细胞

R-1059-D细胞类似产品：：DanG细胞、C41细胞、RBL-1细胞

SW-579细胞类似产品：：OCI/AML3细胞、M-G63细胞、MAVER细胞

SW900细胞类似产品：：NCI-H510细胞、HCA7细胞、BxPC-3细胞

HRC-99细胞类似产品：：CW-2细胞、HA1800细胞、MO59J细胞

SNU-719细胞类似产品：：HcerEpic细胞、P36细胞、Sp2/0-Ag14细胞

HCC-2935细胞类似产品：：746T细胞、MOLT4细胞、253JBV细胞

MNNG-HOS细胞类似产品：：OCI-LY-3细胞、GB1细胞、TMD-8细胞

KPL4细胞类似产品：：GT1-1细胞、HCC1599细胞、TF-1细胞

HuH6细胞类似产品：：Mel526细胞、HEC151细胞、PC-3/M细胞

IA-LM细胞类似产品：：CCD-19Lu细胞、HS-5细胞、Potorous tridactylus Kidney 1细胞

EFM-192A细胞类似产品：：LA-N-6细胞、HOS TE85细胞、A-101D细胞

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