FM88 Cells(赠送Str鉴定报告)|人黑色素瘤细胞

"FM88 Cells(赠送Str鉴定报告)|人黑色素瘤细胞

细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

接收细胞相关问题：如不能在收到细胞后及时操作细胞，T２５及离心管发货的细胞将可以消毒后在３７度过夜，血清发货的细胞在室温下静置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰发货的可以在确认干冰未完全升华时将细胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升华，请即刻复苏细胞。T２５瓶及离心管在培养箱平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境，同时使部分因运输导致脱落的细胞贴壁，此步骤非常必要。T２５瓶如果在显微镜下可以看到部分不贴壁的细胞，可以收集上清后离心(１２００rpm，５min)后，将沉淀用新的培养基重悬后接种至新的培养瓶或皿中。部分细胞在运输过程中，由于不断震荡及环境不适，可能导致细胞破碎死亡，从而使培养基中漂浮很多细胞碎片及颗粒状物质。这种情况下，平衡后，贴壁细胞用PBS洗两遍再加新的培养基培养或者传代至新瓶中培养即可；悬浮细胞可以离心(１０００rpm，３min)收集细胞，并用PBS重悬后再离心一次，再用新的培养基重悬并接种细胞。

细胞生长：贴壁

CCD 841 CoTr细胞类似产品：：COLO-320HSR细胞、CHP212细胞、C3H-10T1/2细胞

C57 Mouse Tumor 93细胞类似产品：：Ramos(RA1)细胞、HeLa-229细胞、Sf21细胞

H-1838细胞类似产品：：SVG p12细胞、H1734细胞、WM-239A细胞

MDA 1386细胞类似产品：：LC2/Ad细胞、Huh-7.5.1细胞、HCC2185细胞

Jiyoye (P-2003)细胞类似产品：：H-1299细胞、COS1细胞、HMCB细胞

FM88 Cells(赠送Str鉴定报告)|人黑色素瘤细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，ZuiHAO经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

CLL-CII细胞类似产品：：SW13细胞、H-441细胞、D341Med细胞

HeLa-S3细胞类似产品：：Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15细胞、P3-X63-Ag8细胞、SW 579细胞

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Factor Dependent Cell-Paterson 1细胞类似产品：：HeLa S-3细胞、RPMI-8402细胞、G-Olig2细胞

Melan-a细胞类似产品：：HCC15细胞、HNE1细胞、HPAF-2细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分

GM05372细胞类似产品：：J 774A.1细胞、HF-91细胞、FaDu细胞

HCC38细胞类似产品：：NCI-H2171细胞、Hs 766.T细胞、MGC803细胞

NBL-12细胞类似产品：：PT-K75细胞、GM-637细胞、WI 38细胞

3T3-A31细胞类似产品：：RBE细胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50细胞、SupB15WT细胞

TALL-1 [Human adult T-ALL]细胞类似产品：：NCI-1155细胞、H-2052细胞、Panc05.04细胞

EoL-1细胞类似产品：：MEG-01细胞、U-138-MG细胞、C-Li-7细胞

细胞冻存的步骤：１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天ZuiHAO换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为５×１０６～１×１０７/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具体要看培养的细胞类型来选择；３)将分装上述细胞悬液于２ml冻存管中，每管０.２５ml。冻存管要将盖子盖紧，并标记HAO细胞名称和冻存日期，同时作HAO登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)；４)将装HAO细胞的冻存管放到冻存盒中，-８０℃冰箱过夜。；如果有程序降温器(放在-８０℃冰箱过夜，放入液氮罐)ZuiHAO;或者可以在４℃，２h;然后转到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，ZuiHAO取出一只冻存管细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。

贴壁细胞的消化方法介绍：１、胰酶。这是用得Zui多的。一般浓度在０.２５-０.５%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大，从几分钟到几十分钟不等。０.２５%的胰酶作用于单层贴壁的细胞，在３７度条件下，一般消化１-５分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含、镁的平衡液，否则影响活性。保存于-２０度。２、胶原酶。这种方法比较少，一般是用原代培养时，从组织消化下细胞。这种方法作用温和，对细胞损伤较小，但是，价格也较贵。中止同样是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般浓度在０.０２%左右。作用于细胞与间质，对细胞间也有一定作用。注意，它能显著影响pH值，而且在弱碱性条件下才易溶。因此，配制时应调节HAO酸碱度。它不能被终和。因此，消化下来的细胞要洗一遍。４、商品化的无酶消化液。个人的使用经常觉得对细胞的损伤比较大，但是分离成单细胞悬液的能力确实比较强。５、物理法。直接吹打或用细胞刮子将细胞刮下来。６、冷冻法。此方法仅能用于细胞传代时。无法使组织上的细胞脱落下来。本方法的原理，我想是因细胞冷冻后收缩，从而从培养瓶上脱落下来。YOU点是：对细胞损伤小，不需要中止或洗细胞，方便，不需要另外配制消化液。别适用那些贴壁不是别紧，又别娇气的细胞。不足是细胞常成小片脱落。此种方法曾用于因用其它方法传代导致大量细胞死亡操作的间充质干细胞、DC细胞的培养，效果非常满意。具体过程是：１、用较多的４度的PBS 洗涤一遍细胞(以６孔板为例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，静置操作台上，很快细胞就小片脱落，３、轻轻吹打，细胞即完全脱落，４、按一定比例传代。

NCIH1693细胞类似产品：：C4-2 B细胞、Metastatic Variant-522细胞、COLO-320DM细胞

DHBE细胞类似产品：：SW900细胞、Suzhou Human Glioma-44细胞、Hep 3B2_1-7细胞

HEC-1-A细胞类似产品：：WSU-DLCL2细胞、U-87 MG细胞、Ramos.2G6.4C10细胞

U14细胞类似产品：：IFRS1细胞、DR2R 1610细胞、H-1838细胞

TE-32细胞类似产品：：P3-Jiyoye细胞、hTERT-RPE细胞、EVSAT细胞

GM3190细胞类似产品：：RS4-11细胞、C17.2细胞、Hep 3B2.1-7细胞

M4e细胞类似产品：：GBCSD细胞、JeKo 1细胞、H676B细胞

NTera 2/cl.D1细胞类似产品：：H-1155细胞、OVCAR432细胞、ssMCF-7细胞

Mono-Mac-6细胞类似产品：：KP-N-NS细胞、OSA细胞、P 815细胞

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KPL-1细胞类似产品：：GM2219C细胞、WC00044细胞、Hs 940.T细胞

CMT167细胞类似产品：：NS1/1-Ag4.1细胞、LIM-1215细胞、MC/CAR细胞

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RAT2细胞类似产品：：Rat 2细胞、Walker256细胞、P31 FUJ细胞

Opossum Kidney细胞类似产品：：SK RC 52细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1细胞、NHA细胞

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KU-19-19细胞类似产品：：MM1.S细胞、SK-NEP-1细胞、HT细胞

PNT1A细胞类似产品：：RPE-1细胞、HCCLM6细胞、HLEC-SRA 01/04细胞

MIA Paca2细胞类似产品：：HUT-28细胞、rRTEC细胞、BL2141细胞

BE(2)M-17细胞类似产品：：P3X63 AG8-653细胞、GM00637B细胞、50.B1细胞

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CWR22-R1细胞类似产品：：Bat lung细胞、MCF-7B细胞、LS-411细胞

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SN12-PM6细胞类似产品：：Panc08.13细胞、CNE-1细胞、108CC15细胞

MBT2细胞类似产品：：PC-9/GR细胞、M-14细胞、MHCC97H细胞

Jurkat clone A3细胞类似产品：：LL/2 (LLC1)细胞、RTMC细胞、RIN m5F细胞

NB19-RIKEN细胞类似产品：：MODE-K细胞、NCI-H2342细胞、IPEC-J2细胞

Bac 1.2F5细胞类似产品：：130-T细胞、K422细胞、NTERA-2cl.D1细胞

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Hs888 Lu细胞类似产品：：NE-4C细胞、NTERA-2 cl.D1细胞、Ca9-22细胞

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A549ATCC细胞类似产品：：H-1435细胞、SJCRH30细胞、RGB细胞

MCF7细胞类似产品：：CHG5细胞、GES-1细胞、L132细胞

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B5537SKIN细胞类似产品：：MLTC-1细胞、HT 29细胞、OVCAR-3细胞

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Hs-578T细胞类似产品：：MV411细胞、SGC-996细胞、H-2126细胞

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P388细胞类似产品：：KG1细胞、H-378细胞、NH-6细胞

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C166细胞类似产品：：MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞、NCI-SNU-601细胞、NCI-H847细胞

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